两种肾炎湿热证血尿模型的比较

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1、两种肾炎湿热证血尿模型的比较【摘要】目的探讨价格低廉、中医证型突出的肾炎血尿模型的建立方法。方法将sPGN)aturiaandtypicalpathologicalchangesinrats.Anenhanceddampheatfactorcouldraiserataandhematuria,aspheatgroupshoaturiaandproteinuriathanthecontrolgrouporeaccordpheatSyndromes”inclinicalTCM,thusprovedto

2、beaneconomicalanimalmodelofnephritishematuriaaturia;Model;Dampheatsyndrome;MsPGN；Animal，experiment血尿为儿科各类肾脏病中最常见的症状，国内儿童发生率较高，近年研究提示，孤立性血尿并非良性过程，随着慢性肾脏病概念的提出，人们对其严重性更为关注，但目前尚无有效的治疗方法〔1〕。笔者在前期临床研究中发现，小儿血尿多表现为湿热证，予清热利湿之中药复方“金水清”能明显减轻血尿症状〔2〕。为进一步探求中药治疗本病的作

3、用机制，研制符合中医医理的肾炎血尿模型尤为重要。现就两种血尿模型的比较结果报道如下。1材料与方法1.1材料（1）6周龄SPF级雄性L，第6周时定期尾静脉注射1%BSA缓冲液10mg/(kg·d)，连续3次，8周时尾静脉注射SEB0.4mg/（kg·d)，连续3周。观察至第12周末。1.2.2湿热模型Ⅰ组造模方法与对照模型组相似，但第4周时，参照吴仕九等〔4〕报道，增加饮食和环境因素。将大鼠置于恒温恒湿箱中（温度35℃，相对湿度95%），温度和湿度逐步提升，每日不超过5℃，120h后移至自然环境。入箱前1

4、0d和入箱期间，都以高糖高脂饲料喂养。第8周不用SEB，而是注射等量生理盐水。观察至第12周末。1.2.3湿热模型Ⅱ组造模方法与湿热模型Ⅰ组相同，但在第5周，再次增加饮食和环境因素，置于造模箱中共240h。1.2.4正常组隔日口服酸化水2mL，定期尾静脉注射生理盐水，至第12周末。1.3指标的观察及检测定时观察、记录大鼠体温（肛温）、活动状态、食量、饮水、体质量、粪便、毛发等一般情况；用代谢笼每周末留尿检测各组大鼠12h尿红细胞数，并于0，12周末留尿测24h尿蛋白定量。至12周末，禁食12h后，麻醉处

5、死，无菌摘除眼球取血，测血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿素氮和肌酐；迅速打开腹腔取出肾组织，做光镜检测。1.4统计学分析采用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析，各组实验数据以±s表示,统计分析用单因素方差分析和t检验，检验差异有统计学意义设为P0.05。2结果2.1一般情况与正常组相比，造模动物均出现程度不等发热、嗜卧、行动呆滞、耸毛、饮水少、食欲不振、肛门红肿、大便烂、尿少色深、舌质暗红，部分大鼠出现眼眵、舌苔稍白腻、腹泻、皮下水肿等表现。3～5d后，各组上述表现基本恢复，

6、但湿热模型Ⅱ组皮下水肿、尿少色深等情况持续到实验结束。且湿热模型大鼠体质量、入箱前24h与出箱后24h体温净增值较正常组、对照模型组显著增加,见表1；提示增加环境与饮食湿热因素后，能出现更明显的发热、水肿等表现。2.2尿素氮、血肌酐水平测定12周末，与正常组比较，造模动物尿素氮、肌酐水平均有增高，对照模型组与湿热模型组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。2.3尿红细胞及尿蛋白测定与正常组相比，造模动物尿红细胞数、尿蛋白明显增多，且持续至实验结束。第9周，湿热模型Ⅱ组尿红细胞数开始显著多于湿热模

7、型Ⅰ组，说明增加环境与饮食湿热因素能加重血尿；湿热模型组尿红细胞、蛋白定量在统计学上不及对照模型组。见表1，2。表1各组实验大鼠入箱前24h与出箱后24h体温净增值12周末体质量、24h尿蛋白、肾功能比较注：与正常组比较，aP0.01;与对照模型组比较，bP0.05，cP0.01。表2各组实验大鼠尿红细胞比较注：与正常组比较，aP0.01，与对照模型组比较，bP0.05;cP0.01；与湿热模型Ⅰ组比较，dP0.05,eP0.01。2.4血脂水平测定12周末，与正常组比较，造模动物总胆固醇、三酰甘油水平

8、明显增高，对照模型组与湿热模型组之间差异不明显;湿热模型Ⅱ组三酰甘油显著高于湿热模型Ⅰ组。（数据资料略）2.5光镜组织学检查光镜下，造模大鼠均可见弥漫性肾小球系膜区增宽，系膜细胞、系膜基质增生，毛细血管腔狭窄，部分肾小球呈分叶状，个别肾小球萎缩，肾小囊轻度扩张，肾小管间质有炎细胞浸润。湿热模型Ⅰ组、湿热模型Ⅱ组病理改变相似，但没有对照模型组严重。3讨论近年来，在中医药研究领域，以中医理论为基础建立相关动物模型已成为共识〔5〕。要求从临床角度