温病湿热证大鼠模型肝线粒体k+

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1、温病湿热证大鼠模型肝线粒体K+【关键词】温病；肝；线粒体；酶活力；K+-Na+-ATP；湿热证；大鼠　　Abstract:［Objective］Toexploretheeffectsofthemodelestablishmentmethodsonenergymetabolismindicatorsofmodelrats.［Methods］Setupnormalgroup,modelgroup(highfatdiet+hightemperatureandhighhumidity+colonbacillus)，contrarygroup(routinediet

2、+hightemperatureandhighhumidity+colonbacillus)，theactivityoflivermitochondriaNa+-K+-ATPaseinesthecontentofphosphorus.［Results］TheNa+-K+-ATPaseactiveinmodelgrouparkablydecreased，andhadnosignificantlydifferencefromcontrarygroup.［Conclusion］ThelivermitochondriaNa+-K+-ATPasebeingremar

3、kablydecreasedisoneofpathologicalbasisofdamp-heatmodel，un-relateditochondria；enzymeactivity;K+-Na+-ATP;damp-heatsyndrome；rat湿热既是中医特有的致病原因，又是具有广泛临床基础的中医病证，涉及多系统、多器官、多组织的病变。为了进一步揭示湿热证的本质，我们模拟湿热发病原因，观察环境、生物因素对模型大鼠肝线粒体Na+-K+-ATPase活性的影响。　　1实验材料　　1.1实验动物　　清洁级l，4℃冰箱保存。（2）高脂饲料：胆固醇、胆酸钠，武汉

4、亚法生物技术有限公司提供。配方：普通饲料+胆固醇25g/kg+胆酸钠2g/kg+蛋黄粉80g/kg+猪脂100g/kg。（3）ATP酶测试盒：南京建成生物工程研究所。　　1.3实验仪器　　人工气候箱SHH-500GS型，重庆市永生实验仪器厂，电子体温计上海医用仪器厂，台式低温高速离心机TGL-16G-A，上海安亭科学仪器厂，721分光光度计16C14型，上海精密科学仪器有限公司。　　2实验方法　　2.1动物分组　　常规喂养3d，随机将24只大鼠分为：正常组、湿热模型组（高脂+高温高湿+大肠杆菌）、模型对照组（普食+高温高湿+大肠杆菌）。　　2.2造模方法　

5、　正常组：在正常温湿度（温度24～28℃，相对湿度60%～75%）环境下，普通混合饲料喂养29d。湿热模型组：在正常温湿度环境下，高脂饲料喂养2周后，再放入人工气候箱中（温度35℃，相对湿度95%），每天造模时间（上午8～12时，下午13～17时），高脂饲料喂养。12d后，灌服大肠杆菌109/ml·200g-1（预实验摸索剂量）。4h后，再加强灌服1次，继续放入人工气候箱造模观察3d。模型对照组：过程同湿热模型组，整个过程普食喂养。　　2.3标本采集　　分别于湿热模型组、模型对照组灌服大肠杆菌（浓度109ml·200g）后72h，脱椎处死大鼠。迅速剖腹取各

6、组肝组织置于4℃生理盐水中，洗去表面的残血，滤纸吸干，取大鼠肝脏6g，放入盛有10%福尔马林的容器中，存-20℃冰箱中。取肝组织1g，剪碎，按重量体积比，加入分离介质（内含蔗糖0.3mol/L，HEPES5mmol/L，EDTA0.5mmol/L，PH7.4）制备成10%的组织匀浆，随后以3000rpm离心10min，然后取组织匀浆上清液，再用分离介质按1：9稀释成1%组织匀浆。待测。　　3实验结果　　3.1症状体征　　湿热模型组：在灌服大肠杆菌前，饮水量、饮食量已有所减少，少数大便较软，存在少许粘液。尿黄浊，灌服大肠杆菌后，全部大鼠体温升高，3d后仍不退

7、。这些症状加重，大便次数增多，有些呈稀烂状。全部大鼠蜷卧懒动，耸毛明显，毛色暗黄无泽，与正常组比较普遍消瘦。模型对照组：体温同湿热模型组，维持时间稍短，饮水、饮食量较正常组少，大便有些变软。余与湿热模型组相同。正常组动物：在喂养四周期间，以上指征均无明显变化。　　3.2肝线粒体Na+-K+-ATPase水平变化　　湿热模型组、模型对照组肝线粒体Na+-K+-ATPase活性均较正常组非常显著降低（P<0.01），湿热模型组与模型对照组比较无显著性差异（P>0.05）。见表1。表1各组大鼠肝线粒体Na+-K+-ATPase水平比较（略)　　4讨论

8、肝脏是能量代谢的重要器官，含有丰富的线粒体，而线粒体是细胞有氧呼吸