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《2006-秋冬季青岛地区婴幼儿病毒性腹泻病原分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、2006-秋冬季青岛地区婴幼儿病毒性腹泻病原分析【摘要】目的了解青岛地区引起婴幼儿病毒性腹泻的主要病原组成及其流行情况。方法2017年9~12月，采集青岛市儿童医院婴幼儿病毒性腹泻大便样品共38份，采用胶体金法检测轮状病毒；采用RT-PCR法检测星状病毒和人杯状病毒。结果在38份样品中检测到轮状病毒7份，阳性率为％;检测到星状病毒4份，阳性率为％;检测到人杯状病毒6份，阳性率为％。其中1份混合感染星状病毒和人杯状病毒，1份混合感染轮状病毒和星状病毒，未发现轮状病毒和人杯状病毒的混合感染。结论2017年秋冬季，引起青岛地区婴幼儿感染性腹泻的3种主要病毒中，以轮状病毒为主，其
2、次为人杯状病毒和星状病毒。【关键词】腹泻，婴儿；轮状病毒属；人杯状病毒；星状病毒属[ABSTRACT]ObjectiveToinvestigatethemainpathogensandtheepidemicofviraIdiarrheaininfantsinQingdao.MethodsThirty-eightstoolsampleswerecollectedfromdiarrheapatientsattendingQingdaochildrerVshospitalduringSep.toDec.of2017.Rotaviruswasdetectedbycolloidal
3、Goldmethod.AstrovirusandCalieivirusweredetectedbyAmongthe38specimens,sevenwasRotaviruspositive(%),fourwereAstroviruspositive(%)andsixwereCaliciviruspositive%.OnesamplehadmixedinfectionofAstrovirusandCalicivirus:one?shadmixedinfectionwithAstrovirusandRotavirus.ConclusionThethreema.inviruse
4、s!nvolvedinviraldiarrheaduringautumnandwinterof2017inQingdaowereRotavirus,AstrovirusandCalicivirus,inwhich,Rotavirusplacedthefirst.[KEYWORDS]Diarrhea,infantile;Rotavirus;Calicivirus:Astrovirus小儿腹泻是世界范围内影响儿童健康的常见病，也是引起婴幼儿死亡的一个主要原因［1］。随着抗生素的广泛应用，加之人们生活水平的提高，卫生习惯的改善，细菌性腹泻得到了有效控制。目前，病毒感染腹泻是导致
5、全球儿童急性腹泻的重要原因，这类病毒主要包括轮状病毒、人杯状病毒以及星状病毒，这3种病毒也是世界范围内最为流行的病毒性胃肠炎的主要原因［2］。本研究旨在了解目前青岛地区婴幼儿病毒性腹泻病原谱，掌握其流行现状为以后加强监测和流行病学调查打好基础。1材料和方法材料2017年9~12月，收集青岛市儿童医院婴幼儿非细菌性腹泻粪便标本共38份。方法引物合成星状病毒检测用引物Mon269、Mon270序列参见文献［3］，扩增片段大小为449bp;人杯状病毒检测用引物289、290由国家CDC肠道病毒实验室提供，诺如属病毒扩增片段大小为319bp，扎如属病毒扩增片段大小为331bp,上
6、述引物由上海闪晶生物技术研宄所合成。引物序列见表1。表1用于PCR扩增的引物序列核酸提取取少量粪便标本，加入，振荡器混匀，制成体积分数为~的悬液，以12000r/min离心lOmin,取上清200uL进行核酸提取，提取试剂盒采用美国Roche公司生产的HighPureViralRNAKit,按试剂盒使用说明书提取病毒RNA。轮状病毒检测方法采用胶体金法进行检测，试剂盒由北京万泰生物药业有限公司生产，批号为20170030,操作按试剂盒说明书进行。星状病毒检测方法RT-PCR采用日本TaKaRa公司的OnestepRNAPCRkit(AMV)，反应体系为10XBuffer5
7、uL,25mmol/LMgC1210uL,10mmol/LdNTPs5uL,4X107U/LRnaselnhibitorlPL,5X106U/LAMV-0ptimizedTaq1uL，5X106U/LAMVReverseTranscriptaseXL1uL，Mon269和luL,Mon270各1yU引物反应浓度为g/L,模板1uL，补加水到50uLoRT-PCR条件为42°C30min,94°C2min,94°C3Os,56°C30s,72°Clmin,35个循环后72°C延伸1Omin。取扩增产物6pL点样于20g/L琼脂糖
