5-1dna的粗提取与鉴定导学案自用

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1、《课题1DNA的粗提取与鉴定》导学案K学习目标31.了解DNA的物理、化学性质;(重点)2.理解DNA粗提取与鉴定的原理;(重点)【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。一、基础知识【活动1】阅读教材P54“基础知识”,讨论并回答下列问题:1.(记忆)提取生物大分子的基本思路是利用它们的的不同进行分离。2.(记忆〉DNA的溶解性特点:DNA在中溶解度不同;DNA不溶于而蛋白质溶于。【思考1】据图5—1分析:DN八在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用

2、什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?【思考2】利用DNA不溶于的原理,可以达到0的。3.(记忆)DNA的耐受性特点:能分解蛋白质而不能分解DNA;在°C时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性。能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。4.(记忆)DNA的鉴定原理:当鉴定提取出的物质是否是DNA吋,需要使用进行鉴定。在条件下,该试剂与DNA反应,呈现。二、实验设计:【活动2】阅读教材P55“实验设计”,讨论并回答下列问题:1.(记忆)实验材料的选取:选取材料时应木着、、的原则。【思考3】你认为教材提供的材料

3、中不适合提取DNAO2.(记忆)破碎细胞,获取含DNA的滤液:鸡血:向鸡血细胞液中加入一定量并玻棒搅拌,用过滤后,收集。详葱:向研钵中加入一定量和,搅拌研磨,用过滤后,收集。【思考4】在以上实验屮,蒸馏水的作用是,洗涤剂的作用是,食盐的作用是。3.(学会)去除滤液中的杂质:方案一:30mL滤液一加NaCl使DNA溶解->过滤得滤液一加蒸馏水使DNA析出-过滤得过滤物一放到2mol/LNaCl溶液中溶解一DNA—NaCr溶解液方案二:30mL滤液一加嫩肉粉(木瓜蛋白酶)一静賈10分钟一得DNA滤液方案三:30mL滤

4、液一°C处理一过滤得DNA滤液【思考5】以上三个方案的原理分别是什么?方案一原理::方案二原理:;方案三原理:o【思考6】方案一:“加NaCl使DNA洛解一过滤得滤液”的0的是除去(可溶、不溶)于NaCl溶液屮的细胞杂质“加蒸馏水使DNA析出一过滤得过滤物”的目的是除去(可溶、不溶)于NaCl溶液巾的细胞杂质4.(记忆)DNA的析出:DNA滤液与混合,静置一段时间后析出的就是DNA。1.(记忆)DNA的鉴定:取2支洁净的试管,编号甲、乙,各加入等量的溶液。甲屮放入少白色丝状物,使之溶解。在甲、乙试管屮各加4mL,

5、浞合均匀。沸水浴5min,观察颜色变化,甲试管呈现色。三、操作提示【活动3】(记忆)阅读教材P56“操作提示”和P57“课题延伸”,关注下列注意事项:1.在鸡血中加入防止凝固;鸡血静置或离心后除去,以提高细胞悬液浓度。2.实验屮使用和,以免DNA被吸附。3.玻棒沿方向搅拌(细胞破裂时快速搅拌),玻棒不要碰到。4.二苯胺试剂要。5.为提高DNA纯度,实验中通常使用的洗涤剂有等。操作过程及提示:方法步骤加入物质目的1.制备鸡血细胞液柠檬酸钠2.提収鸡血细胞核物质20ml蒸馏水3.溶解细胞核内的DNA2mol/L的Na

6、Cl溶液4.析出含DNA的黏稠物蒸馏水5.滤取含DNA的黏稠物6.将DNA的黏稠物再溶解2mol/L的NaCl溶液7.过滤含DNA的NaCl溶液8.提取含杂质较少的DNA冷却的95%的酒精50ml9.DNA的鉴定A:⑴2mol/L的NaCl溶液5ml(2)加入丝状物(DNA)(3)4ml二苯胺B:(l)2mol/L的NaCl溶液5ml(2)4ml二苯胺总结:1.共有“次搅拌、次过滤,次析出2.加入“次蒸馏水,次NaCl溶液,次洒精”课后巩固:1.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析山含DNA的

7、粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于()A.前者用來溶解血细胞,后者用來溶解DXAB.前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液C.前者用来分离细胞核与细胞质,后者用来提取DAD.前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出A.蒸馏水B.ATP3.下列不适宜作为DNA提取的实验材料是A.鸡血细胞B.蛙的红细胞C.(WmL的葡容液()D.二氧化碳2.为了便于提取鸡血细胞屮的1^八,下列所采取的措施中,最恰当的是:向经抗凝剂处理的鸡血细胞液加入()C.猪血D.菜花4.用过滤的方法得到细胞屮的氯化钠溶液后,

8、还要用洒精处理,可以得到较纯化的DNA.这是因为()A.DNA易溶于酒精,而滤液中某些杂质不易溶于酒精B.DNA不易溶于酒精,而滤液屮某些杂质易溶于酒精C.DNA和滤液屮其他成分更易溶于洒精D.DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精白水解酶处理血样的目的是(A.除去血浆中的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质1.在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋0水解酶处理,然后用有机

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