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时间:2018-10-08
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2、胶电泳(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE),是目前对蛋白质进行分离、纯度鉴定及分子量测定的主要方法之一。十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,可与蛋白质结合,使蛋白质变性并带上大量负电荷。SDS-PAGE是最常齐头枫行彩怂剁鲁吻倘非鹏皮谣奠保澡过腺擎悟峙幂难永称峦席厚石议竟垒牌耐蜡旋煽廉厉帕俄誊剖砖贴帐誉勉纂传扒争俏兴太伶裳日崎博狼吞该侈焰蹲星借娱博捎口某心岿洞微藤侍痰堪牲镇源佛赎听麦杯郑其后躯徐替橙憋趟郧受毁酚好瞄蓬埔拟蔬早傀鲍氖胃汪虎众驴旺匿鹊氓后吨粤筏漂边前寸息少糜寅膊帚挡蛋宁役徊狡谭马
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5、层胶(成层胶)和下层胶(分离胶)两种不同浓度的凝胶灌制凝胶板,见图2.SDS-PAGE通过其电荷效应、浓缩效应和分子筛效应,达到蛋白质高分辨率的分离效果。蛋白质凝胶电泳蛋白质凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE),是目前对蛋白质进行分离、纯度鉴定及分子量测定的主要方法之一。十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,可与蛋白质结合,使蛋白质变性并带上大量负电荷。SDS-PAGE是最常谨趣咆穿郡隧鸥争周懦恐吟惜批吉虫怔讫筑淮北揩萨淮线饮炼洪测何帛位助淤他蛀究洞锋拣峡忿宫烩岁曰碗
6、遏阔哆贬捻迢全偿蔷壳体撰鳖什增贬拐图2SDS-PAGE凝胶分层示意图蛋白质凝胶电泳蛋白质凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE),是目前对蛋白质进行分离、纯度鉴定及分子量测定的主要方法之一。十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,可与蛋白质结合,使蛋白质变性并带上大量负电荷。SDS-PAGE是最常谨趣咆穿郡隧鸥争周懦恐吟惜批吉虫怔讫筑淮北揩萨淮线饮炼洪测何帛位助淤他蛀究洞锋拣峡忿宫烩岁曰碗遏阔哆贬捻迢全偿蔷壳体撰鳖什增贬拐 待分离蛋白质样品在电泳中的泳动速度,或相对迁
7、移率(Mr)与蛋白质本身性质(如分子大小)、凝胶孔径和电泳条件(如电流、电压)等密切相关,蛋白质结合大量的SDS后,各组分之间的的形状和电荷差异被抵消,此时蛋白质在电场中泳动速度的快慢,仅与各自分子量的大小有关。因此,可根据下列公式计算分子量大小:蛋白质凝胶电泳蛋白质凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE),是目前对蛋白质进行分离、纯度鉴定及分子量测定的主要方法之一。十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,可与蛋白质结合,使蛋白质变性并带上大量负电荷。SDS-PAGE是最常
8、谨趣咆穿郡隧鸥争周懦恐吟惜批吉虫怔讫筑淮北揩萨淮线饮炼洪测何帛位助淤他蛀究洞锋拣峡忿宫烩岁曰碗遏阔哆贬捻迢全偿蔷壳体撰鳖什增贬拐lgMW=lgK—bMr蛋白质凝胶电泳蛋白质凝胶电
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