肝癌患者pbmc中th1-th2类细胞因子mrna表达

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1、肝癌患者PBMC中TH1/TH2类细胞因子mRNA表达王华，张天一，朱昌来，张春辉，倪启超【摘要】　　目的探讨TH1类细胞因子IL2、IFNγ及TH2类细胞因子IL4mRNA在Ⅰ期和Ⅱ期肝癌患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达模式，并观察IL2、IFNγmRNA在手术前后的表达变化。方法采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）方法测定8例Ⅰ期和10例Ⅱ期原发性肝癌患者手术前后及15例健康人外周血中IL2、IFNγ的表达，并用凝胶图像分析系统进行图像分析。结果在18例肝癌患者中，IL

2、2、IFNγmRNA的表达率分别为16.7%、5.6%，低于IL4的表达率88.9%（P0.05），呈现明显的TH2偏移状态，且IL2、IFNγ的表达强度在0.10～0.11之间，也远低于IL4的0.21～0.22；在8例Ⅰ期肝癌患者中，术前有25.0%(2/8)表达IL2mRNA，12.5%(1/8)表达IFNγ，高于对照组的13.3%（2/15）、5.6%（1/15）；手术治疗后两者的表达率分别是50.0%、37.5%，高于术前组；术前组及正常对照组两种细胞因子mRNA表达强度（0

3、.10～0.12）明显低于术后组的0.20～0.22(P0.05)。另外，10例Ⅱ期患者手术前后术均无IFNγmRNA的表达。结论原发性肝癌患者PBMC中也出现典型的TH2漂移，另外，Ⅰ期肝癌经手术后可能增加外周血TH1类细胞因子mRNA的表达强度。但短期内对中晚期肝癌患者PBMC中的TH1类细胞因子mRNA的表达无明显影响。【关键词】肝细胞癌　TH1/TH2细胞因子；RTPCR　　ExpressionofTH1/TH2CytokinesmRNAofPBMCinHepatocarcinomaPa

4、tients　　Abstract：ObjectiveToexploretheexpressionpatternofTH1typecytokinesIL2、IFNγmRNAandTH2typecytokineIL4mRNAinperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)ofprimaryhepaticcancer(PHC)patients,andobservethedifferentexpressionofIL2andIFNγmRNAbeforeandafte

5、rthetumorresection.MethodsTheexpressionofIL2、IL4andIFNγmRNAof18patientsand15normalvolunteersinPBMCethodandtheresultsageanalysissystem.ResultsTheexpressionofIL2、IFNγmRNARNARNAalcontrolgroup（0.10～0.11）orexcision.ConclusionThetypicalshiftofTH2occurre

6、dinPBMCsofPHCpatients.Besides,surgicaltreatmentmightincreasegeneexpressionofTH1typecytokinesinPBMCofPHCpatientsaybehasnoobviouseffectonpatientsediumorendstageinshortperiod.　　Keya;TH1/TH2cytokines;RTPCR　　0引言　　原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。自从TH1、TH2的概念提出以来，肿瘤的TH1/

7、TH2反应是近年来国内外研究的热点，我们用RTPCR法，检测18例I期和Ⅱ期原发性肝癌患者手术前IL2、IFNγ及IL4mRNA表达并探讨手术治疗对IL2、IFNγmRNA的表达的影响。　　1资料与方法　　1.1临床资料18例原发性肝癌患者，其中Ⅰ期8例，Ⅱ期10例，均系南通大学附属医院普外科2003年11月～2004年2月确诊的住院病人。分别于手术前后一周各抽取外周血4ml。术前均未接受放疗、化疗及免疫治疗。其中男11例，女7例，年龄40～75岁，中位年龄50.2岁；健康对照组中男10

8、例，女5例，中位年龄48.5岁。　　1.２主要仪器与试剂PCR扩增仪（美国MJ公司PTC100型扩增仪），凝胶图像分析系统(上海复旦四星高科技术公司);Trizol（Sangon），逆转录酶MMLV试剂盒（GIBCO）,TaqDNA聚合酶(Sangon)，各细胞因子引物由Sangon公司合成。　　1.3方法　　1.3.1总RNA制备及逆转录反应见　　3讨论　　T细胞介导细胞免疫是宿主抗肿瘤免疫的主要形式，辅助性T细胞可以分为TH1和TH2两个功能亚群，其中TH1细