埃博拉出血热采样及标本运送ppt课件

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时间:2018-10-08

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1、埃博拉出血热的采样与防护一、基本情况潜伏期2-21天,一般为5-12天。传播途径:接触传播、气溶胶传播。临床表现:突然发病,各器官出血,肌肉疼痛,DIC(弥散性血管内凝血)等90%的死亡患者在发病后12天内死亡(7-14天)。病死率高,可达50%-90%。尚无特效药和疫苗。埃博拉出血热是最严重的出血热一、基本情况型别⑴扎伊尔型(Ebola-Zaïre):毒力强,人感染后病死率高。⑵苏丹型(Ebola-Sudan):⑶科特迪瓦(Ebola-Côted’Ivoire):对黑猩猩有致死性,对人的毒力较弱。⑷雷斯顿型(Ebola-Reston):在非人灵长类中有致死性,人感染不发病。

2、抵抗力埃博拉病毒在室温下稳定,60℃1小时大部分病毒被灭活,对紫外线、γ射线、甲醛、次氯酸、酚类等消毒剂和脂溶剂均敏感。二、临床表现及诊断1、流行病学:来自疫区,或3周内有疫区旅行史,或与患者、感染动物接触。2、临床表现:急性起病,发热伴极度乏力、牙龈出血、鼻出血、黏膜出血、瘀点和紫斑、血便等及其他症状(头痛、肌痛、咽痛、恶心、呕吐)。3、实验室检测:(1)病毒抗原阳性(2)血清特异性IgM抗体阳性(3)恢复期血清IgG比急性期有4倍升高(4)核酸阳性(5)分离到埃博拉病毒疑似病例:1+2确诊病例:疑似病例+3中任一检测阳性三、标本采集-生物安全防护1、所有样本的采集或处理应

3、遵守《医院感染管理规范》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关生物安全规定,在标准预防的基础上采用飞沫和接触隔离的预防措施。2、样本采集时,应严格按照BSL-3级实验室规定做好个人防护。应穿戴医用防护服、可遮盖口鼻的医用防护口罩(N95)、双层乳胶手套、护目镜、头部面部保护罩、专用橡胶靴等。三、标本采集-生物安全防护3、采血场所应在相对独立的场所,应符合负压要求。如果不具备上述条件,可用相邻的房间提供足够的安全空间,备有除了病人常规护理的材料外应具备手套、防护服和防护面具等,同时要装备有洗手的设施和装有消毒液的桶。4、采样人员应由经过生物安全防护培训的人员执行,采血时应

4、2人在场。四、标本采集与保存1、标本采集时间初次送检:目前检测方法中主要是核酸检测,埃博拉出血热患者发病后3天内的血标本,病毒核酸阳性的可能性很小,因此建议采集发病72小时后的血标本送检。再次送检:如果留观/疑似病例发病72小时后血标本实验室检测阴性,但临床表现比较典型的患者,可在初次检测24-48小时后再次采集血标本送检。解除隔离治疗送检:确诊病例解除隔离治疗前采集血标本进行复检。四、标本采集与保存2、标本采集方法⑴.用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血,每管3mL,标记后4℃保存。并填写标本采集登记表(附表1)⑵.标本采集数量留观病例、疑似病例采集4管,其中2管送省疾控中心进

5、行埃博拉病毒检测,2管保存于本单位,待排除埃博拉病毒感染后用于其他病原体的筛查;确诊病例采集恢复期血标本,送国家疾控中心病毒病所进行检测。四、标本采集与保存3、标本保存方法⑴.未分离血清的全血标本应4℃保存,并尽快分离血清;⑵.血清标本长期保存应置于-70℃以下;⑶.标本保存不超过1周可置-20℃。4、标本信息收集(填写埃博拉出血热流行病学个案调查表)病例一般信息:姓名、性别、年龄、国籍来自疫区国名、入境时间,发病日期,发病前21天的疫区居住史,旅行史、类似病例接触史等。主要临床症状:发热、严重乏力、头痛、肌痛、呕吐、腹泻、出血表现等标本详细信息:采样时间、种类、标本量等。送

6、样信息:负责送检的联系人姓名、联系电话、送检时间等标本容器第一层2mL,可离心有垫圈第二层15mL,封口膜封口易标记五、标本包装与运输1、包装方式:A类包装(UN2814要求)按照三重包装系统包装:第一层包装(可密封样本袋、50mL离心管);第二层安全壳容器(防水、防漏);第三层外层运输包装。样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中,为降低破碎或泄漏的风险,用吸水纸等填充物固定标本袋。安全壳容器和外包装放冰袋。五、标本包装与运输2、运输方式:全血采用冷藏运输,血清可采用冷冻运输不要打开采集管或分装样本。专人专车。六、实验室检测凡涉及埃博拉病毒的分离、培养和动物实验,需在生物安全

7、4级(BSL-4/ABSL-4)实验室内进行。涉及未经培养有感染性材料的实验活动,需在BSL-3实验室内进行。血清学检测应在BSL-3实验室内,且标本需先60℃1小时灭活后,再进行后续实验操作。核酸检测时,需在BSL-3实验室内加入核酸提取裂解液,完成病毒RNA提取,并对装有病毒RNA样品管的外表面进行彻底消毒后,可在BSL-3实验室以外进行扩增检测。六、实验室检测1、病原学检测:⑴核酸检测:主要检测方法。发病后3天内,血标本中埃博拉病毒核酸检出率低,检测阴性不能排除埃博拉病毒感染。发病后3~10天血标

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