细菌的生理与培养特性课件

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1、第二节细菌的生理与培养特性1细菌的营养类型2细菌的生长繁殖条件3细菌的生长繁殖4细菌的代谢与生化反应5细菌的人工培养和菌种保存1细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。1.1自养菌（autotrophicbacteria)：能量来源---无机物（碳酸盐、硝酸盐等）1.2异养菌(heterotrophicbacteria)：能量来源---有机物（糖类、蛋白质）腐生菌(saprophyte)：寄生菌(parasite)：大部分病原菌2细菌的生长繁殖条件2.1营养物质：水：70-90％无机盐：碳源

2、：氮源：生长因子:细菌生长必需，而自身不能合成的化合物.如：维生素、嘌呤、嘧啶、氨基酸。流感嗜血杆菌：X因子（高铁血红素）；V因子（辅酶Ⅰ或Ⅱ）2.2酸碱度（pH)：2.3温度：2.4气体环境：氧气、二氧化碳需氧菌（aerobe）:专性需氧菌(obligateaerobe)：结核分枝杆菌微需氧菌（microaerophilicbacterium）：氧浓度5-6%，空肠弯曲菌、幽门螺杆菌厌氧菌（anaerobe）:专性厌氧菌(obligateanaerobe):破伤风梭菌、肉毒梭菌缺乏呼吸酶①缺乏氧化还原电势较高的酶:细胞色

3、素、细胞色素氧化酶,不能氧化营养物质获得能量②缺乏过氧化物酶与过氧化氢酶:缺乏分解有毒氧基团的酶,不能处理代谢中产生的O2－和H2O2O2－---H2O2---H2O兼性厌氧菌（facultativeanaerobe）:大多数病原菌4细菌的代谢与生化反应生化试验或称生化反应：细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样，其代谢产物各异，可借以区别与鉴定细菌的种类。利用生化方法来鉴定细菌的试验，统称为细菌的生化试验或称生化反应。主要有：4.1糖类（碳水化合物）的代谢试验4.2蛋白质、氨基酸分解产物试验4.3碳源利用试验4.

4、4酶类试验4.5其他试验4.1糖类（碳水化合物）的代谢试验4.1.1糖、醇、苷类发酵试验原理：各种细菌因含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，所以分解糖类的能力不同，有的能分解多种糖类，有的仅能发1－2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类后产生的代谢产物因菌种不同而异，有的仅产酸，有的产酸、产气，故可利用此特点以鉴定细菌。应用：沙门氏菌可发酵葡萄糖，但不发酵乳糖。大肠埃希菌可发酵葡萄糖及乳糖。有些菌可发酵同一种糖类，其发酵所产生的代谢产物也不尽相同。如大肠埃希菌和志贺菌均可发酵葡萄糖，但前者产酸、产气，而后者仅产酸，故可利用此试

5、验来鉴定细菌。4.1.2葡萄糖代谢类型鉴别试验原理：又称氧化/发酵（O/F）试验。细菌在分解葡萄糖的代谢过程中根据对氧分子参加的需要，分成两种类型：需要氧分子参加的氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖。这类细菌通常为兼性厌氧菌。不分解葡萄糖的细菌，称为产碱型。应用：可用于鉴别肠杆菌科细菌（发酵型）与非发酵菌（氧化型或产碱型）。也可用于鉴定葡萄球菌（发酵型）和微球菌（氧化型）。4.1.3β－半乳糖苷酶试验（ONPG试验）原理：产β－半乳糖苷酶的细菌，能分解邻硝基酚－β－半乳糖苷（O

6、NPG），生成黄色的邻硝基酚。应用：迟缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属为阴性。本试验为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。4.1.4甲基红试验原理：某些细菌在代谢过程中分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸可进一步代谢分解为乳酸、甲酸、乙酸等，使培养基的pH值下降到4.5以下，加入甲基红指示剂即显红色（甲基红变红的范围为pH4.4-6.0);如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、酮、醛、气体和水），培养基pH值在5.4以上，甲基红

7、试验呈橘黄色。应用：主要用于大肠埃希菌（阳性）和产气肠杆菌（阴性）的鉴别。肠杆菌中许多细菌甲基红试验也阳性，如沙门菌、志贺菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌等为阳性，肠杆菌属、克雷伯菌属为菌种为阴性。4.1.5V－P（Voges-Proskaurer）试验原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，进一步将丙酮酸脱羧成为乙酰甲基四醇，后者在碱性环境中被空气中的氧氧化成为二乙酰，进而与培养基中的精氨酸等所含的胍基结合，形成红色的化合物，即V－P试验阳性。应用：本试验常与甲基红试验一起使用。二者结果通常相反。即如大肠埃氏菌、沙门菌、志贺菌等甲基红呈

8、阳性反应，而VP反应则为阴性。沙雷菌、阴沟肠杆菌等，VP反应为阳性，而甲基红反应为阴性。4.2蛋白质、氨基酸分解产物试验4.2.1吲哚试验（靛基质试验）原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解培养基中的色氨酸，生成吲哚。吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。4