海洋胶原肽对伤口愈合的研究

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1、海洋胶原肽对大鼠剖宫产术后伤口愈合的影响提纲一、研究背景二、研究目的三、材料和方法四、结果五、讨论六、结论七、致谢一、研究背景1.剖宫产的现状2.剖宫产的并发症3.伤口愈合不良的危害4.伤口愈合的过程5.治疗现状6.胶原蛋白7.海洋胶原肽(MCP)剖宫产的现状科学技术孕产妇因素医学因素社会因素剖宫产率急剧上升剖宫产的现状剖宫产的现状中国20世纪90年代初城市剖宫产率达20%左右；自90年代中期开始快速攀升，90年代末国内大城市医院的剖宫产率即已达到30%～40%；目前虽无全国统计数据，但大多数城市医院报道的

2、剖宫产率约在40%～60%，高者甚至达60%～80%以上。剖宫产的并发症近期：麻醉意外、术后出血、产后感染、肺栓塞远期：盆腔粘连、子宫内膜异位症、影响子宫的解剖结构、对身体及各器官的影响、再孕时剖宫产切口瘢痕处妊娠、子宫破裂伤口愈合不良的危害若伤口愈合不良，将给产妇带来术中术后出血、术后切口感染、切口裂开等危害，并增加慢性盆腔痛、盆腔粘连、子宫内膜异位症、剖宫产瘢痕妊娠(CSP)、继发不育、流产的发生率。伤口愈合过程治疗现状基因工程的应用生物工程材料的使用纳米技术的应用中西医结合技术的应用创面覆盖物的应用营

3、养辅助治疗激光刺激高压氧治疗其他治疗方法:心理治疗、真空辅助创口愈合技术胶原蛋白胶原蛋白体外应用有改善表皮细胞微循环和促进皮肤组织新陈代谢的作用，从而加速组织再生与修复。胶原蛋白含有丰富的细胞代谢所需的氨基酸，可改善皮肤细胞的生存环境，促进皮肤组织的新陈代谢。海洋胶原肽(MCP)海洋胶原肽：氨基酸组成均衡、全面，有很好的溶解性、低黏度、高浓度、水溶性、热稳定性，在体内吸收快、利用率高。国内外已有部分研究论证了海洋生物活性肽对实验动物具有抗损伤和抗氧化等功效。我们课题组以往的研究表明：海洋低聚肽具有延缓皮肤衰

4、老、保护肾功能、调节血糖、改善老年记忆、调节免疫、防辐射及预防骨质疏松的活性；海洋胶原肽具有较强的抗氧化活性，可以清除体内的自由基，减少炎症反应，增强小鼠免疫功能，进而增强抗感染能力。二、研究目的观察MCP对伤口愈合的影响探讨MCP促进愈合的作用机制三、材料和方法受试物：海洋胶原肽淡黄色粉末，由北京中食海氏生物技术有限公司提供。以深海鱼的鱼皮为主要原料，经过清洗匀浆-复合偶联酶解-酶失活-脱脂-多级膜分离-渗透精制-浓缩-脱色-造粒干燥等工艺制成。根据我们课题组以往实验及预实验的结果，设立0.13g/kg.

5、bw、0.38g/kg.bw、1.15g/kg.bw三个MCP剂量组，对照组给予等体积溶剂灌胃。材料实验动物孕16天的健康SD大鼠350~400gSPF级动物房饲养饲养环境温度21~23℃湿度50%~60%RH材料主要仪器UV7512GD型紫外可见分光光度计超速离心机XHC型漩涡混匀器电子天平光学显微镜－80℃低温冰箱Pclab-UE生物医学信号采集处理系统主要试剂羟脯氨酸测试盒FGF抗体TGF-β1抗体CD31兔二步法免疫组化检测试剂盒浓缩型DAB试剂盒其他试剂均为国产或进口分析纯实验方法动物分组及处理9

6、6只孕16天的SD大鼠，随机分为4组，每组24只，均给予基础饲料。经过适应性喂养3天后，在孕19天进行剖宫产手术，手术当天在基础饲料的基础上增加灌胃。低剂量MCP组，术后每天给予0.13g/kg.bw剂量的海洋胶原肽灌胃；中剂量MCP组，术后每天给予0.38g/kg.bw剂量的海洋胶原肽灌胃；高剂量MCP组，术后每天给予1.15g/kg.bw剂量的海洋胶原肽灌胃；空白对照组，术后每天灌胃相同体积的生理盐水。实验方法手术方案1%苯巴比妥钠腹腔注射麻醉，在下腹部沿腹中线切开3cm纵切口，打开腹腔，在两侧子宫背对

7、肠系膜侧的中部各做2.0cm的纵向切口，挤出大鼠幼崽和胎盘。用5-0可吸收性外科肠线连续缝合，深腹、筋膜、腹膜用4-0丝线缝合，皮肤用4-0丝线缝合。术后涂2%碘酊，注射青霉素0.1ml，放回鼠笼里，注意保暖，术后禁食1天，正常饮水。实验方法样品的收集在术后7天、14天、21天每组分别取8只大鼠，颈椎脱臼法处死动物，取伤口皮肤、子宫组织，称重后，1/2用于测量力学指标，1/4放入液氮中迅速冷冻，-80℃冰箱中保存。剩下的1/4组织用10%中性甲醛固定后，备用。观察指标一般指标：大鼠的一般情况、伤口愈合的时间

8、、肉眼观察情况。每周记录大鼠体重及摄食量，每3天测量大鼠腰围，脏器收集时观察腹部的粘连情况，对粘连情况进行分级判断，同时记录子宫重量。力学指标：皮肤张力和子宫破裂压力。羟脯氨酸含量：样本碱水解法。病理组织学检查：HE染色、胶原染色。细胞因子的表达：免疫组织化学染色。统计分析数据以均数±标准差(xs)表示数据采用SPSS13.0处理计量资料采用T检验、单因素方差分析组间的粘连情况采用秩和检验检验水平α=0.05