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时间:2018-10-04
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1、血管壁与血小板生理性止血的基本过程生理止血:小血管损伤后血液将从血管流出,但在正常人,数分钟后出血将自行停止,称为生理止血。1.血管收缩损伤刺激;内皮细胞及血小板释放缩血管物质;血管肌源性收缩2.血小板止血栓形成血小板粘附、聚集在血管受损处,形成止血栓(初步止血)3.血液凝固定义:血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程。方式:激活凝血系统,使血浆中纤维蛋白原纤维蛋白,形成纤维蛋白网加固血小板血栓(有效止血)。4.抗凝系统与抗凝系统与此同时,血浆中也出现了生理的抗凝血活动与纤维蛋白溶解活性,以防止血凝块不断增大和凝血
2、过程漫延到这一局部以外。显然,生理止血主要由血小板和某些血浆成分共同完成。项目13血管壁和血小板的检验模块1血管壁止血的检验1、毛细血管脆性试验/束臂试验(CFT)概述:血管壁结构:1.内皮层:由单层内皮细胞组成,可产生或释放ET(血管长效收缩)、PGI-2(抑制血小板聚集)、vWF、t-PA、TM、PAI-1、EPCR、AT-Ⅲ。2.中膜层:由基底膜、胶原、平滑肌、弹力纤维等组成,含丰富的TF、PGI-2合成酶等3.外膜层:由结缔组织组成,起支持和分隔作用血管壁作用:1.收缩功能:血管壁受损伤或刺激时,通过神经和体液调节,
3、血管立即发生收缩,减少出血量,有利于止血。调控血管收缩的活性物质主要有:ET、PGI-2、TXA2等。2.激活血小板:胶原、基底膜等激活。3.激活凝血系统:胶原激活内源性凝血系统(FⅫ激活)、TF激活外源性凝血系统(FⅢ释放)4.局部粘度增高:血管收缩,血流减慢,血管通透性升高,血浆外渗5.抗止血功能减弱:PGI-2、t-PA、AT-Ⅲ合成分泌减少实验原理:在上臂给静脉及毛细血管加压力,增加血管负荷,观察前臂一定范围内新出血点的数目。本试验主要反映毛细血管结构和功能,也与血小板质和量有关。参考值:阴性:男性<5个新出血点;女
4、性<10个新出血点临床意义:阳性见于:(1)血管壁结构和(或)功能缺陷(2)血小板的数量和(或)质量异常(3)血管性血友病(4)少数正常人模块2血小板的止血功能的检验血管创伤而失血时,血小板在生理止血过程中的功能活动大致可以分为两段,第一段主要是创伤发生后,血小板迅速粘附于创伤处,并聚集成团,形成较松软的止血栓子;第二段主要是促进血凝并形成坚实的止血栓子。血小板的生理(一)血小板的形态和数量:两面微凸的圆盘状,平均直径2~4μm平均容积8μm3。100~300×109/L功能:1.止血2.维护血管壁完整性可沉着于血管壁/填补
5、内皮细胞空隙(二)血小板的生理特性1.粘附血小板与非血小板表面的粘着。机制:血管受损后暴露血管壁胶原,vWF与胶原纤维结合导致vWF变构,然后血小板膜糖蛋白与变构的vWF结合。2.聚集3.释放:血小板受到刺激后,将贮存在致密体、α-颗粒或溶酶体内的许多物质排出的现象。主要是一些生理性致聚剂。4.收缩5.吸附1、采血(毛细血管采血法)2、血小板计数血小板计数方法主要有两大类:血细胞分析仪法和目视显微镜计数法显微镜计数法【实验原理】将血液用适当的稀释液做一定倍数的稀释后,注入计数池计数。再算出每升血液中血小板的数量。【试剂与器材
6、】1.试剂稀释液的种类很多,但归纳起来,不外包括抗凝剂,小板固定血剂,防腐剂,溶血剂,染料,等渗剂等。良好的血小板稀释液应该具备的条件是:①能有效的阻止血凝。②尽快地将血小板固定,阻止血小板聚集和形态的改变。③溶血稀释要求红细胞破坏完全。④试剂组成简单,易于保存,不生长细菌。1.血小板稀释液。(1)尿素(GR或AR)10g、福尔马林0.1ml、枸橼酸钠0.5g蒸馏水加至100ml溶解后过滤,冰箱保存。(2)草酸铵稀释液。草酸铵1g、EDTA-Na20.012g蒸馏水加至100ml用数层滤纸过滤清亮后使用此液对红细胞破坏力极强
7、,血小板形态清楚。如只用草酸铵,不加EDTA,则易产生草酸钙结晶。2.显微镜。3.改良氏计算板。4.微量采血管。【操作方法】1.清洁小试管中加入血小板稀释液0.38ml。2.先让手指指端或耳垂温暖充血(冬天热敷),常规消毒皮肤,待干后深刺,使血自然流出,擦去初出现的少量血。3.用微量吸管迅速准确吸取自然流出的第一滴血液20μl。擦去管外附着的血液,置于血小板稀释液内,立即混匀,置室温下10~30分钟。4.取上述混匀的血小板悬液一滴,滴入血细胞计数池内,静置10~15分钟,使血小板自然下沉。5.用高倍镜计数中央一个大方格中5个
8、中方格内的血小板数,乘以1000即为每μl血中的血小板数,最后算出血小板数/L。【正常参考区间】血小板:(100~300)×109/L【临床意义】血小板的数量和功能与止凝血机制有密切关系。(80~100)×109/L间为血小板减少状态;少于80×109/L为血小板减少,<50×109/L,
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