血小板检查2014—医学课件

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1、血小板检查检验系临检教研室刘协红目的要求掌握血小板计数的原理、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义。重点血小板计数难点血小板形态一、概述骨髓外周血（一）血小板的生成造血多能干细胞TPO调控分化原巨核细胞颗粒巨细胞产板巨细胞血小板，platelet7~14天1/3滞留于脾窦和脾髓的细胞间2/3位于循环池（二）血小板的生理血小板的平均寿命为7~14天，具有止血功能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细胞破坏，主要在脾破坏。脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞留现象即“脾池化”。（三）血小板检测常用项目

2、血小板计数(PLT):手工单项或血液分析仪多项检测血小板平均体积(MPV)血小板分布宽度(PDW)血小板比积(PCT)血液分析仪二、血小板计数（手工法）（一）原理将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数，计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏RBC,固定Pt并防止聚集。（二）试剂1.草酸铵稀释液草酸铵1.0g,EDTA-Na20.012g，蒸馏水加至100mL。2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤冰箱保存。（三）器材光学显微镜血球计数板Hb吸管试管采血针等（四）操作1.在小试

3、管中加入plt稀释液0.38mL;2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。室温放置>10分钟;3.充池，静置10~15分钟;4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共5个中方格内的plt数。（五）计算血小板数/L=5个中方格内血小板数（N）×5×10×20×106/L=N×109/L（六）结果报告PLT:△△△×109/L（七）注意事项全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防菌，以免计数时误认。针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。同时做多项检查时，优先采plt计数之血。充池前应充分摇匀，充池后需静置10分钟以上待plt全部下沉后再计数。1h内完

4、成。（八）方法学平价草酸铵法对RBC破坏力强，使视野清晰，plt形态清楚，是全国临床检验操作规程推荐方法。由于Plt体积小，易粘附、聚集及破坏等，结果不甚理想。复方尿素法优点是plt胀大易辨认，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，试剂保存时间短。血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物，故计数误差大。当直方图出现变化时，应用显微镜计数法校准。流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色标记血小板，根据荧光强度和散射光强度，用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极高的血小板数。流式细胞仪

5、法式目前血小板计数参考方法。相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立体感增强，有助于识别血小板，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。（九）参考值（100~300）×109/L（十）质量保证原则是：避免血小板被激活、破坏，避免杂物污染。1.检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适，储存时间适当；2.检测中：手工法计数要定期检查稀释液质量，仪器法要质控合格；3.检测后：（1）用同一份标本制备学血涂片染色精简观察血小板数量、大小、分布情况，并注意有无异常增多的红、白细胞碎片。（2）用参考方法核对。（3）同一份标本2次计数误差要<10%。（

6、十一）临床意义生理变化：①新生儿<婴儿，出生后3个月达成人水平;②晨间<午后，春季<冬季，毛细血管<静脉;③运动、饱餐后上升，休息后恢复;④月经期低，经期后上升;⑤妊娠中晚期，分娩后1~2天。病理变化1.plt减少：①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等②破坏过多：ITP、脾亢、SLE等；③消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜④分布异常：脾肿大、血液被稀释等；⑤先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征2.plt增多：①原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红细胞增多症等；②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等；③其他：外科

7、手术后、脾切除等。2.血小板增高性疾病①plt，而MPV:脾切除，慢粒等；②plt，而MPV：严重感染。3.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高五、血小板形态检查形态检查内容血小板大小有无巨大血小板或小型血小板形态胞质的颜色，颗粒有无、分布、粗细、空泡PLT分布(一)正常形态1.5~3μm，呈圆形、椭圆形、逗点形或不规则形；胞质呈淡蓝或粉红，中心有若干细小紫红色颗粒，无细胞核血片上3~5成群。血小板（血涂片）(二)异常形态1、大小异常（1）大血小板：直径4~7μm，巨型血小板直径>7.5μm。见于ITP、巨大血小板综合征、脾切除等。（2）小血

8、小板：直径<1.5μm，主要见于缺铁贫、再障等。巨大血小板2.形态异常（1）幼稚形：颗粒少。（2）老年形:边缘不规则，颗粒粗，呈离心分布，有空泡。（3）病理幼稚形：