血小板检查ppt课件.ppt

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1、血小板检查检验系临检教研室陈丽华1目的要求掌握:血小板计数的原理、、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义。重点:血小板计数难点:血小板形态2一、概述3(一)血小板的生成造血多能干细胞TPO调控分化原巨核细胞促进巨核细胞祖细胞增殖、分化、成熟与释放plt进入血液Plt2/3在循环血,其余贮存于脾。4(二)血小板的破坏血小板的平均寿命为7~14天,具有止血功能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细胞破坏,主要在脾破坏。脾池化:全身约有1/3的血小板滞留于脾窦和脾髓的细胞间,血小板在脾内的这种滞留现象即“脾池化”,脾池中的血小板和循环池中的血小板可以互换。5(

2、三)血小板检测常用项目1、血小板计数(PLT):手工单项或血液分析仪多项检测2、血小板平均体积(MPV)3、血小板分布宽度(PDW)4、血小板比积(PCT)血液分析仪测6二、血小板计数(手工法)7(一)原理将血液稀释一定倍数,充入计数池内计数,计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏RBC,固定Pt并防止聚集。8(二)器材光学显微镜;血球计数板、Hb吸管、试管、采血针等。(三)试剂:下列试剂任选一种1.草酸铵稀释液:草酸铵1.0g,EDTA-Na20.012g,蒸馏水加至100mL.首选试剂。2.许汝和稀释液(复方尿素稀释液):尿素10g,枸橼酸钠0.5g,40%

3、甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤冰箱保存。9(四)操作1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL。2.取末梢血20μL加入试管中,迅速摇匀。室温放置>10分钟。3.充池,静置10~15分钟。4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共5个中方格内的plt数。10(五)计算血小板数/L=5个中方格内血小板数(N)×5×10×20×106/L=5个中方格内血小板总数×109/L(六)结果报告PLT:△△△×109/L11(七)注意事项1.全部用具和稀释液要特别清洁,防尘、防菌,以免计数时误认。2.针刺要深,吸血及稀释动作要快,防聚集。3.同时做多项检查时,优先

4、采plt计数之血。4.充池前应充分摇匀,充池后需静置10分钟以上待plt全部下沉后再计数。1h内完成。12(八)方法学平价1.草酸铵法对RBC破坏力强,使视野清晰,plt形态清楚,是全国临床检验操作规程推荐方法。由于Plt体积小,易粘附、聚集及破坏等,结果不甚理想。2.复方尿素法优点是plt胀大易辨认,但不能完全溶解RBC,且尿素易分解,试剂保存时间短。133.血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多个指标,快速,临床适用。但不能鉴别红细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物,故计数误差大。当直方图出现变化时,应用显微镜计数法校准之。144.流式细胞仪法:用血小板单

5、克隆抗体染色标记血小板,根据荧光强度和散射光强度,用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小板计数参考方法。155.相差显微镜法:相差显微镜下,血小板立体感增强,有助于识别血小板,还可照相后核对计数结果,作为手工法血小板计数的参考方法。(九)参考值:(100~300)×109/L16(十)质量保证原则是:避免血小板被激活、破坏,避免杂物污染。1.检测前:采血要顺畅,抗凝剂选用合适,储存时间适当;2.检测中:手工法计数要定期检查稀释液质量,仪器法要质控合格;173.检测后:(1)用同一份标本制备学血涂片染色精简观察血小板数量、大小、

6、分布情况,并注意有无异常增多的红、白细胞碎片。(2)用参考方法核对。(3)同一份标本2次计数误差要<10%。18(十一)临床意义生理变化:①新生儿<婴儿,出生后3个月达成人水平。②晨间<午后,春季<冬季,毛细血管<静脉③运动、饱餐后上升,休息后恢复。④月经期低,经期后上升。⑤妊娠中晚期,分娩后1~2天19病理变化1.plt减少:①生成障碍:急性白血病,再障,巨幼贫等②破坏过多:ITP、脾亢、SLE等;③消耗过多:DIC、血栓性血小板减少性紫癜④分布异常:脾肿大、血液被稀释等;⑤先天性:新生儿plt减少症、巨大plt综合征202.plt增多:①原发性:慢粒、原发

7、性plt增多症、真性红细胞增多症等;②反应性:急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等;③其他:外科手术后、脾切除等。21三、plt平均体积(MPV)的临床意义22MPV参考值:6.8~13.6fL分析MPV临床意义需结合plt数量变化。1.鉴别plt减少症的原因①plt,而MPV,骨髓自身正常,外周血plt破坏。②plt,而MPV,骨髓抑制损伤而造成plt232.血小板增高性疾病①plt,而MPV:脾切除,慢粒等;②plt,而MPV:严重感染。3.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高244.MPV↑可作为判断骨髓功能恢复的较早指标:①骨髓功能衰退时,MPV、

8、PLT同时,抑制越重,MPV越。②当骨

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