艾滋病实验室检测妇保

《艾滋病实验室检测妇保》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、艾滋病实验室检测郭志宏（0571-87115197）浙江省疾控中心艾滋病确证中心实验室内容提要：1.艾滋病实验室检测目的、方法。2.艾滋病检测样本的采集和处理。3.HIV抗体检测方法目的要点和流程。4.HIV抗体快速检测方法原理应用评价。5.艾滋病抗体检测结果的处理及应用。6.HIV-1抗原检测7.HIV核酸检测8.HIV-1耐药检测9.CD4/CD8+T淋巴细胞检测1、艾滋病检测的医学目的个体：诊断感染状态，感染者知道自己的感染情况，减少传播，及时寻求治疗。传染病管理：疾控机构及时的发现传染源、配偶（固定性伴）的检测

2、、随访和干预，发现管理感染者、提供关怀服务。医疗机构：及时的医疗服务和医源性感染的预防1.1HIV相关检测方法A常用HIV病原学检测方法:核酸检测（定性、定量）、P24抗原检测、病毒培养分离B常用HIV抗体检测方法:初筛：1.酶联免疫吸附法ELISA：第三代、第四代。2.快速检测RT：金标、硒标。3.简单法PA:明胶颗粒凝集确证：免疫印迹法WB、RIBAC其他相关检测方法:免疫功能测定：CD4/CD8检测2、样品的采集和处理2.1样品的种类和用途：1HIV抗体检测：全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品。2CD4+

3、T淋巴细胞测定：抗凝全血。3HIV-1病毒载量：血浆。4HIV-1核酸的定性检测和基因型耐药检测：全血、血浆、PBMC及DBS样品。5HIV分离培养：PBMC、全血。2.2样品的保存1用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，1周内可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。2用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内检测可存放于4℃，3月内存放-20℃以下。3月以上应置-70℃以下。3用于CD4检测的全血可存放于室温（18～25℃），一般当天送检。4阴性样品至少保存1～2个月。阳性样品保存至少10年。2.3样本运输1.应采用

4、三层容器包装。2.用于抗体检测的血清和血浆样品应在冷藏下（2～8℃）运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下（18～25℃）运送。用于病毒载量检测的样品应在-20℃以下运输。DBS样品应在室温下（18～25℃）运送。3、HIV抗体检测方法检测HIV抗体是HIV/AIDS诊断的一项重要指标，HIV抗体测定作为血清学诊断要求准确、可靠，经初筛、复检试验和确证实验三个步骤。3.1HIV抗体检测目的HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。1根据目的选择检测方法及检测策略。2严格遵守实验室SOP。3筛查试验

5、阳性，须作确证试验。4筛查试验阴性，不应做确证试验。5筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。3.2HIV抗体检测的要点样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1HIV抗体筛查检测流程3.3HIV抗体筛查检测流程初筛试验1、HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验。2、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗体阴性（-）报告；对呈阳性反应的样品，

6、需要进一步做复检试验和确证试验。复检试验使用原有试剂和另外一种不同原理或另外两种不同原理（或厂家）的试剂进行复检。如两种均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性（-）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需进行确证试验。如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1p24抗原或核酸检测，必要时进行随访。筛查试验呈阳性反应样品的转送筛查试验呈阳性反应样品，需要核对身份，补充个人信息（如姓名和身份证号码），采集第二份血样，持HIV

7、抗体筛查报告，送当地艾滋病筛查中心实验室，或直接送确证实验室。确证试验1确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。2确证样品可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。3确证方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验（RIPA）、放射免疫沉淀试验及免疫荧光试验（IFA）等。3.4孕产妇新生儿抗体检测流程3.5艾滋病检测实验室检测信息上报各级艾滋病检测实验室所在机构每月应填写《HIV抗体检测数及阳性人数统计报表》（附表6），并于每月10日前完成网络直报。未开展网络直报的单位，由县级疾病预防控制机构收集信息后

8、统一上报。4、艾滋病快速检测试验（RT）是ELISA发展起来的一种检测技术，它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法进行检测。突出优点为快速、试剂便于保存、检测不需要特殊设备并可以单份检测，比较适用于基层医疗单位和标本初筛。挑战：进一步提高检测灵敏度和特异性，减少批间差异，提高试剂质量。4.1艾滋病快速检测：胶体金（或胶体硒）原理