革兰染色法及细菌形态和结构

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1、1、掌握显微镜油镜的正确使用方法；细菌染色标本的制备；革兰染色法及其结果判断。2、熟悉细菌基本形态和特殊结构的观察技术；革兰染色法在鉴定细菌上的重要意义。实验：细菌基本形态及革兰氏染色法二、细菌标本的制作及基本形态的观察(一)球菌标本片：葡萄球菌。(二)杆菌标本片：大肠杆菌三、细菌特殊结构的观察(一)伤寒杆菌鞭毛染色示教片(二)肺炎双球菌荚膜染色示教片(三)破伤风杆菌芽孢染色示教片㈣白喉棒状杆菌染色示教片显微镜油镜加香柏油的原理因为油镜的物镜很小，从玻片透过的光线通过空气，因介质密度不同而发生折射现象，使射进镜筒的光线很小，物象不清。若在油镜与载玻片

2、中间加入和玻璃折射率（n＝1．52）相近的香柏油（n=1．515），则使通过的光线不致产生折射而损失，因此能清楚地看到物象见实验图杆菌鞭毛杆菌鞭毛细菌的形态及结构肺炎链球菌荚膜荚膜菌体细长，芽胞正圆，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状破伤风杆菌芽孢枯草芽胞杆菌革兰染色细菌基本形态链球菌弧菌葡萄球菌肠杆菌肺炎链球菌接种环（上）和接种针（下）柄约22cm环面2-5mm绝缘柄约7.5cm金属柄约14.5cm安装环(针)的螺口(约8mm)四、细菌涂片标本的制作一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片干燥固定革兰氏染色材料及方法1、初染：结晶紫染液轻轻摇动玻片1m

3、in，水洗;2、媒染：碘液轻轻摇动玻片1min，水洗;3、脱色：95%乙醇，轻轻摇动玻片至无紫色液脱下为止（约30s～1min），水洗;4、复染：稀释复红液30s，水洗。用吸水纸吸干，油镜下观察。细菌被染成紫色者，称为革兰氏阳性菌；而细菌染成红色者，称为革兰氏阴性菌；革兰氏阳性菌；革兰氏阴性菌阳性菌——紫色阴性菌——红色细菌呈现第一次染色的效果紫色，革兰氏阳性菌（紫阳G＋）；呈现第二次染色的效果红色；称革兰氏阴性菌（红阴G-）细菌的构造细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等鞭毛芽孢的

4、形状、大小及其在细胞内的位置细菌的特征，在分类鉴定上有一定意义。芽孢结构致密，染料不能渗入.不着色能形成芽孢的细菌种类不多，最主要的是芽孢杆菌属（Bacillus）和梭菌属（Cletridium），它们都是革兰氏阳性菌。很多都是强致病菌，如肉毒梭菌、破伤风梭菌，有些形成的芽孢膨大，宽度明显超过菌体含芽孢的梭菌芽孢宽度超过菌体，使细胞呈梭状炭疽芽孢杆菌生物恐怖主义者为什么会看中这种细菌呢？首先因为炭疽是一种严重的疾病，分布又非常广泛。…...还因为它几乎是一种永不死亡的细菌，-----它们能够形成芽孢，因而很不容易死亡。在环境恶劣的时候，细菌内部会有一

5、小部分浓缩起来，在这一部分周围形成几层坚硬的壳。里面的生命活动变得非常缓慢，而壳外面那部分就死亡消失了，这就是芽孢。环境条件一变好，壳里面的部分会像“发芽”一样长出来。