慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究

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1、慢性胃炎胃粘膜组织幽门螺杆菌感染与π类谷胱甘肽S转移酶的相关性研究作者：高会斌齐维娟魏阿平邢立强邹玉安薄爱华姚树坤【摘要】目的：探讨谷胱甘肽S转移酶在慢性胃炎持续幽门螺杆菌感染胃粘膜组织中的变化及其与HPylori感染的关系。方法：将内镜及胃粘膜活检病理证实的138例慢性胃炎，分别用13C呼气实验及病理切片改良Giemsa染色检测HPylori，按HPylori检测结果分为HPylori阳性组(87例)及HPylori阴性组(51例)；用SP免疫组化检测GSTπ，观察与比较两组间胃粘膜组织中GSTπ的表达，计算各组GSTπ表达率，将所得结果输入spss统计学软件进行统计学处

2、理。结果：本研究HPylori阳性87例，平均阳性率6304%;GSTπ阳性共58例，平均阳性率为4201%。其中慢性浅表性胃炎组HPylori阳性61例，阳性率为6354%；慢性萎缩性胃炎组HPylori阳性26例，阳性率为6191%，两组间HPylori阳性率无显著差异。慢性浅表性胃炎组GSTπ阳性37例，阳性率为3854%；萎缩性胃炎组GSTπ阳性21例，阳性率50%，两组间阳性率无显著差异。两组合并后HPylori阳性亚组中GSTπ阳性率为3218%显著低于HPylori阴性亚组的GSTπ阳性率5882%(χ２=830，P【关键词】幽门螺杆菌;谷胱甘肽

3、S转移酶π;慢性胃炎慢性胃炎是多发病，其长期持续不愈不仅是困扰临床的一大难题，也是引起胃粘膜肠上皮化生和不典型增生并最终导致癌变的重要启动阶段。持续幽门螺杆菌感染已被公认为慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，与胃腺癌和胃淋巴瘤关系密切[1~3]，其确切致病机制尚不明确，可通过其产生的多种致病因子对胃粘膜造成广泛损伤。谷胱甘肽S转移酶是一个多功能的Ⅱ相解毒酶家族，是人体内一种重要的保护性物质，具有解毒和抗癌作用[5~8]，依GSTs同工酶亚基结构和等电点的不同，将GSTs分为α、μ、π、θ和σ等5种[9]，其中π类谷胱甘肽S转移酶的机体保护作用大于其它同工酶类[10]。我们用SP

4、免疫组化法检测了HPylori感染与非感染慢性胃炎胃粘膜组织中GSTπ的表达，旨在探讨GSTπ的多重保护作用与HPylori致毒作用的相互关系。　1资料与方法11仪器及试剂日本OLYMPUS240电子内镜，德国Wagner13C红外线能谱仪，日本OLYMPUS光学显微镜。13C尿素酶检测试剂购自德国Wagner北京办事处，即用型SP免疫组化试剂盒购自北京中山生物技术公司。12病例及分组将XX3~XX1月于我院消化科就诊的患者，选择主诉上消化道症状6个月以上，经B超除外肝胆胰疾患，并除外1月内服用抗生素、半月内服用铋剂或制酸剂者[11~13]作为入选条件，经13C呼气检测

5、查HPylori，常规内镜检查及病理活检、Giemsa染色查HPylori，将内镜及病理确诊、13C呼气检测与病理学检查HPylori均阳性或均阴性作为研究对象共138例，其中男91例，女47例；年龄17~63岁，平均42岁；内镜及病理检测结果为慢性浅表性胃炎96例，慢性萎缩性胃炎42例；每组又分为HPylori阳性和HPylori阴性两个亚组。13研究方法131内镜及病理活检所有病例由有经验的内镜医师行常规内镜检查并于病变明显处取活组织5块，活检标本入100g·L-1中性福尔马林液中固定(24h)，常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，制作厚5~7μm切片6张裱贴在涂有蛋白甘

6、油的载玻片上，37℃储存备用。132HPylori的检测132113C呼气检测法受检者空腹6h以上，收集0时气100mL备用，将13C尿素酶试剂溶入120mL橙汁服下，30min准时收集待测气100mL，将待测气与0时气连接13C红外线能谱仪检测孔，自动检测，生成报告，以DOB值大于25为阳性。1322改良Giemsa法组织切片脱蜡充分复水，入20g·L-1Giemsa染液中染色30min，洗去染液，脱水、透明、封片，油镜观察。133HE染色常规病理学检查组织切片脱蜡复水，梯度乙醇脱水，水洗后入苏木素染液中染色20min，10g·L-1盐酸分色，充分水洗后10g·

7、L-1氨水蓝化，水洗后入伊红染液中染色1min，梯度乙醇脱水，透明封片。134GSTπ免疫组化检测切片脱蜡复水，以30g·L-1过氧化氢灭活内源性酶，1g·L-1胰蛋白酶抗原修复，滴加正常山羊血清封闭液，滴加一抗兔抗人GSTπ，4℃过夜，滴加生物素化二抗20℃~37℃20min，ABC复合物20℃~37℃20min，以上各步均以PBS充分洗涤。DAB显色，苏木素轻度复染，脱水、透明、封片，高倍镜下观察。14统计学处理采用χ２检验，用s