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时间:2018-09-22
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1、第一章 无菌操作技术实践第1课时 微生物的培养和应用(Ⅰ)【目标导航】 1.了解培养基及其种类和配制方法。2.掌握灭菌和消毒的区别与联系。【重点提醒】 1.根据培养目的选择正确的培养基和培养基配制方法。2.常用的灭菌技术。一、培养基的概念、种类1.概念:为__________微生物而制备的、提供适合微生物________、______或积累__________的营养基质。2.营养要素微生物的化学组成与其他生物大体相同,也是由C、H、O、N、P、S等元素组成,其中C、H、O、N占细胞干重的90%以上,这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。把这些化合物归纳成___
2、_____、________、________和________等这几类营养要素。营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需____元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物,有些是异养生物的能源物质无机化合物:CO2、NaHCO3;有机化合物:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需____元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐;有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等水在生物体内含量很高,在低等生物体内含量更高不仅是良好的溶剂而且可维持生物大分子结构的稳定无机物为微生物提供除碳、氮元素以外的各种重要元素细胞内的组成成分,生理调节物
3、质;某些化能自养菌的能源,酶的激活剂说明 关于碳源和氮源(1)微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。3.培养基的种类划分标准培养基种类特点用途物理性质______培养基不加凝固剂工业生产______培养基加少量凝固剂观察微生物的运动、分类、鉴定______培养基加凝固剂,如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分______培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产______培养基培养基成分______(用化学成分已知的化学物质配成)培养、分离出特定微生物用途_
4、_____培养基培养基中加入某种化学物质,以______不需要微生物的生长,________所需要微生物的生长(如加富培养基中培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素或链霉素;培养固氮菌可用无氮培养基,如阿须贝培养基)______培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种________或____________________不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落带有绿色金属光泽)二、消毒与灭菌1.在微生物培养时获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括四方面的内容:(1)对实验操作
5、的________、操作者的________和____进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的________、____________和________等器具进行灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________________进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。提醒 实验后,所有用过的培养基、培养液等都要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃,否则会造成环境污染。实验过程中一定不可吃东西、喝水。离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染。2.比较消毒与灭菌条件结果常用方法消毒较________的物理或化学方法仅杀死物体______
6、______对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)________消毒法(如100℃,5~6min可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢)、________消毒法、____________消毒法灭菌______的理化因素______________________,包括________和________________灭菌、________灭菌、____________灭菌、________除菌3.高压蒸汽灭菌(1)原理:将待灭菌的物体放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内;把锅内的水加热煮沸,并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭;再继续加热就会使锅内的蒸汽压逐渐上升,从而温度也随之
7、上升到100℃以上。(2)设备:主要是____________________,实验室中以手提式最为常用。(3)使用方法①加水:使用前在锅内加入适量的水。②________:装入待灭菌的物品,不能太满,盖好锅盖,按对称方法旋紧四周固定螺栓,打开排气阀。③____________:加热待水煮沸后,使蒸汽和空气一起从排气孔排出。④保温保压:当压力表指针指到121℃时,调节热源,使压力维持不变,并开始计算灭菌时间,根据灭菌的物品确定灭菌时间。⑤出锅:当压力表中指针降至________,稍停,使温度
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