藻胆蛋白的生物合成与光谱分析___张阳杰

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1、综合实验：藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析报告题目藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析作者姓名张阳杰班级学号2011114020525指导教师苏平完成时间2014.3生物学实验教学中心0第页共16页综合实验：藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析目录引言.......................................................................31.实验仪器与试剂..........................................................51.1实验仪器......

2、...................................................51.2实验材料及试剂...................................................51.2.1实验材料.....................................................51.2.2抗生素储备液.................................................51.2.3IPTG储备液.........................................

3、..........61.2.4缓冲液.......................................................61.2.5SDS-PAGE电泳溶液.............................................62.实验方法.................................................................72.1菌种活化与扩大培养................................................72.2藻胆蛋白α亚基生物合成......

4、.....................................82.3藻胆蛋白α亚基提纯...............................................82.4色素蛋白电泳检测..................................................82.5藻胆蛋白α亚基光谱测定...........................................93.结果与分析..............................................................93.1

5、藻胆蛋白α亚基产物图.............................................93.2藻胆蛋白α亚基光谱图.............................................103.3透析后藻胆蛋白α亚基光谱图......................................114.实验讨论................................................................12参考文献...........................................

6、.....................1312综合实验：藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析张阳杰（指导老师：苏平）（湖北师范学院生命科学学院生物技术1105班湖北黄石435002）摘要：本实验通过构建质粒来实现在大肠杆菌内合成具有活性的α—PEC。藻胆蛋白(包括本文研究的α—PEC)在蓝藻内的作用是吸收光、传递能量至光合作用反应中心，所以本实验检验重组是否成功主要检验吸收光谱是否与天然藻胆蛋白一致。藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是存在于蓝藻、红藻和隐藻中的一类捕光色素蛋白，可分为藻红蛋白(简称PE)，藻蓝蛋白(简称PC)，别藻蓝

7、蛋白(简称APC)和藻红蓝蛋白(简称PEC)。重组有藻胆蛋白（本实验只做藻红蛋白）基因的E.coliBL21，在含有kana（24µg/ml）和氯霉素（40.8µg/ml）的LB培养基中培养。当OD600达到0.5-0.6时，用终浓度为1mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导培养2.5小时。加超声缓冲液后用超声破壁离心取上清，得到藻红蛋白粗提液。通过镍-亲和层析对起进行纯化。关键词：藻胆蛋白重组质粒光谱分析12综合实验：藻胆蛋白α亚基生物合成及光谱分析引言藻胆蛋白(Phycoeryt