肺结核诊断新技术课件

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1、结核病诊断新技术及其评价内容二、生化检测三、细胞免疫学检测一、微生物学检测四、分子生物学检测呼吸医生的尴尬？先抗炎？？？再抗痨？？？实在不行，上化疗？？？？你懂的！TB的诊断有时有多难！病原学检测是诊断TB最重要的依据，但据2013年WHO统计，仅有58%的TB患者有病原学依据。前言早期准确诊断是结核病(TB)患者得以及时治疗的关键。目前的TB诊断水平仍然薄弱。据世界卫生组织(WHO)估算，2012年的860万新发TB患者中，仅登记了570万，还有217.5万(25.3%)未被发现(漏诊)。提高诊断技术则是发现患者，减少误诊、漏诊的核心。9/16/2021一

2、、微生物学检测包括涂片染色镜检、结核分枝杆菌(MTB)分离培养、MTB药敏和菌种鉴定等。染色涂片法是临床上最便捷快速的诊断方法，但敏感度偏低，发达国家可检出50%的活动性肺结核，我国检出率一般约为30%，且无法区别非MTB( Mycobacteriumtuberculosis)。MTB分离培养是确诊TB最重要的依据，不仅能取得病原学结果，还能进一步进行药敏检测，指导治疗。目前常用的细菌培养基包括Lowenstein-Jensen固相培养基(L-J法)和Middlebrook7H97H11液体培养基。固相培养基价格低，但耗时长，需要4~8周取得结果，加上菌种鉴

3、定的时间耗时更长。基于BACTECMGIT960、BacT/Alert3D系统的液体培养基检测速度有明显提高(1~4周)，但费用较高。一、微生物学检测1.1MTB快速培养法BACTECMGIT960系统采用荧光增强原理，在培养管底部包埋对氧气浓度高度敏感的指示剂，通过检测氧气浓度变化以监测培养管内MTB的生长状态。阳性标本检出时间相对较短，平均为9d，后续菌种鉴定及药敏试验时间平均为4d。BACTECMGIT960系统为目前国际通行培养标准，培养阳性率较固体培养法高出10%左右，检测界限<10个菌落形成单位(CFU)/mL。BacT/Alert3D系统采用比

4、色法原理，通过监测预处理标本中产生CO2与标本瓶中初始的CO2相比较，判断是否存在MTB生长。同时可以进行药敏检测。理论上培养速度较L-J法和BACTECMGIT960系统更快(6~22d)。1.2直接显微镜检技术(MODS)工作原理依据于MTB在液体培养基中生长会出现特征性的索状结构，该结构可以通过倒置显微镜观察到。检测呼吸道标本中是否存在MTB的敏感度为97.5%，特异度为94.4%，出现阳性结果的中位时间约为8d该方法无需昂贵的设备，简单，相对快速。二、生化检测TB的生化检测主要包括腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、血管紧张素转化酶(ACE)

5、等酶学检测。此类方法简单快速，适用于TB早期诊断及鉴别诊断，但由于缺少结核特异性的酶标而无确诊价值。2.1ADAADA是嘌呤核苷代谢中重要的酶。胸(腹)腔积液ADA检测对结核性胸(腹)膜炎鉴别诊断有重要意义，胸(腹)腔积液ADA浓度以45U/L为界，结核性大多超过此值，特异度及敏感度超过80%。胸(腹)腔积液ADA与血清ADA比值≥1更倾向结核性积液。而对于癌性及非特异性积液，其比值一般<1。ADA对于活动性TB的敏感度为100%，特异度为97%。脑脊液中ADA活性检测对于TB的诊断也有一定价值，尤其应用于结核性脑膜炎与隐球菌脑膜炎、病毒性脑膜炎的鉴别。结核

6、性脑膜炎脑脊液中ADA活性增高，通常>8U/L，而后两者一般正常，ADA浓度≤8U/L。结核性脑膜炎表明，将ADA浓度>8U/L作为结核性脑膜炎诊断的阈值时，其诊断的总敏感度<59%，特异度>96%。二、生化检测2.2LDH是一种糖酵解酶，几乎存在于机体所有组织细胞的胞质内。对TB的诊断来说，LDH可用于区别渗出性积液与漏出性积液，胸(腹)腔积液LDH与血清LDH比值≥0.6，LDH浓度>200U/L倾向渗出液。结核性胸(腹)腔积液的LDH浓度一般>200U/L，与癌性胸(腹)腔积液LDH浓度变化无特征性差异。2.3ACE为二肽羧肽水解酶，又名激肽酶I，存在

7、于肺、肾、脑、小肠、胎盘等组织的血管内皮细胞或上皮细胞及血浆。对TB的诊断来说，血清ACE的检测主要用于TB与结节病的鉴别，后者血清ACE浓度升高多见。结核性胸腔积液ACE浓度一般不升高，胸腔积液ACE与血清ACE比值≥1更倾向结核性积液，而恶性积液的比值多<1。三、细胞免疫学检测MTB为胞内致病菌，因此普遍认为TB的发病过程中细胞免疫占主导地位。细胞免疫学诊断主要包括结核菌素皮肤试验(tuberculinskintest，TST)和γ-干扰素释放试验(interferongammareleaseassay，IGRA)，而结合上述两种方法优点的改良结核菌素皮

8、肤试验近年来发展很快。3.1TST即PPD皮试或皮内