母猪真菌性皮肤病的实验室诊断及药敏试验

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1、·46·《上海畜牧兽医通讯》2010年第5期母猪真菌性皮肤病的实验室诊断及药敏试验李前勇张德志王庆华贺永建(西南大学动物医学系重庆荣昌402460)猪皮肤病是养猪生产中的一种常见疾病，生产中许多因蒸馏水溶解；盐酸特比萘芬50mg加蒸馏水25ml溶解。取素如疥螨、猪虱、维生素A缺乏、维生索B2缺乏、泛酸缺乏、13×100mm灭菌有棉塞的沙氏液试管各11支，编号排列在锌缺乏、葡萄球菌感染、真菌感染、机械性损伤及采食感光饲试管架上，每个试管加入5ml沙堡弱氏培养液，然后第一管料等因素均可引起猪皮肤病的发生【1q]，疾病发生后常

2、引起取5ml药物，加入每组第1管，混匀后取5ml放人第2管猪瘙痒、生长发育受阻，饲料报酬降低，甚至造成死亡【4_5]。中，依次类推，直到第9管取出5ml弃去，使成1：1、1：2、其中真菌感染所致猪皮肤病常呈慢性、高度接触性传染，发1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256等浓度。第l0管不病严重，经久难愈，有的陷入恶病质而发生死亡【6]，是严重危加药物，不接种菌作空白对照，以便观察沙氏培养液是否被害生猪健康的一种重要皮肤病。由于引起猪发生皮肤病的污染。第11管不加药物，只接种菌作对照，以便观察沙

3、氏液真菌种类繁多，在自然界中分布较广、繁殖力较强，对外界环是否适合于真菌生长。境的抵抗力也较强【7]，同时兽医临床用于治疗猪真菌性皮肤1．7．2抑菌试验：将分离纯培养的猪皮肤真菌，在无菌条件病的药物也较少，且治疗效果也欠佳，因此该类疾病也是目下，用接种针分别钩取米粒大小菌落接种于含有不同浓度受前兽医猪病临床受到重点关注和存在诸多困扰的一类疾病。试药物沙堡弱氏液的试管中，然后置25℃的电热恒温培养箱2007年7月以来，重庆市荣昌县荣隆镇、吴家镇十多家养殖中培养3～4周，观察菌落生长情况，并做好记录。场母猪出现皮肤瘙痒、粗糙

4、，破损、脱毛，皮肤增厚、糠麸样皮1．7．3判断标准：凡接种菌落未生长的最低含药试管中的屑，皮肤溃疡等症状，经多方治疗，经久不愈。研究采用病原剂量为该药的最低抑菌浓度(MIC)。菌分离培养、药敏试验，对这些病例进行了研究，初步搞清了2结果该病发生的原因及临床治疗的有效方法，现报告如下。2．1皮肤病原菌直接镜检1材料与方法对采集的273份病料进行显微镜直接镜检，结果273份1．1动物样品中均可见分枝分隔菌丝、螺旋菌丝、孢子等，有的孢子2007年7月至2010年5月期间，重庆市荣昌县荣隆、吴沿毛发镶嵌成厚鞘，有的孢子在毛发内成

5、链排列，根据菌体家二镇11个养猪场273头发生皮肤病的荣昌母猪。2月龄、的形态判定273头发病母猪为真菌感染阳性。上述病料中体重约1kg的健康新西兰兔4只，购置于荣昌县关胜镇某养未见有寄生虫虫体或虫卵，也未见革兰氏染色呈阳性的葡萄兔场。球菌。1．2药品2．2皮肤病原茵的分离培养硝酸眯康唑散，西安生产，批号090504670；伊曲康唑，西分离培养的菌落在沙堡弱氏琼脂培养板上，菌落生长安生产，批号081219044；酮康唑，西安生产，批号快，呈细绒毛状或粉状，淡黄色，菌落中心凸起，边缘不齐。090115144；盐酸特比萘芬，

6、北京生产，批号0908115；灰黄霉镜检可见小分生孢子，呈卵圆形，无柄。大分生孢子有横隔，素，重庆生产，批号269005；氯霉素，郑州生产，批号梭状，4～7室，壁厚而粗糙，还可见球拍菌丝、结节体等。根20090219。据上述特征可认定小孢子菌属真菌感染。1．3病料采集2．3致病性试验用镊子或钳子扒起患部毛发、结痂，皮肤破损部用钝韧刀实验组2只家兔采用涂擦分离的小孢子茵属真菌，5d刮取，将采集的病料放入青霉素瓶中，置4"C冰箱内保存备用。后家兔皮肤出现轻微的临床变化，7d后皮肤增厚、弹性降1．4病原茵的直接镜检低、结痂等与

7、临床母猪感染现象一致。取采集的病料放于载玻片上，加1O％KOH1滴，以盖2．4药敏试验玻片覆盖，弱火焰上微热，使之软化透明后镜检观察病原菌五种抑菌药对猪小孢子属真菌的最低抑菌浓度分别为的形态。同时，将病料制成涂片分别进行革兰氏染色、镜检硝酸咪康唑散15．6~g／ml、伊曲康唑250／~g／ml、酮康唑500和体表寄生虫检查。／~g／ml、灰黄霉素1000ptg／ml、盐酸特比萘芬500t~g／ml，其中1．5病原茵的分离培养、鉴定硝酸咪康唑散对分离出的小孢子属真菌的抑菌效果最好。将采集的病猪毛发、结痂，先用70％酒精浸5

8、min，杀死3讨论与小结杂菌，再以无菌生理盐水洗涤后，将其接种于沙堡弱氏液体3．1本试验通过对发生于重庆市荣昌县饲养母猪所发生培养基中，25℃培养2周。再将分离菌接种于沙堡弱氏琼脂的皮肤病进行I临床调查，得知该区域发病母猪病程都在2年培养平板及含维生素B1的沙堡弱氏琼脂培养板上，观察菌以上，母猪采用正大牌母猪浓缩料并