真菌及厌氧菌药敏试验的规范化

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1、真菌及厌氧菌药敏试验的规范化一、抗真菌药物敏感试验的规范化（一〉高危人群的增多是真菌感染不断增加的原因20世纪80年代以来，真菌感染不断增加，这与高危人群的增多有关系，高危人群包括:骨髓和实体器官移植、广谱抗生素治疗、肿瘤和免疫抑制治疗、插管等侵袭性治疗以及AIDS患者。（二）真菌感染新趋势以前的真菌感染以念珠菌为主，而念珠菌中以白色念珠菌所占比例最高。最近的调查显示，白色念珠菌感染率减少了50-60%,非白念珠菌如光滑念珠菌的感染率已经占到了20-25%,热带念珠菌占到了20%,而近平滑念珠菌和克柔念珠菌的比例也在不断上升。此外,新型隐球菌、烟曲菌、黄曲霉菌、构巢曲菌、毛霉菌的

2、感染比例也呈上升的趋势。实验室工作中应当注意，约有50%患者生前培养是阴性，这是因为曲霉菌早期不入血。（三〉关于抗真菌药物敏感试验的采用建议目前抗真菌药物敏感试验的应用领域在于新药研发、耐药监测及临床标本这三个领域。下表是关于抗真菌药物敏感试验的采用建议：疾病建议立的粘膜念珠菌病经验性治疗，不做药敏复发的粘膜念珠菌病菌种鉴定，如果治疗失败，应做体外的抗真菌药敏试验。高危患者中念珠菌定植菌种鉴定，依据当地耐药监测结果选择抗真菌药物念珠菌血症及深部感染菌种鉴定，应用哇类药物深部感染需要延长治疗时对所有菌株都测药敏（四）常见抗真菌药物昂导读各类抗真菌药物的抗菌谱怎样？如何选择适当的抗真

3、菌药物进行药敏试验呢？下表是一些常见抗真菌药物的作用机制及作用真菌:分类常见药物作用机制作用真菌多烯类两性霉素B两性霉素B脂质体制霉菌素与真菌细胞膜的麦角固醇相结合，引起渗透性不稳定和膜完整性的损伤两性霉素B和两性霉素B脂质体：念珠菌、新型隐球菌、曲霉、毛霉、胞子丝菌、组织胞浆菌等。制霉菌素：皮肤及黏液感染的念珠菌。毗咯类咪哇类：酮康哇三哇类：氟康哇、伊曲康哇抑制细胞色素P45014a去甲基化酶，从而抑制麦角杂醇的合成酮康哇：深部念珠菌、球胞子菌、组织胞浆菌、胞子丝菌、毛发癣菌等。氟康哇：对多数念珠菌、隐球菌、球胞子菌具有抗菌活性，然而克柔念珠菌对氟康哇天然耐药，光滑念珠菌表现为

4、剂量依赖性敏感。抗代5—氟胞喀啜干扰喀作用真菌为念珠菌、隐球菌等，单谢类唉代谢阻断核酸合成用易产生耐药，故常与两性霉素B或氟康哇联合使用，5—氟胞嗡啜与两性霉素B联合使用治疗隐球菌性脑膜炎收到了良好的疗效。棘白菌素类卡泊芬净米卡芬净阿尼芬净通过非竞争性抑制B-(1,3)-D-葡聚糖昔合成酶，从而破坏真菌细胞壁糖昔的合成卡泊芬净：具广谱抗真菌作用，对曲霉属、念珠菌属具优良抗菌活性，对丝状真菌和一些双相真菌具一定抗菌活性，新型隐球菌天然耐药。米卡芬净：对念珠菌属具杀菌作用，对曲霉属具有良好的抗真菌作用，对双相真菌的菌丝相有效，对新型隐球菌、镰胞霉、毛孑包子菌的作用差。阿尼芬净：对酵母

5、包括对氟康哇耐药的念珠菌属、双相真菌、曲霉等真菌具良好抗真菌作用，对新型隐球菌无作用。第二代三哇类药物伏立康哇泊沙康哇雷夫康哇伏立康哇：具广谱抗真菌作用，对曲霉、赛多胞菌、镰胞菌、新型隐球菌、念珠菌属包括耐氟康哇菌株均具有抗菌活性。(五〉各种药物的抗真菌谱比较AIBFCZITZVCZPCZRCZCFIFAF白念热带念近平滑念克柔念光滑念新型隐球菌荚膜组织胞浆菌皮炎芽生菌粗球胞子菌巴西副球胞子菌卡氏肺胞子虫烟曲毒毛番根酶镰刀番上表为各种药物抗真菌谱的比较。可见:1、两性霉素B的抗真菌谱最广，唯一缺陷为对卡氏肺胞子虫无抗真菌活性。2、三口坐类药物如伊曲康口坐、伏立康口坐、泊沙康口坐、

6、雷夫康口坐的抗菌谱较广，但对卡氏肺胞子虫也无抗菌活性。3、棘•白菌素类的药物对卡氏肺胞子虫有活性，但对新型隐球菌无抗菌谱。4、氟康哇的抗菌谱比较少。5、两性霉素B、三个三畛类药物、三个棘白菌素类的药物对烟曲酶都有抗真菌活性,但对毛霉、根酶和镰刀霉只有两性霉素B才有抗真菌活性。（六）抗真菌药物药敏试验方法常用的抗真菌药物药敏试验有哪些？规范的操作是怎样的？(一)液基法1.试管(宏量)液基稀释法：抗真菌药物的宏量樁释法是CLSI、NCCLS分委会提出的第一个方法，但在临床中使用较麻烦。SusceptibilityTestingBrothDilutionSusceptibilityTe

7、st1ug/ml宏量液基稀释法2.微量液基稀释法(1)应用范围：侵袭性感染的酵母菌，包括念珠菌和新型隐球菌。(2)培养基：使用含有L—谷氨酰胺及酚红指示剂、不含碳酸氢钠的RPMI1640液。(3)药物的溶解、标释和贮存：抗真菌药物敏感实验应使用药物标准品，不同药物所选择溶剂不同(氟康哇、氟胞喀喘用灭菌蒸餾水溶解；两性霉素B、酮康哇、伊曲康哇应使用二甲亚矶溶解)，实际秤量应根据药物的生物活性度。两个重要的计算公式：①重量(mg)二体积(ml)X浓度(ng/mI)/生物活性度(Ug/