维生素a对视黄醇结合蛋白基因表达效果初探

《维生素a对视黄醇结合蛋白基因表达效果初探》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、广东农业科学2009年第5期17l维生素A对视黄醇结合蛋白基因表达效果初探张冬杰(黑龙江省农科院畜牧研究所，黑龙江哈尔滨150086)摘要：采用半定量RT—PCR技术对视黄醇结合蛋白(RBP)基因的表达进行研究。在猪的成纤维细胞内添加浓度为O．5、5、10、30g，L维生素A，分别作用l2、24、48、72h后，比较分析RBP的表达情况。结果表明，添加10L的维生素A作用72h后，RBP的表达量下降了92．6％；添加5g，L的维生素A作用72h后，RBP的表达量最高，为对照组的1．7倍。适量的维

2、生素A可以诱导RBP表达，但过量的维生素A则会抑制RBP表达。关键词：猪；成纤维细胞；维生素A；视黄醇结合蛋白基因；逆转录聚合酶链式反应中图分类号：0344．13文献标识码：A文章编号：1004—874X(2009)05—0l7l—O3Primarystudyontheexpressionofretinolbindingproteingene"inducedabyvitaminAZHANGDong-jie(InstituteofanimalScience，Heilon~iangAcademico

3、fAgricultureSciences，Harbin150086，China)Abstract：Inthepresentstudy，retinolbindingprotein(RBP)expressionwasdeterminedbyRT—PCRinfibroblastceilsculturedinadditional0．5，5，10，30g／IxLvitaminAmediaandcultured12，24，48，72hrespectively．Theresultsshowedthatvita

4、minA-treatedcellexhibiteda92．6％decreaseofRBPwhichtreatedwith10Lat72hcomparedtocontrols，and1．7一foldincreaseofRBPwhilecellstreatedwith0．5g／IXLat72h．Thus，thepropervitaminAcouldinducetheexpressionofRBP，butthesuperfluousvitaminAcouldrestraintheexpressiono

5、fRBP．Keywords：pig；fibroblastcells；vitaminA；retinolbindingproteinsgene；RT-PCR视黄醇结合蛋白(RetinolBindingProtein，RBP)是和RBP之间可能存在的作用关系，以期为进一步合理利体内一类将维生素A从肝转运至靶组织以及使维生素用维生素A和RBP提供参考。A实现细胞内转运代谢的特异运载蛋白。RBP在协助维1材料与方法生素A发挥生理功能中起着无可替代的作用。RBP先与维生素A结合再与甲状腺素运载蛋白(tran

6、sthyretin．1．1试验材料YrR)结合形成维生素A—RBR复合体，经血液流经供试的大白猪成纤维细胞为黑龙江省农科院畜牧靶组织．与RBP的可识别受体结合，将维生素A转运至研究所保存的细胞系。细胞内的受体【l1。由于RBP的半衰期短，体内含量少，能1．2试验方法较灵敏地反映机体的营养状况，因此在临床上将RBP作1_2-1成纤维细胞的体外培养将大白猪成纤维细胞在为衡量机体营养状况的指标之一。有研究表明，当机体42。C水中快速解冻、复苏并传代培养至第3代，待细胞缺乏视黄醇或处于患病状态时。均可改

7、变循环中RBP水贴壁并生长状态良好后。分别加入维生素A使终浓度依平及抑制肝脏分泌RBP．且治疗前后的视黄醇／RBP比次为O．5、5、10、30gL，并分别培养12、24、42、78h。值相似，提示视黄醇与RBP之间存在着显著的相关1_2．2细胞总RNA的提取及cDNA合成按照《分性。但机体内的维生素A超出正常范围时，RBP的表子克隆》【51介绍的方法提取细胞总RNA，并使用达变化尚未见报道。为此，本研究采用半定量RT—PCRBcaBESTRNAPCR试剂盒将所提取的RNA反转录方法研究了RBP的

8、表达变化情况，并分析了维生素A成cDNA，一20℃保存。1．2．3引物设计与合成根据GenBank收录的RBP4和收稿日期：2008—12—22B—actin(内标基因)的基因序列(M68860和U07786)设基金项目：“十一五”国家科技支撑计划重点项目(2008BAD计引物P1／P2和A1，A2(P1：5一ATGGAATGGGTYB2B02)；黑龙江省博士后基金(LRB07—392)TGGGC—3。P2：5，_CTACAAAATGTTTCTTTCCGA作者简介：张冬杰(1980一)，女，博士