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时间:2018-09-17
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1、紫甘薯中两种主要花色苷的分离与结构鉴定李宇华(天津天彩生物科技有限公司,天津300301)吕晓玲,孙晓侠(天津科技大学,天津300222)摘要:本文对天津产紫甘薯花色苷利用硅胶柱层析分离纯化得到两个主要组分,应用纸层析、紫外可见光谱法、酸水解、质谱鉴定等试验技术进行结构鉴定,结果表明:紫甘薯花色苷中两个主要成分为含一分子咖啡酸和一分子阿魏酸的芍药素一3一槐糖苷一5一葡糖苷(I)和含一分子咖啡酸和一分子对羟基苯甲酸的芍药素一3一槐糖苷一5一葡糖苷(Ⅱ)。关键词:紫甘薯花色苷;分离纯化;结构鉴定。Isolatloandidentificationoftm
2、omainfrompurplesweetpotatoAbstract:AnthocyaninsfrompurplesweetpotatoinTianjinwereseparatedandpurifiedthroughcolumnchromatographyonsilicagelandtwocomponentswereobtained.TheywereidentifiedOilthebaseofPaper—layerchromatography、UV-VIS、acidhydrolyzationandMSTheconclusionisthatthetwo
3、componentswerePeonidin—-3--diglieoside--5.-glycosidewithonemolecularofcaffeicacidandonemolecularofferulicacid(I)。Peonidin:3一diglieoside-5-glycosidewithonemolecularofcaffeicacidandonemolecularofp-hydroxybenzoicacid(II).紫甘薯属旋花科一年生草本植物,其块根除含有普通甘薯的各种营养成分外,还富含具有显著天然抗氧化和清除自由基等生理活性作用的
4、天然红色素——花青素类色素。文献报道。紫甘薯所含的花青素主要是酰基化的矢车菊素和芍药素花色苷,结构中有多个酚羟基,其酰基成分也是含有酚羟基的芳香酸类,从而显示出它独特的一些生理活性:①抗氧化以及清除自由基功能;②降血脂功能;③抗高血糖功能;④抗肿瘤功能;⑤抗突变功能;⑥减轻肝功能障碍;⑦还具有抗辐射、可治疗糖尿病性视网膜病等【l‘2j。本文对天津产紫甘薯的花色苷进行分离纯化和结构鉴定.为其开发和综合利用提供必要的科学依据。l材料与方法1.1材料紫甘薯。种植于天津市东丽区。1.2主要仪器与设备ESI.MS质谱仪,美国ThermoElectronCorp
5、oration出品;CARY50Eh310—8064紫外可见102光谱扫描仪,AustraliaVARIAN出品。1.3方法I.3.1紫甘薯花色苷的提取紫甘薯_清洗_+破碎一浸提(两次).一过滤一大孔树脂吸附一鳃吸洗脱一真空浓缩_+喷雾干燥一成品一色价测定一备用紫甘薯花色苷产品按上述工艺流程由天津天彩生物科技有限公司生产,产品色价为70(1%,530hm)。1.3.2紫甘薯花色苷的分离纯化将上紫甘薯花色苷成品进一步分离纯化,先选用大型层析柱(50×800nlln),以200_300目柱层析用硅胶作为吸附介质,湿法装柱,BAW(正丁醇:冰乙酸:水=4:
6、1:5)洗脱。洗脱后经薄层层析检测合并相同组分,浓缩得到纯度较高的两个主要组分I和II;再选用小型层析柱(20x400mm)进一步纯化I和Ⅱ,乙酸乙酯:正丁醇:冰乙酸=1-3:l洗脱,合并同相,浓缩得到组分l和Ⅱ纯品。在不同的展开体系中薄层层析均只显示单一斑点?I.3.3紫甘薯花色苷两个主要组分的结构鉴定【3胡11.3.3.1组分l和Ⅱ的纸层析取四个层析缸,分别装AHW(乙酸:浓盐酸i水=15:3:82,v:V:V)、BAW(正丁醇:冰乙酸:水=4:1:5,v:v:v,上层)、BH(正丁醇:2mol/L盐酸=I:l,V:V:v,上层)、1%HCL(浓
7、盐酸:水=3:97,v.V),毛细管点样于新华3号层析纸(10×20cm)上,放入层析缸中,预先平衡15min后,再上行展开,当展开前沿达约15era处,取出纸条,晾干后观察色斑,测量其Rf值。、醋酸铅实验:纸层析展开的斑点喷涂5%醋酸铅溶液,如果出现蓝色,则证明该斑点的花色苷含有邻位酚羟基。.斑点在254nm紫外光下是否有荧光:在紫外光下观察有荧光表明该花色苷5位有取代基。1.3.3.2组分I和Ⅱ紫外可见光谱分析分别将组分I和Ⅱ的.o.0l%HCL一甲醇液作紫外可见扫描,用0.01%HCL一甲醇液作参比,扫描范围200~600nm,考察以下几点:.
8、①可见光区的最大吸收波长(kmax-“8);②添加砧3+对可见光区的最大吸收波长(hrnax.vis)的影响
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