黄芪提取物的神经营养作用研究

《黄芪提取物的神经营养作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、实旦医学杂志2010年第26卷第14期黄芪提取物的神经营养作用研究刘卉刘亚杰刘振华摘要目的：探讨黄芪提取物(EA)的神经营养作用，为EA临床治疗阿尔茨海默病(AD)提供实验依据方法：体外常规培养小胶质细胞(BV2)，收集不同浓度(20、40、80mg／L)EA作用BV2细胞24h的条件培养基，酶联免疫吸附(Elisa)法检测胶质源性神经营养因子(GDNF)含量并将条件培养基预处理原代培养的新生小鼠大脑皮层神经元6h，随后加入Ap～损伤神经元，观察细胞形态学变化并应用四甲基偶氮唑蓝(MTF)比色法检测细胞存活率。结果：

2、80mg／LEA处理的BV2细胞条件培养基GDNF释放增加，可使AB损伤的皮层神经元出现形态学变化、存活率增加，差异有统计学意义(P<0．05)。结论：EA可通过促进GDNF的释放对抗AB2的毒性而发挥神经保护作用关键词阿尔茨海默病；黄芪提取物：神经营养阿尔茨海默病(AlzheimerSdisease，AD)是一存液、DMEM／F12(1：1)、DMEM高糖培养基购自种多发于中老年期的进行性中枢神经系统退行性美国Gibico公司，At325、L一多聚赖氨酸购自美国疾病，其主要临床表现为记忆减退、认知障碍、人格Sigm

3、a公司，胎牛血清购自杭州四季青公司．二甲基改变等。主要病理特征包括：(1)颞叶和海马等部亚砜(DMSO)购自北京鼎国生物公司，小鼠GDNF位神经元的丢失；(2)细胞内神经无纤维缠结Elisa检测试剂盒购自美国Promega公司。(neurofibrillarytagles，N丌)；(3)细胞外老年斑1．2BV一2细胞培养和分组BV．2细胞株常规培(senileplaques，sP)形成，主要成分为B一淀粉样蛋养于含10％胎牛血清和青、链霉素各100U／mL的白(amyloidbeta—protein，AI3)_1]。

4、AD的病因与发病DMEM高糖培养基中，37℃、饱和湿度，5％CO2培机制尚不清楚。研究表明神经营养因子家族的缺乏养箱中培养，每天换液、2d传代培养，取指数生长与AD的发病密切相关，应用神经营养药物促进神期的细胞以5X10个／mL的密度接种于96孔板．经再生，是非常有前景的AD治疗策略。每孔200ILL，孵育2d后更换NeurobasalTM培养基，传统中药黄芪因其具有补气升阳、利水消肿、同时加入20、4O、80mg／LEA．空白对照组加入等益气固表之功效，而归属“补气”之药，列为上品。由量培养基，作用24h后收获各组

5、细胞条件培养基，于黄芪良好的免疫调节作用、抗氧化清除氧自由基Elisa法检测不同浓度EA产生的条件培养基中能力、促进细胞代谢、抗衰老等被用于神经退行性GDNF蛋白的浓度。操作参照试剂盒说明书进行。疾病的治疗，而黄芪治疗AD的作用机制是非常值1．3新生小鼠皮层神经元的原代培养取新生得关注的问题。前期研究表明黄芪提取物(EA)可24h内的昆明种小鼠，参考Viel等_3_的方法进行皮通过对抗氧化应激、干预细胞凋亡机制来减轻At3层神经元的原代培养，每2天换液。接种培养48h对神经细胞的毒性作用[=2]。为进一步探讨EA的神

6、后用于实验。经保护作用机制，本研究观察了EA对小胶质细胞皮层神经元实验分组和指标的检测皮层神经(BV2)释放脑内胶质源性神经营养因子(GDNF)的元培养4d后进行实验，分为5组：空白对照组、模影响以及EA预处理的BV2细胞条件培养基对AI3型组和20、40、80mg／LEA条件培养基组，后3组损伤的皮层神经元的影响，现报告如下。分别加入EA条件培养基预处理6h，除空白对照组1材料与方法加入等量溶剂外均加入5p~mol／LAB，继续孵育1．1实验对象和主要试剂BV．2细胞株购自协24h后观察神经元的形态改变，采用四甲基

7、偶氮唑和医科大学基础医学院，新生昆明种小鼠(<24h)蓝(M1Tr)法评价细胞活力，每孔加入5mg／mLMrITr购自南方医科大学动物中心。EA购自广东省药物液20，继续孵育4h后终止培养，弃上清，每孔研究所，NeurobasalTM培养基、B27(1：200)、双抗贮加人150IxL二甲基亚砜(DMSO)，振荡10min后置于酶标仪上，570nm波长下测定各孔吸光度(A值)，记录结果，每组设6个复孔，计算其平均值，本doi：10．3969／i．issn．1006—5725．2010．14．0O4作者单位：51028

8、2广州市，南方医科大学珠江医院神经内科实验用实验组每孔原始A值来反应细胞存活率。实用医学杂志2010年第26卷第14期1．4统计学处理实验结果用±s表示，应用2．2EA条件培养基对AB损伤的皮层神经元的SPSS13．0对结果进行单因素方差分析，进一步两保护作用倒置显微镜下可见空白对照组神经元胞两比较采用LSD—t检验，均以P≤0．05为差异有体