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《hplcelsd法测定三七叶中人参皂苷rb3、rc、rb1的含量》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第35卷第12期2004年12月一1365.HPLC-ELSD法测定三七叶中人参皂普Rb3,Rc,Rb1的含量洁‘,2,杨蓉2,张洪彬’,2(1.云南大学药学院,云南650091;2.云大科技股份有限公司,云南昆明650118)三七为五加科人参属植物三七Panaxmin350oA,15min400oA;体积流量为1.0mL/notogineseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥根。在三min;柱温为22℃;检测波长为205nmo人参皂昔七叶中以人参皂昔Rb3,R。和Rb,含量最高,是三Rb3,Rc,Rb
2、,对照品以及三七叶总皂昔样品的七叶总皂昔中的主要活性成分。从三七茎叶中提取HPLC-UV的色谱图见图to三七叶总皂昔主要含有20(S)一原人参二醇型皂昔。具有镇静安神、清热消肿、活血止血之功效,能治疗神经衰弱,神经衰弱综合症,风湿性关节炎等疾病[C1]。目前,其质量控制标准采用的是碘量法[27,为完善其质量标准,本实验对三七叶总皂昔的定量分析方法进行了研究,以人参皂昔Rb,,Rb3和R。作1一人参皂昔Rb,2一人参皂昔Rc3一人参皂昔Rb3为质量指标,采用HPLC-ELSD法进行检测,并与1-ginsenosideRb,2-ginsenosideRc3-ginsenosideRb
3、3HPLC-UV法进行了比较。图1混合对照品(A)和三七叶普(B)的HPLC-UV图1仪器与材料Fig.HPLC-UVchromatogramsofmixedreferencesubstances(A)andnotoginsengleaftriterpens(B)Agilent1100高效液相色谱仪:具有可变波长2.2.2HPLC-ELSD的色谱条件:色谱柱:Agilent紫外检测器和色谱工作站;英国PL-ELS1000型Extend-CIP,柱(250mmX4.6mm,5Lm);流动相为蒸发光散射检测器;乙睛、甲醇为色谱纯;水为二次乙睛(A)-水(B),采用梯度洗脱:0min2
4、50oA,8重蒸水;人参皂昔Rb,,Rb3和Rc对照品由云南省min3500A,15min4000A;体积流量为1.0mL/天然药物研究中心提供(纯度分别为:98.360o,min;柱温为22℃。95.3600,96.5600,归一化法测定);三七叶总皂昔ELSD参数:氮气流速为1.5mL/min,气化温(批号:20010901,20010902,20010904)为云南文山度为80℃,蒸发温度为90℃。人参皂昔Rb3,Rc,特安呐制药有限公司提供。Rb,对照品以及三七叶总皂昔样品的HPLC-ELSD2方法与结果的色谱图见图202.1溶液的制备2.1.1对照品溶液的制备:精密称取
5、人参皂昔Rb,子33.5mg,人参皂昔Rb37.5mg和人参皂昔Rc10mg,置于10mL量瓶中,加人甲醇稀释至刻度,摇匀,即得混合对照品溶液。避光保存,备用。2.1.2供试品溶液的制备:精密称取三七叶总皂昔1一人参皂昔Rb,2一人参皂昔Re3一人参皂昔Rb30.05g(精确到0.0002g),置于10mL量瓶中,加1-ginsenosideRbl2-ginsenosideRe3-ginsenosideRb3人适量甲醇,超声处理10min,冷却至室温,加甲醇图2混合对照品(A)和三七叶普(B)的HPLC-ELSD图至刻度,摇匀,即得。Fig.2HPLC-ELSDchromatog
6、ramsofmixedreference2.2HPLC-UV与HPLC-ELSD的比较试验substance(A)andnotoginsengleaftriterpens(B)2.2.1HPLC-UV的色谱条件:色谱柱:Agilent通过比较实验可以看出:HPLC-UV受噪音和Extend-C,$柱(250mmX4.6mm,5pm);流动相为梯度洗脱的影响,造成基线漂移严重,重现性差,定乙睛(A)-水(B),采用梯度洗脱:0min25%oA,8量不准确。而HPLC-ELSD灵敏度高,重现性好,并收稿日期:2004-03-21作者简介:朱洁(1973-),女,分析化学硕士,主要研究
7、方向为药物分析。Tel;(0871)5035699-8814E-mail;zhujie@eunida.com万方数据·1366·中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第35卷第12期2004年12月不受梯度洗脱的影响,较HPLC-UV优越。表2样品含f的测定结果(n=3)Table2Resultsofsamples'determination(n=3)2.3标准曲线和线性范围:精密吸取上述对照品溶人参皂昔/(mg·g-1)液5,10,15,20,2