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1、维普资讯http://www.cqvip.com第6卷第1期中国食品学报Vo1.6No.12006年3月~umalofChineseInstituteofFoodScienceand.rechn0l0gyMar.2006海参细菌的分离鉴定和生长特性研究向怡卉苏秀榕董明敏张聪林叶(宁渡大学生命科学与生物工程学院宁波315211)摘要对大连产海参(刺参)不同部位的细茵进行了分离鉴定.得到3种茵株,分别为Kocuri0r门senstacke—brandt、棒状杆菌(Corynebacteriumsp.)和有毒威克斯茵(WeeksellaviroseHolmes),其中Ko
2、curiarose0stacke—brandt在国内尚未见报道。国内的茵种库中也没有。有毒威克斯菌是一种致病菌。其余两种为优势菌。对这3种茼进行了胞外酶活性研究,同时研究了温度、盐浓度和DH值对茵生长的影响。实验结果表明:3种茵对酯均无分解能力。对蛋白有一定的分解能力。棒状杆菌、Kocur/amse0stackebrandt和有毒威克斯茵最佳生长条件分别为:20℃,pH5.5,盐质量分数3%;25oC,pH5.5,盐质量分数4%;20℃,pH6.5,盐质量分数3.5%。关键词海参(刺参)Kocuriaro5eastaekebrandt棒状杆茵有毒威克斯茼文章编号10
3、09~7848(2006)01—0025-05海参(seacucumber)属棘皮动物门、海参纲、养殖的刺参将采集后的刺参样品立即放入装有盾手目动物[】I全世界已知的海参有1100多种,海水的塑料袋中,充纯氧扎口.低温运至实验室。其中可食用海参40多种海参是不含胆固醇的动培养基:营养琼脂和检测胞外酶活性的各种物性食品。且其体内含有丰富的生理活性物质.具培养基有极高的营养价值i21。目前由于海洋污染,水质变1.2方法差,海参体内外含有很多种微生物.甚至存在着多1.2.1细菌的分离和革兰氏染色参照文献f41种致病菌[31。这是由于海参本身的水分、蛋白质含进行。量高.是一
4、种很好的培养基。极易染菌。大量微生1.2.2胞外酶活性检~lJ[51将分离纯化得到的细物的存在使得海参的食用安全性受到威胁此外菌培养24h.8000dmin离心10rain.吸取上清对海参的保鲜也产生极大的影响。海参是一种传液。用直径为0.22m的滤膜过滤得到胞外酶统食品.但市场上的海参)j~-E品种比较少.即食产产物。品几乎是空白为研究海参食用的安全性.通过抑胞外酶活性试验:将牛津杯均匀置于特定的制不利微生物的生长来提高海参的保质期.使海培养基上,注入250L无菌上清液,在35℃条件参的生产加工趋于科学化、规范化、标准化。本文下培养48h。分别用卢哥氏(Lugo1
5、)碘液、10%三氯对大连刺参活体的呼吸树、体表、消化道内细菌进乙酸、酸性氯化汞以及10%三氯化铁覆盖淀粉琼行了分离鉴定。并对不同菌种的生长条件进行脂培养基、酪蛋白琼脂培养基、胶原蛋白琼脂、吐了研究温琼脂培养基并进行染色,观测分解圈大小。1.2.3菌株的鉴定采用荧光微生物法。分别用1材料与方法GNID板、GPID板在试管中检测革兰氏阴性菌和1.1材料革兰氏阳性菌在34~36℃温度范围。利用荧光底实验样品:大连棒锤岛海珍品有限公司人工物进行32个典型的生化反应.24h后由软件自动读取。收稿日期:2005—09—181.2.4刺参细菌浓度的计算用分光光度计测定基金项目:浙
6、江省回国人才基金资助项目菌液的DD值以表示菌的生长状况。作者简介:向怡卉,女,1981年出生,硕士生1.2.5不同培养条件对菌株生长的影响分别以通讯作者:苏秀榕维普资讯http://www.cqvip.com2-乙酰氨基一2一脱氧葡萄糖苷+0[一D-葡萄糖苷酸(0.19g/L)一维普资讯http://www.cqvip.com第6卷第1期海参细茵的分离鉴定和生长特性研究从活体刺参的不同部位分离得到的3种菌可以看出,棒状杆菌、Kocuriaroseastaekebrandt株:Kocuriaroseastackebrandt、棒状杆菌(Cor~ne和有毒威克斯菌的适宜
7、盐浓度分别为4%、4%和bacteriumsp.)和有毒威克斯菌(Weeksell口irosB2%。有毒威克斯菌在不加盐的培养基中也有少量Holmes),其中Kocuriaroseastackebrandt在刺参的生长.在盐质量分数超过10%的环境中基本不体表和肠道中均有检出:棒状杆菌来源于刺参的生长。呼吸树;有毒威克斯菌来源于消化道2.2菌株的革兰氏染色和胞外酶活性试验结果表3菌株的革兰氏染色和胞外酶活性Table3Gramcolorationandactivityofectoenzym菌种名革兰氏胞外酶活性j璺染色淀粉酶胶原蛋白酶酪蛋白酶酯酶80000000
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