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时间:2019-05-14
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1、光合细菌的分离与特性研究摘要:从华南农业大学水田土壤中经过富集培养和分离筛选,得到4株光合细菌,编号为B1~B4。采用不同培养条件对菌株进行了菌株生长和色素合成情况的观察检测,结果表明,以3000lx为最优生长光照强度,以厌氧+光照为促进光合色素合成的最佳组合条件。通过对菌株B2的菌落形态、培养特征、菌体形态学观察及生理生化特性测定,初步鉴定其为胶状红长命菌(Rubrivivaxgelatinosus),该菌株发酵液对茄子、辣椒的促生作用已初有效果。关键词:光合细菌;分离;色素合成;生理生化特性Isolationandcharacteristicsstudyo
2、nphotosyntheticbacteriasAbstract:FourstrainsofphotosyntheticbacterianumberedfromB1toB4wereisolatedfromthepaddysoilofSouthChinaAgriculturalUniversitythroughenrichmentculture,isolationandscreening.Conditionofthegrowthandpigmentsynthesiswasobserved,whichshowed3000lxwastheoptimumlightin
3、tensityforgrowthandanaerobicconditionwithlighthadgreatestimpactonpigmentsynthesis.Byenrichmentandpurification,colonialmorphology,culturecharacteristicandthallusmorphologyandthedeterminationofphysiologicalandbiochemicalcharacteristics,strainB2wasidentifiedtobeRubrivivaxgelatinosus.Co
4、ntrastwithcompoundfertilizer,therewasanearlyeffectinpromotingthegrowthofeggplantandchilibyfertilizingfermentationliquorofstrainB2.Keywords:photosyntheticbacteria;isolation;pigmentsynthesis;physiologicalandbiochemicalcharacteristics光合细菌(Photosyntheticbacteria,PSB)是地球上最早出现、自然界中普遍存在、具有
5、原始光能合成体系的原核生物[1],包括产氧光合细菌(蓝细菌等)和不产氧光合细菌(红螺菌等),是一类具有相同功能———光合作用的混合菌群。不同自然环境下,光合细菌具有固氮、脱氮、固碳、硫化物氧化等多种功能[2],每一种功能都使光合细菌的研究既具理论意义,又具实用价值。已有研究表明,光合细菌发酵液中含有多种生理活性物质,如叶绿素a、b,类胡萝卜素,维生素(尤其是B族维生素),植物激素(如IAA、GA3、ABA、乙烯、细胞分裂素)和核酸、水杨酸、氨基酸以及单细胞蛋白质、辅酶Q和抗病毒因子等[3]。由于菌体本身无毒,又含有这些营养物质和生理活性物质,使其具有调节微生态
6、平衡、促进动植物生长、增加产量和提高质量等独特的生理功能,光合细菌在农业生产方面有很好的应用价值[4]。本试验从水田土壤中分离4株光合细菌进行生长影响因素检测,并对其中能在琼脂平板上快速生长的兼性需氧株B2进行了基本特性的鉴定,研究此菌株发酵液对农作物的促生作用,以进一步研制光合菌肥制剂。1材料与方法1.1培养条件分离培养基每1000mL水中加入KH2PO40.5g,K2HPO40.6g,(NH4)2SO41.0g,MgSO4·7H2O0.2g,NaCl0.2g,CaCl2·2H2O0.075g,乙酸钠1.5g,酵母膏0.1g,微量元素液1.0mL(H3BO3
7、0.28g、NaMoO40.075g、CuSO40.004g、MnSO40.21g、ZnSO40.024g、水1000mL),pH为7.2(±0.2)[5]。富集培养液设置为分离培养基各营养成分的3倍。培养温度选择28℃[6]。1.2光合细菌的富集与分离筛选分离源为华南农业大学教学试验农场的水田土壤。称取水田土壤10g,加无菌水50mL充分振荡打散,制成悬浊液,与富集营养液按1∶5比例装人三角瓶中,并覆盖一层无菌液体石蜡(高约2cm),封口,静置于光照培养箱,28℃培养7~14d,待瓶壁上长出黄、绿、红、紫红等多种不同颜色的菌株,取此菌悬液1mL继续富集培养,
8、持续培养至第3代。采用梯度平板涂布法和
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