微生物综合实验设计方案(1)4

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1、微生物综合实验设计方案第八小组（曹婉仪蔡楚萍贝锦涛张韵红）一、取样取三个经高压蒸汽灭菌的锥形瓶，于华师校园内湖中取水样。为使取样具有代表性和全面性，分别选取三个取样点，取样点1：湖的东面，取样点2：中间湖边，取样点3：湖的西面，分别编号1.2.3，于水面以下10cm，取水各100mL，盖好瓶塞。器具：三角瓶*3个二、测水体pH值为了大致地确定水体微生物的生长适宜pH（个人感觉这说法有点奇怪，好像暗示测出来的pH就是适宜生长的pH似的，至少改为：为了了解华师湖水的pH吧，或者改为其他更好的说法）话说，我们就是大概要测一下它们大致的破H呀~这是我们的目的呀~，取好水样后，分别

2、用pH计测量三个水样的值，每个水样各测量三次，取平均值。将三个水样混合均匀，得到混合水样，用pH计测量pH三次，取平均值。器具：pH计三、分离提纯2种微生物1、材料：混合水样2、方法操作名称具体步骤试剂和材料器具（经高压蒸汽灭菌）配置牛肉膏蛋白胨固体培养基400mL1、配置牛肉膏蛋白胨固体培养基400mL，分装于两个三角瓶2、高压蒸汽灭菌（灭菌材料：250ml三角瓶*5，培养皿*1616个，分别是：稀释涂布8个，两次划线各4个~~，试管*11，1ml移液管*5,10mll量筒*1）觉得量筒没有必要灭菌的~~3、倒16个平板4支试管斜面（按原来写的也要13个平板，我不是很懂

3、怎么会有13个呢？~~怎么会是10个，而且还没有设置对照的平板；如果要作×10000觉得没有必要做*10000的~~太大了吧a/~~如果还是怕菌太多了~~那就少加一点水样不就得了~，还要更多平板。我觉得做15~20个平板比较好。NaCl2g蛋白胨4g牛肉膏1.2g400mL水1mol/LNaOH1mol/LHCI(pH7~7.6)高压蒸汽灭菌锅天平玻璃棒500ml大烧杯*1个250ml三角瓶*2个封口膜*2张绳子*2条培养皿16套试管*4个胶塞/棉塞*4个报纸多张稀释涂布分离微生物1、取0.2ml混合水样进行稀释，设置四个梯度：原液、×10、×100、×混合水样蒸馏水恒温

4、培养箱1000，分别装于4个试管中，标明稀释度，每种稀释度5ml2、涂布8个平板3、37℃恒温培养箱中倒置培养24h空白平板*8个1ml移液管*5个10ml量筒试管*4个酒精灯酒精棉球涂布器标签纸平板划线分离微生物1、选取稀释涂布平板操作中分离程度较好的两种微生物涂布分离之后，我们针对的对象就是细菌~所以，只用一种培养基~培养时间也不用变化的~的平板菌落，进行平板划线，各划线2个平板2、37℃恒温培养箱中倒置培养24h涂布分离的平板空白平板*4个恒温培养箱酒精灯酒精棉球接种环标签纸平板划线分离微生物1、两种微生物均选取划线操作效果好的菌落，进行第二次平板划线操作，各划线2

5、个平板2、37℃恒温培养箱中倒置培养24h第一次划线分离的不同菌种的平板*2个空白平板*4个恒温培养箱酒精灯酒精棉球接种环标签纸平板菌种接种到试管保藏1、用接种环把菌种接种到试管斜面，每个菌种接种2个斜面2、37℃恒温培养箱中培养24h3、待菌种在固体斜面培养基上生长丰满后，注明菌类或菌种名、保藏日期、保藏人，然后置于4~8℃的冰箱中保存第二次划线分离的不同菌种的平板*2个空白斜面培养基*4个恒温培养箱冰箱酒精灯酒精棉球接种环标签纸四、革兰氏染色觉得可以写成列表的形式~这样看起来好像整洁一点哦~·~所以我把它改成了这样子~~细菌的革兰氏染色1.实验材料1.1材料第二次划线

6、分离的不同菌种的平板*2个1.2试剂：无菌水、结晶紫、碘液、95%乙醇、番红1.3器具载玻片、接种环、酒精灯2.实验方法步骤序号操作名称操作方法1制片①涂片：滴1滴无菌水于载玻片，挑取少许菌体与水滴均匀混合②干燥：火焰上方略加温③固定：用加热法，通过火焰3次2染色结晶紫初染1min，水洗；碘液媒染1min，水洗；95%乙醇脱色20~30s，水洗；番红复染1min，水洗3镜检显微镜油镜观察五、观察细菌的形态特征在高倍镜和油镜下观察细菌形态，拍下照片，画图，描述形态特征器具觉得写成“工具”好一点吧~：显微镜六、生理生化试验（淀粉水解、糖酵解）（1）淀粉水解实验还是觉得列表的形

7、式好点的~~操作名称实验方法接种以无菌操作技术，把两个菌种接种到同一个平板上，划成“+”字形，平板的一边接一个种培养在平皿用“培养皿”正规点吧~~底部做好记号，盖上盖，37℃恒温培养箱中倒置培养24h检验感觉用“检验”不是很好~平皿盖打开，滴加卢卡氏碘液于接种处记录结果有水解圈：淀粉水解实验阳性，用+表示；无水解圈：淀粉水解实验阴性，用-表示(2)糖酵解实验同样的~~把它也调整成列表格的形式~1实验材料1.1实验材料第二次划线分离的不同菌种的平板*2个、空白平白*1个、试管*5个1.2实验试剂卢卡氏碘液,葡萄糖发酵培养基试剂[