细胞生物学总复习

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1、1绪论细胞生物学：从细胞的显微、亚显微和分子三个水平研究细胞结构、功能和各种生命活动规律的科学。由细胞学发展而来。细胞cell：能进行独立繁殖的有膜包围的生物体的基本结构和功能单位。一般由质膜、细胞质和核（或拟核）构成，是生命活动的基本单位。细胞学说celltheory：1.认为细胞是有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成；2.每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命有所助益；3.新细胞可以通过老细胞的繁殖产生；细胞生物学发展史的主要事件细胞生物学的历史大致可以划分为四个主要的阶段：第一阶段：细胞的发现，16世纪末-1

2、9世纪30年代。1590第一台复式显微镜。1655英国RonertHooke首次描述了植物细胞，命名为cella。1674荷兰A.vanLeeuwenhoek发明了世界上第一台光学显微镜,并利用这台显微镜首次观察到了血红细胞，发现细胞核结构。第二阶段：细胞学说提出，19世纪30年代-20世纪中期。1838德国施莱登、施旺提出细胞学说。1855德国魏尔肖提出“一切细胞来源于细胞”，进一步完善了细胞学说。1879德国W.Flemming观察到蝾螈细胞有丝分裂。1883比利时E.vanBeneden发现减数分裂。第三阶段：超微结构研究，20世纪30年代-70年代。1944美国O.Avery，C

3、.Macleod和M.McCarthy证明DNA是遗传物质。1953美国J.D.Watson和英国F.H.C.Crick提出DNA双螺旋模型。1965美国蒋有兴证实人的2n染色体为46条。1961-1964美国M.W.Nirenberg破译DNA遗传密码。第四阶段：分子细胞生物学，20世纪70年代分子克隆技术出现以来。1973美国S.Cohen和H.Boyer将外源基因拼接在质粒中，在大肠杆菌中表达，揭开基因工程的序幕。1975英国F.Sanger设计出DNA测序双脱氧法。1975德国G.J.F.Kohler，阿根廷C.Milstein丹麦N.K.Jerne发展单克隆抗体技术。或：五个时

4、期，细胞质的发现、细胞学说的建立、细胞学的经典时期、实验细胞学时期、细胞生物学时期2细胞生物学研究方法分辨力resolution：又称分辨本领，指将临近两点清晰区分辨认的能力，分辨物体最小间隔的能力。原代培养primaryculture：培养直接来自动物机体的细胞群。细胞株cellstrain：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。细胞系cellline：从肿瘤细胞培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，可无限繁殖。克隆clone：亦称无性系。只有同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。光学显微镜（正置、倒置、荧光）、电子显微镜（扫描、透射）的成像

5、原理光学显微镜：利用凸透镜的成像原理，由目镜与物镜共同组成光学成像系统。倒置inversemicroscope：物镜（载物台下）与照明系统（载物台上）颠倒。荧光fluorescencemicroscope：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜。有两个特殊的滤光片。照明方式通常为落射式。电子显微镜：透射transmissionelectronmicroscope，TEM：D=0.2mm。以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。扫描scanningelectronmicroscope，SEM：D=6-10nm。极细的电子

6、束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。电镜标本的制备方法透射电子显微镜TEM：取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、观察。扫描电子显微镜SEM：取材、清洗、固定、脱水、干燥、镀膜、观察。激光共聚焦显微镜的原理是什么？激光共聚焦显微镜（laserconfocalscanningmicroscope，LCSM）：以单色激光为光源，使样品被激发出荧光，利用计算机进行图像处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。由于照明孔与检测孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点

7、同时聚焦于检测孔和照明孔，焦平面以外得点不会再检测孔处成像，从而得到清晰的象。流式细胞仪工作原理是什么？流式细胞仪（flowcytometer）：包在鞘液中的细胞通过高频振荡控制的喷嘴，形成包含单个细胞的液滴，在激光束的照射下，这些细胞发出散射光和荧光，经探测器检测转换为电信号，送入计算机处理，输出统计结果。并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群，分离纯度可达99%。免疫组化的原理是什么？免疫组化（immunocytochemist