海燕体壁胶原蛋白提取工艺的初步研究

《海燕体壁胶原蛋白提取工艺的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第26卷第1期大连海洋大学学报V0l_26NO．12011年2月JOURNALOFDALIANOCEANUNIVERSITYFeb．2011文章编号：2095—1388(2011)O1—0054一o4海燕体壁胶原蛋白提取工艺的初步研究刘远平，张琳琳，张慧怡，赵丹，马然，汪秋宽(大连海洋大学辽宁省水产品加工及综合利用重点开放实验室，辽宁大连116023)摘要：采用两种不同的方法从海燕Asterinapectinifem体壁中提取出酸溶性胶原蛋白(ASC)和胃蛋白酶促溶性胶原蛋白(PSC)。结果表明：ASC

2、的最佳反应条件是，温度为10℃，提取液种类为乙酸一乙酸钠溶液，提取液浓度为0．5mol／L，提取时间为72h，ASC得率为7．93％；PSC的最佳反应条件是，温度为17℃、胃蛋白酶酶加量为4％、提取时间为96h，PSC得率为49．61％。经紫外光谱和氨基酸组成分析，结果表明，ASC和PSC均为典型的I型胶原蛋白。关键词：海燕；酸溶性胶原蛋白；酶促溶性胶原蛋白；提取工艺中图分类号：$986文献标志码：A胶原蛋白是动物结缔组织的主要成分，是动物内脏，冲洗干净，冷冻备用。体内含量最多、分布最广的蛋白质。胶原蛋

3、白广泛胃蛋白酶购自Sigma公司，浓盐酸、冰醋酸、存在于动物的皮肤、骨骼、牙齿、韧带和血管中，乙酸钠均为分析纯。起着支撑器官、保护机体的功能】J。胶原蛋白现1．2主要仪器与设备已广泛应用于食品、化妆品、营养保健品、生物肥料以及医用材料等领域J。牛、猪的皮和骨中的主要仪器有：FD一4冷冻干燥机、FJ一300一S胶原蛋白一直作为工业用胶原蛋白的主要来源。近高速均质机、GL一21M冷冻离心机、uV一754分年来，由于哺乳动物疫病的爆发和人畜共患病的增光光度计。加，使其安全性受到了怀疑。世界各国都在积极寻1．3

4、方法找更安全的胶原蛋白来源，从水生动物中提取安全、卫生、无公害的胶原蛋白已成为各国研究的热1．3．1原料预处理将海燕体壁破碎后浸泡于门课题。国内外对鱼类胶原蛋白的研究较深0．4mol／L的盐酸溶液中，搅拌，每日更换盐酸一入]，关于无脊椎动物如海蛰引、海参]、多次，至海燕体壁变软后用清水漂洗至pH为5．0。棘海盘车H。。胶原蛋白的研究也有报道，但尚未见将漂洗后的海燕体壁浸泡于0．3mol／L的NaOH溶关于海燕胶原蛋白研究的报道。液中，每隔2h更换一次溶液，搅拌6h，漂洗至海燕Asterinapectin

5、ifer口俗称海星，属海星纲有pH为8．0，用高速均质机匀浆，真空冷冻干燥。棘目海燕科，常见于中国黄海、渤海一带，是分布以上操作均在4℃以下进行。广泛的海洋生物资源之一。海燕的体壁较宽厚，1．3．2酸溶性胶原蛋白的提取准确称取9份同韧性极强，含有丰富的胶原蛋白。本研究中，作者等质量经预处理的海燕体壁，加入提取液进行提取对海燕体壁胶原蛋白的提取工艺进行了初步研究，(W(海燕体壁)：(提取液)=1：20)，以提取旨在为其胶原蛋白的开发利用提供参考。液种类、反应时间、提取液浓度和温度为试验因素1材料与方法进行

6、酸解正交试验。提取完成后，将混合物以5000r／min离心30min；向上清液中加入NaCI使1．1材料终浓度达到2．5mol／L，静置24h后以10000r／min离心30min，将沉淀物透析脱盐后冷冻干燥，将新鲜海燕(大连獐子岛渔业集团提供)去收稿日期：2010—03—11基金项目：农业部“948”项目(2006一G44)作者简介：刘远平(1984一)，男，硕士。E—mail：yupylau@126．eOll通信作者：汪秋宽(1962一)，女，教授。E—mail：wqk320@dlou．edu．cn

7、第1期刘远平，等：海燕体壁胶原蛋白提取工艺的初步研究55即得酸溶性胶原蛋白(ASC)。ASC正交试验因素品，在减压充氮条件下用6moL／LHC1于110℃下和水平如表l所示。水解24h。采用日立835—50型氨基酸分析仪对样表1酸溶性胶原蛋白正交试验因素水平表品进行检测。Tab．1Thefactorandleveltableintheorthogonalexperi-mentofASC2结果与讨论2．1提取方法的优化ASC提取的正交试验设计及试验结果见表3。极差分析结果表明：在ASC提取过程中，反应条件

8、对ASC提取率影响的因素主次顺序为提取液种类、提取液浓度、提取时间和提取温度，最佳试验组合为ABCD：，即制备ASC的最佳提取条件是：温度为10℃，提取液种类为乙酸一乙酸钠溶液，提取液浓度为0。5mol／L，提取时间为72h。1．3．3酶促溶性胶原蛋白的提取准确称取9份在此最佳试验组合条件下进行验证试验，ASC的提同等质量经预处理的海燕体壁，用最佳酸溶性胶原取率为7．93％。表3ASC提取的(3‘)正交试验设计及试验结果蛋白提取工艺进行提取