水解胶原分子量测定方法的探讨

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1、第3O卷第1期明胶科学与技术V01．30．No．1201O年3月TheScienceandTechnologyofGelatinMar．2010．水解胶原分子量测定方法的探讨黄惠君译编原京安科技信息服务中心，北京100011摘要：本文简单地评述了行业标准“水解胶原生变化，所以软凝胶柱的工作效率不高，不宜蛋白QB2732—2005”的若干值得商榷的问题。作为工艺控制的手段；同时，在确定标准时，未介绍和推荐并比较了三种应用于表征水解胶见到有关胶原蛋白(肽)与所用标准样分子量原(hydrolyzedcollagen，nc)分子量的方法。高之间的对比实验结果。因此

2、，在标准中使用此压分子尺寸排阻色谱法(}ligh—pressuresize—方法的可靠性、可信性和适用性还值得作进一exclusionchromatoo'aphy，I-IPSEC)采用一种亲步的探讨。水性的大孔共聚物树脂色谱柱和一种含变性水解胶原(及明胶水解物)是由动物(牛、剂的水性洗脱液，用以测定分子量分布、重均猪、家禽和鱼)皮和骨内所含的胶原衍生得到分子量和数均分子量；并验证了用在标准条件的蛋白质。其特征与性质表现为：水溶液极低下测定的黏度和用甲醛滴定法测定的数均分的黏度、极淡或无气味、无色、透明、具乳化和子量相对应地与用HPSEC测定的重均分子量稳定

3、作用、起泡和成膜性能、溶解性、可分散(对数坐标)和数均分子量的相关性。性、粉末的可压缩性、可结合某些物质和低过敏性。水解胶原通过口服食物及药物方式进上世纪70年代末、80年代初，原上海骨入体内，对皮肤和头发表现出极大的适应性，胶厂工程技术人员胡维廉、臧怀祖等试制明胶有利于它们的生长和修复。大量的研究表明。水解物并用于当时的上海家化日用品厂的产水解胶原有利于骨关节炎和骨质疏松症的缓品生产，引起行业同仁们的关注。原北京化工解和治疗。学院黄明智等就明胶水解物的制备和特性作在工业生产中，胶原、水解胶原的分子量较深入的研究，在物质条件颇为困难的情况分布、结构和组成，

4、和与之相关联的功能性质下，建立了不算十分精确但却能解决问题的简取决于加工条件，以及用于胶原水解的原料和便的分子量及分子量分布的实验方法，这一测酶的专一性。据近一、二十年的专利介绍，某定方法可能就是现行行业标准中“相对分子质些产品所使用的水解胶原蛋白肽对分子量及量”测定方法的基础。但随着时代的前进、科分子量分布有特殊的要求，就要求在生产工艺技的进步，这一方法已不能完全适应作为工艺中使用简单而精确的分子量测定方法，以保证控制和产品质量控制的要求，特别是行业标准水解胶原制造过程及水解胶原分子量分布的“水解胶原蛋白QB2732—2005”【l中用Sepha—控制。

5、dex50作为色谱柱的起层析功能的多孔凝胶，本文的目的就是在于推荐适用于工业生其排阻限(2oooo～500)(G50排+阻限参阅文产的简单而精确的方法来表征工业规模生产献)有限，像Sephadex50这样的软凝胶柱进的水解胶原的分子量及分子量分布。行层析时压力差较小，致使层析速度不高，而Htx3EC(高压分子尺寸排阻色谱法，hi小一若超过容许的压差则将使色谱柱工作性能发pressuresize—exclusionchromatography或高效·36·明胶科学与技术2010年3月分子尺寸排阻色谱法，h础一performancesize—探究水解胶原的平均

6、分子量与在标准条件下exclusionchromatography)，属于凝胶渗透色谱所测定的黏度问存在这种关系的可能性。(gelpermeationchromatography，GPC)或凝胶过Denis等人“副就上述三种方法进行了实滤色谱(gelfiltrationchromatography，GFC)，广验，并作了比较。现简要介绍于后。泛地用于测定聚合物，特别是蛋白质、明胶bj、肽L7们的分子量分布和数均与重均分1材料与方法子量。1．1水解胶原试样与试剂聚合物的数均分子量也可以通过端基分用不同原料(牛、猪或鱼)以不同加工过程析进行测定。在蛋白质的情况

7、下，如胶原、明生产的水解胶原进行实验。胶和水解胶原的端基通常都是N一端氨基酸十二烷式硫酸钠和36％^的甲醛水溶液。残基(a一氨基)。Courts在多次研究报告中提1．2分子大小排阻色谱到这种端基分析法⋯]对于在评价胶原转变分子大小排阻色谱法是I』)ⅡvandVedrines[5J为明胶时链长和断裂的肽键的类型是极有价在第4次IAG学术报告会上发表和介绍的，用值的工具。此方法的原理是：2，4～二硝基氟以计算水解胶原较低的分子量，并与明胶进行苯(2，4一dinitrofluorobenzene，DNFB)加成于游比较。离的氨基，得到二硝基苯基衍生物(DNP)，

8、此色谱柱使用一组具有亲水多羟基功能的衍生物在随后的蛋白质水解中有足