天然蜂胶对自由基的清除作用

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1、食品与发酵工业M55LN:LMO4;O:PNP75:Q:LR8P47O8<56S0-T5S"天然蜂胶对自由基的清除作用张燕平（杭州商学院食品、生物与环境工程学院，杭州，!"##!$）摘要研究不同溶剂蜂胶提取物对二苯代苦味酰自由基（%&&’）的清除作用，同时用硫代巴比妥酸（()*）法测定其对亚油酸的抗氧化性。实验表明，体积分数为+$,乙醇提取物对%&&’自由基的清除作用强于其他提取物。其最佳提取工艺为，体积分数+$,乙醇于-$.浸提!/。初步鉴定出蜂胶中含有黄酮、查耳酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮等物质。()*法测定的结果同%&

2、&’法结果一致。关键词蜂胶，二苯代苦味酰自由基，硫代巴比妥酸蜂胶（34535678）是雌性蜂从多种植物的种天然抗氧化剂对照，用()*法比较不同溶特定部位，主要是新生枝芽或树皮上采集的剂提取物的抗氧化性能。从而达到选择最佳树脂并混入其上鄂腺分泌物和蜂蜡等加工而提取物的目的，并对其成分进行初步鉴定，以成的芳香性胶状固体物。研究表明，蜂胶的便为开发新的天然抗氧化剂提供一些方法。作用非常多，主要是对人体免疫系统的影响，"材料与方法表现为免疫防御、免疫自稳、免疫监视三方面的生理功能。蜂胶还具有降血脂、抗菌防腐、!"!试剂与材料抗原虫、

3、止痛及促进组织再生、促进生长发蜂胶原料：由杭州蜂业公司提供；育、治疗糖尿病、抗氧化、抗衰老等功效。蜂%&&’：东京化城工业株式会社，分析纯；芦胶既可作为健康滋补食品，也可作为天然抗丁：分析纯，*?@AB（CB*）；<：色谱纯，=D=氧化剂［"!!］。E=@?F；槲皮素：生化试剂，上海试剂二厂；%&&’（二苯代苦味酰自由基）在有机溶茶多酚：食品级。剂中是一种稳定的自由基，其孤对电子在!"#仪器$"9:;附近有强吸收（显深紫色）。当自由90!分光光度计：上海第三分析仪器厂；基清除剂存在时，孤对电子被配对，吸收消失三用紫外线分析仪

4、：上海顾村电光仪器厂；层或减弱，通过测定吸收减弱的程度，可评价该析柱（"G#H;I$#H;）。自由基清除剂的活性。!"$实验方法()*法是油脂氧化后期败坏程度的指"G!G"蜂胶原块抗氧化活性成分的提取标。含油脂物质深度氧化的产物之一为醛类将冷冻蜂胶原块粉碎均匀混合后，分别物质，因此常以丙二醛作为设想指标，其与称取$#J，按固液体积比为"K>浸泡于体积()*作用生成()*染料，呈红色。最大吸分数+$,乙醇、乙酸乙酯、正丁醇和甲醇、丙收波长为$!0:;，比色测定丙二醛的量，从酮、乙醚、水、三氯甲烷，放置阴暗处，$L后浸而说明油脂

5、的氧化变质程度。提回收溶剂液得浸膏。采用不同溶剂提取蜂胶原块中的抗氧化"G!G0不同溶剂蜂胶提取物中总黄酮的测活性成分。用%&&’法比较它们清除自由定———芦丁标准曲线法［$］基的能力，并与茶多酚、<=、芦丁、槲皮素>精确称取无水芦丁#G#"##J，加乙醇定作者：学士，高级实验师。收稿时间：0##"1#-1"2，改回时间：0##"1"#1"$>-万方数据第&.卷第(期张燕平：天然蜂胶对自由基的清除作用容!"#$，制成每毫升含"%&#’芦丁的溶在!(:-#（最大吸收波长处）测定其吸光度。液。吸取该溶液(、&、)、*、!、+#$

6、，分别置&!蜂胶其有效成分对7889的清除率!可用#$容量瓶中，加水至+#$，加*)#’／$亚硝下式计算：酸钠溶液(#$，摇匀，静置+#,-；加(""#’／!"［(#（$,#$?）／$@］%(""&$硝酸铝溶液(#$，摇匀，放置+#,-；加*%)式中：$,A&#$7889溶液B&#$待测溶#’／$氢氧化钠溶液("#$，加水稀释至刻液的吸光度值；度，摇匀，放置(!#,-，在波长!""-#处测定$?A&#$待测溶液B&#$溶剂的吸吸光度。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，光度值；对所得数据进行回归。精确称取"%("""’.$@A&

7、#$7889溶液B&#$溶剂的种溶剂蜂胶提取物，分别用体积分数/!0乙吸光度值醇定容于(""#$容量瓶中，各取(#$分别(%)%!柱层析对蜂胶乙醇提取物的分离置于&!#$容量瓶中加水至+#$，空白对照称取.%"’聚酰胺细粉（+"!(&"目）加直接加水+#$置&!#$容量瓶中。其余操入体积分数:"0乙醇饱和后，湿法装于层析作同芦丁标准曲线的绘制方法。柱中，备用。称取精制蜂胶（按最佳工艺提取［+］(%)%)蜂胶乙醇提取条件的正交试验并脱蜡）"%!"""’（精确至万分之一），用体积为全面考察蜂胶乙醇提取工艺的条件，分数/!0乙醇定

8、容于&!#$容量瓶中备用。采用三因素三水平的正交试验，通过对蜂胶取(#$样液上柱，用体积分数:"0乙醇洗乙醇溶液提取过程中的醇浓度、提取温度、浸脱，接收洗脱液共()管。重复上述操作，将提时间三因素的考察，研究提取工艺的最佳各洗脱液回流浓缩，并用C$5鉴定，合并同因素，实验方案如表(所示。类