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《薄层色谱紫外分光光度法定量测定微生物发酵产物辅酶q10》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、应用与环境生物学报!"##$,!"(%):&"#’&"%!!!"#$%&’’()$*#+,$-#,((.//0122343567!"##$)#$)"*!薄层色谱紫外分光光度法定量测定微生物发酵产物辅酶+,#,,",,,!郜晓峰!范成英!何开泽!官家发,"(中国科学院成都生物研究所!成都!$,##&,;中国科学院研究生院!北京!,###&-)摘!要!报道了一种微生物发酵液中辅酶+,#的定量检测方法.该方法分为两个步骤:第一步是离心收集菌体和结合使用超声波处理的辅酶+,#丙酮抽提;第二步是硅胶薄层色谱,根据标样位置取产物斑点乙醇洗脱后用紫外分光光度法测定
2、辅酶+,#含量.结果表明,该方法具有操作简便、重复性好、相对误差小等优点,可用于细菌发酵生产辅酶+,#研究过程中发酵产物的快速定量检测.图"表"参$关键词!辅酶+,#;薄层色谱;紫外定量分析#$#!+-%-.-/"0+&$&.1"2$*/%&’()*)’)*+,-(’./0*012#1,(3/4,5%,#26147*8619*’.#&.)&6,9/:$#5;<=>,8)61>?1)14,)6/,,",,,!34256789:;<,=4>?@:;H6797,(!"#$%&’($)*+*’*#,-.+,/,%0,!"+
3、$#)#123(,-52+#$2#),?@:;4、IV7QN@:;JQ:I98TMJ7;N6N7N6O:7;7PAQ6Q89?8+,#.0@:S:N@8IV7Q98J;IV6N@<88IT:W:7N7U6P6NA7;IQN7U6P6NA.[6N@N@6QS:N@8I,N@:?8+,#6;S6RT8U67PRJPNJT:R8JPIU::7Q6PA7;IT7W6IPA7;7PAQ:I.=6<",07U",:9$@,/A16B0!R8:;EAS:)+,#;0Y?)QW:RNT8W@8N8S:NTA;GZ)MJ7;N6N7N6O:7;7PAQ6Q#$#!+-%-.-/"0+&$&.1"2$*/!!辅酶+,
5、#是类维生素物质,为脂溶性醌类化合物,是细胞,.,!仪器呼吸链上的一种递氢体.化学名为",%)二甲氧基)*)甲基)$)癸/*,型紫外光光度计,上海第三分析仪器厂.^=)_三用紫[,]异戊烯基苯醌,分子式为?*-B-#2".辅酶+,#作为一种多功外分光仪,上海顾村电光仪器厂.高速冷冻离心机,日立"#‘)能的生化药物,临床上可用于癌症的辅助治疗;用于治疗冠心*"#.超声波清洗器,杭州托普仪器有限公司.‘:Ta6;CPS:T病、心衰和心率失常等各种心脏病,对急慢性病毒肝炎、糖尿Y7SUI7%*紫外b可见分光光度计.砂芯漏斗,由成都万科实业病、牙松动、肌无
6、力、再生障碍性贫血、胃十二指肠溃疡和帕金有限公司根据3="*&硅胶直径特制.3="*&硅胶层析薄板(,#[",%]森综合症等多种疾病也有辅助疗效.RSc"#RS),自制.辅酶+,#的生产方法主要有动植物组织提取法、植物细胞,."!主要试剂及标准品培养法、化学合成法和微生物发酵法.与其它生产方法相比,微无水乙醇、苯、丙酮均为国产分析纯.辅酶+,#标准品,购生物发酵法原料廉价丰富,可以通过发酵罐法实现工业化生自中国药品生物制品检定所.[&]产,成为最具发展潜力的辅酶+,#生产方法,因此微生物发,.%!试验菌种酵法生产辅酶+,#早已发展成热点课题,但研究进
7、展十分缓放射形土壤杆菌(1%7,:32*#7+’473&+,:32*#7),中国科学院慢,主要技术难点是缺乏发酵产物的快速定量测定方法.本文成都生物研究所保藏菌株.报道一种基于丙酮超声提取和薄层色谱紫外分光光度法定量测定细菌细胞中辅酶+,#的方法,本方法简便、准确,且能相对,.&!培养基快速地测定发酵液中辅酶+,#含量,可用于微生物发酵生产辅种子培养基:蛋白胨,#<,牛肉膏*<,>7?P*<,蒸馏水酶+,#的研究和生产.,###SY,WB/."’/.*.发酵培养基:葡萄糖,#<,蔗糖"#<,玉米浆,#<,(>B&)"d2&*<,e8、B"‘2&,.*<,D",!材料与方法B‘2&,.*<,酵母膏"<,蒸馏水,###SY,WB/."’/.*.