血浆辅酶q10的高效液相色谱快速测定

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1、第25卷第2期分析测试学报Vol.25No.22006年3月FENXICESHIXUEBAO(JoumalofInstrumentalAnalysis)106一108蒸聂琴箕宜妻夔夏玉血浆辅酶Q,。的高效液相色谱快速测定江平1,2,何代平‘,许国旺2(1.西华师范大学化学化工学院,四川南充637002;2.中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023)摘要:建立了一种简单快速测定血浆辅酶Quo(CoQio)的反相高效液相色谱方法。血浆经正丙醇萃取,上层清液直接进样分析。色谱柱为HypersilODS25HLm,150mmx4.6mmi.d.,以异丙醇一甲

2、醇(体积比1:9)作流动相,275nn作检测波长,外标法定量。在0.05一20mg/L范围内,峰高与质量浓度呈良好的线性关系(r二0.9998),血浆中辅酶Q,。的检出限为0.03mg/L(S/N=3)。该方法简单、快速、精密度高(RSD<5%),适宜于血浆辅酶Q,。含量的检测。关键词:血浆;辅酶Qio;高效液相色谱中图分类号:0657.72;Q551;Q592.1文献标识码:A文章编号:1004-4957(2006)02-0106-03RapidDeterminationofCoenzymeQ1oinHumanPlasmabyHighPerformanceL

3、iquidChromatographyJIANGPing''',HEDai-ping',XUGuo-wang'(1.DepartmentofChemistry,ChinaWestNormalUniversity,Nanchong637002,China;2.DalianInstituteof、ChemicalPhysics,theChineseAcademyofSciences,Dalian116011,China)Abstract:Asimpleandrapidhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)methodf

4、orthedeter-minationofcoenzymeQ,o(CoQ,a)inhumanplasmawasdeveloped.CoQ,ocanbedissociatedfromlip-oproteinsandcompletelyextractedinton-propanol.Aftercentrifugation,thesupernatantwasfiltratedandanalyzedbyHPLC.HypersilODSZ5[Lm(150mmx4.6mmi.d.)was.selectedastheanalyticalcolumn,isopropanol一

5、methanol(1:9byvolume)asthemobilephasewithflow-rateof1.5mUmin,andUV275nmasthedetectionwavelength.ThelevelofCoQ,owasquantitativelydeterminedbyanexternalstandardmethod.Thelinearrangeofthecalibrationcurveofconcentration。一peakheightis0.05一20mg/Lwithacorrelationcoefficientof0.9997.Thedete

6、ctionlimitofCoQ,oinplasmawas0.03mg/L(S/N=3),ThismethodissuitableforthedeterminationofCoQ,oinhumanplasma.Keywords:Plasma;CoenzymeQ,o;HPLC辅酶Y1o(CoQ1o)是一种脂溶性的类维生素物质,广泛存在于动物、植物、微生物的细胞内并与线粒体内膜相结合。COQ,。的生物活性主要来自其醒环的氧化还原特性及其侧链的理化性质(结构见图1)。COQ,。是细胞代谢和细胞呼吸的激活剂,具有天然的抗氧化活性,能保持膜质流动性并增强人体非特异性免疫功

7、能[‘一’」。研究表明,细胞组织缺氧或肌体代谢过旺都会引起体内COQ,。的消耗,此外,HMG一COA还原酶在抑制胆固醇合成的同时也阻碍了体内COQ,。的生物合成〔’〕。因此,检测CAo的含量具有重要的生物学意义。CH30CH3对COQ,。的含量检测已有很多报道:光度法L3-4]、色谱CH30H2-CH=C-CH2}-toH法[1,2,5-91、伏安法[‘。]、化学发光法[川、荧光法[”口、电子磁共振法〔”〕等,其中最常用的还是液相色谱法。COQ,。和脂质结合在一起,图1CoQ,o的结构文献〔9」报道了其在各类脂质中的分布:低密度脂蛋白中占60%,Fig.1St

8、ructureofCoQ,o高密度脂蛋

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