玉米内生细菌y19的荧光标记及其在玉米体内的定殖应用效果

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1、玉米科学2015，23(3)：50～56JoumalofMaizeSciences文章编号：1005—0906(20l5)03—0050—07DOI：10．13597~．cnki．maize．science．20150309玉米内生细菌Y19的荧光标记及其在玉米体内的定殖应用效果蒋晓玲一，何鹏飞，王娅玲。，郭力维，吴毅歆。，杨静，何月秋。(1．云南农业大学植物保护学院，昆明650201；2．微生物菌种筛选与应用国家地方联合工程研究中心，昆明650207；3．云南农业大学农学与生物技术学院，昆明650201)摘要：Y1

2、9是从玉米种子分离的具有促生、防病效果的解淀粉芽孢杆菌。为探究其在玉米体内及根围土壤中的定殖情况，通过自然转化方式将含有绿色荧光蛋白基因gfpmut3a的质粒pHAPII导入Y19，获得具有良好荧光表型的标记菌株Y19一GFPmut3a。室内平板对峙、玉米盆栽促生定殖实验的结果表明，质粒的引入对Y19的拮抗病原及促生效果并无明显的影响，接种后的第40天，仍能在玉米的根围土壤、根、茎及叶组织中检测到标记菌株；激光共聚焦显微镜观察结果显示，接菌后的第9天，即可观察到其在玉米根、茎及叶部组织的定殖，表明Y19在玉米体内具有

3、良好的运输传导性能。关键词：玉米；解淀粉芽孢杆菌；绿色荧光蛋白；质粒；遗传转化中图分类号：S513．035文献标识码：AGFP——taggingandColonizationEffectofanEndophityicBacterialStrainY19inMaizeJIANGXiao-ling一，HEPeng-fei，WANGYa—ling，GUOLi—wei，WUYi—xin，YANGJing．HEYue—qiu·(1．FacultyofPlantProtection，YunnanAgriculturalUnive

4、rsity,Kunming650201；2．NationalandLocalJointEngineeringResearchCenterforScreeningandApplicationofMicrobialStrains，Kunming650207；3．FacultyofAgronomyandBiotechnology,Kunming650201，China)Abstract：BacillusamyloliquefaciensstrainY19isolatedfrommaizeseedhasthecapacity

5、topromoteplantgrowthandcontroldisease．Toinvestigateitscolonizationintomaizetissuesandrhizosphere，ataggedstrainY19一GFPmut3awithgoodfluorescencewasobtainedthroughtransformationofpHAPIIintoY19bynaturalcompetence．Theintroductionofexogenousplasmidhasnosignificanteff

6、ectontheantagonismandplantgrowth——promotionofY19，accordingtotheplateantagonisticbioassayandmaizepotexperimentinthegreenhouse．In40daysafterinoc—ulation(DAI)，thegYp—taggedstrainstillcouldbedetectedinrhizosphericsoil，roots，stemsandleavestissuesofmaize，meanwhileits

7、colonizationintoroots，stemsandleaveswasobservedat9DAIbyconfocallaserscanningmi—croscope．TheseindicatedthatY19ownsagoodtransduetioninhostplant．Keywords：Maize；Maizeendophyticbacteria；Greenfluorescentprotein；Plasmid；Genetictransformation植物内生细菌的发现可追溯至19世纪7O年代，它是一类生

8、活于植物组织内对寄主的生长发收稿日期：2014—08—21育无持续性伤害的细菌。内生细菌除了在植物营基金项目：云南省玉米产业体系项目养、污染物降解、胁迫防御反应等方面发挥着重要的作者简介：蒋晓玲(1988一)，女，新疆阿勒泰人，硕士，主要从事植物作用外，还能促进植物生长、防控病害。越来病害生物防治研究。E—mail：850273778@qq．c