影响蜂胶提取黄酮的工艺筛选

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1、万方数据2009年第11期蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)影响蜂胶提何腾飞1，林德祥1，(1．南京老山药业股份有限公司，江苏南京取黄酮的工艺箅选王晓平：，邵飞2，张伟2，陆燕2211800；2．江苏省蜂业工程技术研究中心，江苏南京211800)摘要：采用正交实验提取粗蜂胶中的有效成分，结果表明最佳提取条件为：将95名的乙醇与粗蜂胶按体积比4：1的配比进行回流24h，提取温度85cc，过滤后水浴蒸去乙醇，可提高蜂胶的总黄酮含量。关键词：蜂胶；总黄酮；提取；工艺中图分类号：$896．3文献标识码：A文

2、章编号：1003—9139(2009)10—0016—02蜂胶是蜜蜂从植物芽苞和树干处采集的树胶．并混入蜜蜂上颚腺分泌物和蜂蜡等加T而成的一种具有芳香气味的胶状同体物。其中含50％一55％的树脂，30％～40％的蜂蜡，5％～10％的花粉，还有烷基酸油、油脂、氨基酸、有机酸、铁、铜、锰、锌、植物杀菌素、酶等物质。研究表明㈣，黄酮类物质是蜂胶中的主要生理活性物质，它具有增强人体免疫功能、调节血糖、抗菌、抑制病毒等功效。本实验采用粗蜂胶为原料，提取有效成分，以获得一套合理的提取工艺，为开发蜂胶深加工产品提供依据。1材料和方法1．

3、1仪器电热恒温水浴锅(上海跃进医疗器材厂)；SHZ—D(III)循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂)；DZF一6050型真空干燥箱(上海精密实验设备有限公司)。1．2材料粗蜂胶(批号：20070912，杭州桐庐保健品有限公司提供)，95％乙醇(食用级)．纯化水，乙醇、硝酸铝、醋酸钾均为分析纯。槲皮素对照品(中国药品生物制品检验所)。1．3方法1．3．1槲皮素对照品标准曲线的制备精密称取槲皮素对照品(在120℃减压干燥至恒重)约10nag，置50mL容量瓶中，加75％乙醇70mL，使溶解。并稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含

4、无水槲皮素0．2me)。精密量取槲皮素对照品溶液0．4、0．6、0．8、1．0、1．2、1．4mL，分别置于25mL容量瓶中，各加l％硝酸铝溶液1mL。加1moL／mL醋酸钾溶液lmL。用75％收稿日期：2009一07—13乙醇稀释至刻度，摇匀，室温放置40min。以75％乙醇为空白，同样处理，照紫外一可见分光光度法15l，在415nm波长处测定吸收度．以浓度为纵坐标。吸收度为横坐标，计算回归；b-程。1．3．2样品的制备与测定取样品5g混合均匀，精密称取0．25g粉末置250mL烧杯中，第一次加乙醇15mL使成混悬状，静

5、置4h后上清液过滤，第二次加乙醇10mL使成混悬状，静置2h后上清液过滤，沉淀物加乙醇5mL，摇匀过滤，烧杯用乙醇洗涤2次。每次5mL洗涤液过滤，残渣用乙醇洗涤2次，每次5mL。滤液合并，定容至50mL。精密移取0．5mL样品液置于25mL容量瓶中，余步骤自“各加l％硝酸铝溶液lmL，加lmoI／mL醋酸钾溶液lmL⋯”同，在415nm的波长处测定吸收度。1．3．3蜂胶液乙醇提取条件的正交试验为全面考察蜂胶液乙醇提取工艺的条件I一，设计四种因素三个水平的正交试验，通过对蜂胶提取过程中的乙醇用量、乙醇浓度、提取温度、提取时间

6、四因素的考察，研究提取工艺的最佳因素，试验方案见表l、表2。表1因素水平表实验方法称取100g粗蜂胶，加12倍量的纯化水，缓慢加热至近微沸时停止，冷却后将上层析f}{的蜂蜡除去。下层溶液过200目滤布。滤出的粗蜂胶一晾干。按照同样的方法分别将9份100g的粗蜂胶除蜡后，将蜂蜡溶于正交试验条件下相应浓度和体积的乙醇中，5h后过400目滤布，留滤液。分别将除蜡后的粗蜂胶加入到滤液中，然后根据正交实验条件下相应水浴温度及提取时间内进行回流提取。提取液经沸水浴蒸去乙醇、烘箱千燥、冰箱冷冻后形成固体蜂胶。按槲皮索的标准曲线法测定总黄

7、酮的含量。结果见表2、表3。16万方数据17蜜蜂杂志‘月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO．112009Nov．表2正交实验表和实验结果及直观分析ABCD总黄酮含量，％只惦I2．2)-19‰“2．2)=992结果与分析由表2可见，粗蜂胶用4倍量95％的乙醇于85。C条件下同流提取24h后，总黄酮的提取率最高。故黄酮的最佳提取条件为A：B，C，D：。从表2中还可看出，因素C极差最大，为主要因素；因素B、A的极差较次；因素D的极差最小。所以，因素的主次顺序为c>B>A>D。南表3可见，因素C的P

8、胶总黄酮的提取率具有显著影响。3结论1)乙醇具有无毒性、无不良气昧、价格便宜，来源广和提取完成后可以从提取物巾除尽，及乙醇回收率高等优点，故本实验选取乙醇作为提取溶剂。2)提取总黄酮之前需将粗蜂胶置于水中加热后放冷．此方法可减少粗蜂胶巾的蜂蜡，降低了蜂蜡对总黄酮含量测定的影响。3)本实验确定了粗蜂胶提取