ⅰ型胶原蛋白在云母表面自组装的afm研究

《ⅰ型胶原蛋白在云母表面自组装的afm研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com第14卷第2期：35生物技术V01．14，No．2：3520o4年4月BI(CHN0L0GYApr．2004良好，但很难长满整个培养孑L(如图1)，可能是小鼠的乳腺组细胞及时转移，又可以使未消化下来的细胞得到充分消化。织少，在消化过程中又损失了一部分，所以存活得少。结果发现，第一次消化下来的细胞数量很少，且大部分为成纤4．在组织块消化过程中，在PBS中加葡萄糖，用它稀释胶维细胞；第三次消化下来的细胞有点消化过度，也不易成活。原酶，然后消化细胞，可以有

2、效地抑制成纤维细胞。机制不十只有第二阶段消化的细胞不但数量多，且易成活。分清楚。可能是在消化过程中葡萄糖不断给乳腺上皮细胞补6．在乳腺细胞的培养基中，考虑到孕兔的血清中含许多充能量，使免于饥饿状态，导致成活率增高，所以占优势所致。激素和促生长因子，可能更有利于细胞生长，因此用孕兔血清5．实验采用了分阶段消化，这样既可以使已消化下来的代替胎牛血清进行培养。结果发现，采用孕兔血清和胎牛血清培养的乳腺细胞其生长情况没有太大差别(如图2、3)。参考文献：7．参照一些文献，在细胞培养过程中也对培养基添加了一

3、[1]MasamiYoshimumandTakamiOka．Transfection0f口一caseinchimericgoneandhormonalinduction0fitsexpressioninprimarymllrinemammaryepithelial些其它成分，如转铁蛋白、催乳素和皮质醇。事实证明没有明显作用(图4)。cells[J]．Biochemistry，1990，87(10)：3670—3674．8．在长成的上皮细胞表面总有很多的脂肪滴，可能是分离[2]WilmutI，AES

4、chnieke，JMcwhir，eta／．Viableofspringderiverfrttnfetalandadultmammaliancell[J]．Nature，1997，385(6619)：810—813．得不太彻底造成。[3]李震，林爱星，陈永福，等．牛乳腺细胞系BME—L1口一酪蛋白自分总之，原代乳腺上皮细胞的培养受多种因素影响，包括动泌的诱导及人促红细胞生成索(hErO)表达[J]．农业生物技术学报，物本身，如动物种类、动物个体差异、动物所处的不同时期，另1999，7(t)：69—7

5、2．外还包括实验方法，如消化液成分、培养液成分等。本文采用[4]BarashI，FaemumA，RichensteiuM，eta／．Invivoandinvitroexpressionof胶原酶分阶段消化法培养乳腺细胞，在我们的实验范围内，得humanserumalbumingonomicsequence~inn1arn】mar了epithelialcellswithp—出的最佳培养方法是：取分娩后4—5d的新西兰大白兔和分娩lactoblobuminandwheyacidicproteinpro

6、moters[J]．MolRep,'odDev，1999，52前1—2d的昆明小白鼠的乳腺组织，用含葡萄糖的PBS稀释胶(3)：241—252．原酶作消化液，分三个阶段消化，选择第二个阶段消化下来的[5]AGPantschenko，JWoodcock—Mitchell，SLBushmich，eta／．Establislament乳腺细胞，在基本培养液(含MEM、M199、胎牛血清、双抗和谷氨andchm'actefizationofacaprinenImryepithelialcellline(C

7、MEC)[J]．hIVitroCel1．Dev．Bio．一Anima1．2000，36(6)：351—356．酰胺)中添加10ng／ml的表皮生长因子和5fI1l的胰岛素对细[6]张振龙．动物乳腺生物反应器的研究进展[J]．微生物学免疫学进胞进行培养，可以使上皮细胞得到富集。当然，目前原代乳腺展．2000，28(4)：85—89．细胞的培养方法还不十分成熟，需要进一步的摸索和尝试，以[7]杨国庆．牛BLG基因5调控成分的克隆和用以制备乳腺生物反应器便为其在用动物克隆技术制备乳腺生物反应器中的广泛应

8、用的研究[J]．中国农业大学博士论文，1995．奠定基础[8]鄂征．组织培养和分子细胞学技术[M]．第1版．北京出版社，1995．工型胶原蛋白在云母表面自组装的AFM研究何晓青，蔡继业，赵涛，王小燕，梁志红(广州暨南大学生命科学技术学院化学系，广东广州510632)摘要：目的：利用原子力显微镜(AFM)观察不同浓度、pH值的I型胶原溶液在云母表面的自组装情况，从而研究样品浓度和酸度对胶原蛋白自组装的影响。方法：配制0．8fI1l、8vg／ml、0．5ms／ml、1．0mg／ml、4