园艺植物生物技术

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1、园艺植物生物技术1.限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：平末端和黏性末端。2.在遗传转化的表达载体中通常构建有一些筛选基因或报告基因，如果实验很成功，且检测方法正确，则下列基因的作用效果应呈现的颜色分别是：LacZ基因重组子白色菌斑；GUS呈蓝色；GFP呈绿色。3.DNA复制时，新合成链的延伸方向是从5’到3’。4.植物遗传转化的主要方法是农杆菌介导法和基因枪法。5.种植转基因作物面积最大的4个国家分别是美国、阿根廷、加拿大和中国。6.根据作用方式及功能不同，启动子可分成组成型启动子、组织特异型启动子

2、和诱导型启动子等3种类型。7.植物DNA的提取方法主要有两种：CTAB法和SDS法；DNA含量和纯度分析方法也主要有两种：紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法。8.目前常用的两种Ti质粒基因转化载体系统是共整合载体系统和双元载体系统。填空1园艺植物生物技术的核心是基因工程2基于Southern杂交的分子标记：RFLP标记3常用的选择标记基因：NPTII基因4在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指：II类限制酶5外源基因表达蛋白的检测方法有：Western杂交6下列不属于现代生物技术研究的内容有有性杂交简答题1.简

3、述目前园艺植物生物技术的主要研究内容。答：在园艺植物中主要是细胞工程和基因工程。具体包括：组织培养、原生质体融合、病毒脱除、分子标记、基因克隆和遗传转化等。2.简述PCR反应体系的主要成分和反应程序的关键步骤。答：模板DNA、Mg2+、Taq酶、引物、Buffer、无菌去离子水。变性、退火、延伸。3.Ti质粒由哪几个区域构成？各区域的功能是什么？答：（1）T-DNA区可以将其携带的外源基因整合到植物基因组中；（2）Vir区调控T-DNA的加工和转移；（3）Con区调控Ti质粒在农杆菌之间的转移；（4）Ori区

4、调控Ti质粒的自我复制4.列举基因工程中常用的工具酶有哪些？答：常用的工具酶①限制性核酸内切酶：是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶。②DNA连接酶：将两段DNA分子拼接起来的酶。③DNA聚合酶：催化单核苷酸链延伸。④逆转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶，产物DNA又称互补DNA。⑤末端脱氧核糖核酸转移酶：将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端。⑥碱性磷酸酶：催化去除DNA、RNA等的5磷酸基团。⑦依赖DNA的RNA聚合酶：识别特异性启动子，

5、RNA转录。5.植物遗传转化的方法有哪些？答：载体转化（根癌农杆菌Ti质粒介导基因转化、发根农杆菌Ri质粒介导基因转化、植物病毒载体介导基因转化）；直接转化（基因枪法、PEG法、电激法、显微注射转化法、超声波转化法、激光微束穿刺法、脂质体介导法等）、种质系统介导转化（花粉管通道法、生殖细胞浸泡法、子房注射法等）论述1.通过对园艺植物生物技术的学习，谈谈生物技术在园艺科学中的应用与展望。答：（1）细胞工程应用良种快繁（脱毒）、种质创新（花药培养获得单倍体，胚乳培养获得三倍体，离体诱变获得突变体，原生质体融合）、

6、种质保存、有用物质生产；（2）基因工程应用获得抗病虫材料、获得抗除草剂材料、延迟果实成熟、获得抗逆境材料、获得独特材料；（3）分子标记应用生物多样性和亲缘关系研究、数量性状多重效应、环境因素的影响、对育种材料的分析评价、亲本的选择选配、选育种材料的检测与早期鉴定等，均可利用分子标记技术开展研究。2.试述遗传标记的主要类型遗传标记（GeneticMarkers）是基因型特殊的易于识别的表现形式。它一般具有较强的多态性、表现的共显性、不影响重要的农艺性状和经济方便、易于观察记载等优点。在遗传学的建立和发展过程中起

7、着重要作用。从遗传学的建立到现在，遗传标记的发展主要经历了4个阶段，表现出了4种类型。⑴、形态标记（MorphologicalMarkers）形态标记是指生物的外部特征特性。包括质量性状作遗传标记和数量性状作遗传标记，例如人的肤色、作物的株高、种子的粒形和动物的体重等。它是最早被使用和研究的一类遗传标记。在遗传的分离规律、自由组合定律和连锁交换定律以及群体遗传学和数量遗传学的研究和应用等方面发挥着重要作用。形态学标记研究物种是基于个体性状描述，得到的结论往往不够完善，需生物统计学知识进行严密的分析。⑵、细胞标

8、记（CytologicalMarkers）细胞标记主要指染色体组型和带型。染色体组型是指生物体细胞所有可测定的染色体特征总称。包括染色体总数、染色体组数、每条染色体大小和形态、着丝点的位置等。它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。对鉴别真假杂种、对研究染色体结构和数目的变异、物种起源和生物的遗传进化等具有重要价值。⑶、生化标记（BiochemicalMarkers）生化标记是指生物