园艺植物生物技术

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1、《园艺植物生物技术》课程论文题目：果树转基因研究方法与进展姓名：柳忆学院：经济与管理学院专业：国际经济与贸易（大类）班级：国经1006班学号：20115829指导教师：张梁2011年5月28日果树转基因方法研究进展【摘要】本文综述了近年来植物基因转化的方法、主要影响因素、各种方法在实际应用中的局限性及其解决办法和在果树转基因技术的展望。植物基因转化方法包括农杆菌介导法和直接转化法。果树基因转化研究已在10余个树种中取得成功，其中大多数采用农杆菌介导转化法。【Abstract】Thispaperreviewedrecentplant

2、genetransformationmethod,themaininfluencefactors,variousmethodsinpracticalapplicationsolutionandthelimitationsandprospectoftransgenictechniqueinfruit.Plantgenetransformationmethodsincludingagrobacterium-mediatedtechniqueanddirectvariations.Fruittreesgenetransformation

3、in10specieshasbeensuccessfulin,mostofwhichadoptsagrobacterium-mediatedvariations.【关键字】果树转基因方法因素发展引言分子生物学的迅猛发展,有力地促进了植物科学研究的不断深入.人们从分子水平对生物学和遗传学有了深刻的认知,与组织培养技术相结合,分子生物学技术已开始应用于植物基因组的修饰和改变.由于基因编码的同一性,任何有机体内的有用基因都可转入到植物体.外源基因(如抗虫或抗病基因等)的导入,导致了新的基因型的出现或基因型改良的实现,从而为植物的遗传育种

4、开辟了广阔前景.一转基因技术的发展概况继1983年人类首次获得烟草和马铃薯的转基因植株之后，1988年McGrananhan等〔1〕获得了首例转基因果树—具‘US基因的核桃，1990年他们获得了具抗虫基因的核桃。在人们利用基因枪法获得大田作物转基因之后3年，基因枪法即在番木瓜上得到成功应用［2］。1994年Kalinski统计了转基因植物的专利，计有巧种植物，苹果也名列其中。国内研究者十分重视转基因研究。黄学森等〔3〕发表了葡萄的遗传转化;程家胜等〔4〕介绍了苹果基因转移技术;随后将Bt基因导人‘绿袖’及‘金矮生’苹果中获得了转基

5、因苹果苗[5j;傅润民等较系统地介绍了基因工程及其在果树上的应用[6，7〕;中国热带农科院热带作物生物技术国家重点实验室在番木瓜转基因上开展了工作〔8~11〕;中国农科院柑桔所和华南农业大学开展了抗菌肤基因导人柑桔的研究〔12,13〕;沈阳农业大学获得了苹果主栽品种‘新乔纳金’的转基因植株〔14~16〕;福建农业大学开展了龙眼〔17〕、西番莲〔18〕和批把等亚热带果树的遗传转化和转基因研究;华中农业大学等在方法学上促进了果树基因工程的进展〔19，20〕。开展转基因或遗传转化的还有不少单位〔21~24〕。果树的转基因研究已成为一个热

6、点。作者试就迄今果树转基因文献综述于后，也就一些问题提出看法，失当之处欢迎批评指正。二植物基因转化的方法1.1农杆菌介导的基因转化法目前已探讨的各种基因转化方法中，农杆菌基因转化法是研究最清楚的一种〔25〕。这种方法是利用自然界的天然遗传工程体系即根癌农杆菌(Agrobacteriumtum代f玫ciens)和发根农杆菌(Agrobacteriumrh挽ogl’ne:)的发病过程，将人为加工的基因转人植物细胞。根癌农杆菌侵染植物引起冠瘦瘤(Crowngall)。冠瘦瘤有两种状态〔26〕，一是无组织的肿瘤，在无激素培养基上不断增殖，

7、但无顶端优势且难以生根，与冠瘦瘤诱导有关的质粒为Ti质粒(Tum。:inducingplas-mid)。发根农杆菌侵染植物可在感染部位产生众多的发状根(Hairyroots)，与此有关的是Ri质粒(Rootinducingplasmid)。只有能够被农杆菌感染的植物才可以利用农杆菌作为基因载体。农杆菌的主要侵染对象是双子叶值物，单子叶植物对这两种病菌一般不太敏感，但最近也有不少感染致病的例子，裸子植物也可以进行人工接种感染致病。目前常用的农杆菌转化方法有3种〔25〕：(1)直接感染植物伤口:将新萌发的种子、幼胚、子叶或茎段用刀切出

8、一个伤口，接上过夜培养的农杆菌，然后在无激素的培养基上培养肿瘤组织。此方法实验周期短，但肿瘤组织中常有未转化细胞，易形成嵌合体。(2)叶盘转化法:在幼嫩新鲜的叶片上用打孔器取下直径为3一smm的叶盘，在过夜培养的农杆菌菌液中浸数秒后，转移到培养基上