云南野生兰属主要种间亲缘关系的aflp分析

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1、万方数据园艺学报2006，33(5)：1141—1144Act8HortieulturaeSinica云南野生兰属主要种间亲缘关系的AFLP分析张俊祥1李枝林2范成明1程少丽1赵明富1何月秋¨(1云南农业大学植物保护学院，云南昆明650201；2云南农业大学园林园艺学院，云南昆明650201)摘要：采用AFLP技术对云南省兰属的14个种和3个变种中的38份样本进行了亲缘关系分析。16对AFLP引物扩增的条带聚类结果表明，云南省国兰遗传多样性非常广泛，相同品种间的不同个体扩增出的条带模式相差很大。依据AFLP数据，在相似系数0．58的水平下

2、，38个兰花样品分成3组：莲瓣兰、春剑、惠兰、寒兰分为第1组，建兰、豆瓣兰、春兰，墨兰、虎头兰、西藏虎头兰、大雪兰、碧玉兰、文山红柱兰、长叶兰和兔耳兰分为第2组，送春和蜜蜂兰分为第3组。关键词：兰属；AFLP；遗传多样性；亲缘关系中图分类号：S682．31文献标识码：A文章编号：0513．353X(2006)05—1141-04PhylogeneticsAnalysisoftheChineseOrchidsinYunnanProvinceUsingAFLPTechniqueZhangJunxian91，LiZhilin2，FanCheng

3、min91，ChengShaolil，ZhaoMingful，andHeYueqiul’(1CollegeofPlantProtection，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming，Yunnan650201，China；2CollegeofGardeningandHorticulture，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming，Yunnan650201，China)Abstract：Thirty—eightcollectionsofChineseorchidsinYunn

4、anProvince，China，including14speciesand3varieties，wereanalyzedphylogeneticallyusingAFLPtechnique．PCRamplificationbandpatternwith16pairsofprimersindicatedthattheChineseorchidswereverydiverse，andindividualsofthesamespecieshaddifferentbandpatterns．SubgenusJensoaappearedasapar

5、aphyleticgroup．SubgenusCyperorchiswasnotamonophyleticgroupinsteadformedanoffshootofsubgenusJensoa．Atasimilaritycoefficientof0．58，theorchidscouldbeclusteredinto3groups：CybidiumtortisepalumWuetChen，C．tortisepalumvar．10ngi—bracteatum，C．faberiandC．kancanbelongedtoGroup1；C．e．,

6、ifolium，C．goeringiivar．serratum，C．goeringii，C．sinense，C．hookerianum，C．tracyanum，C．mastersii，C．10wianum，C．wenshanense，C．erythraeumandC．1ancifoliumtoGroup2；C．cyperifoliumvar．szechuanicumandC．pumilumtoGroup3．Keywords：Cybidium；AFLP；Geneticdiversity；Phylogeneticrelationship1目的

7、、材料与方法本研究以云南野生兰花为材料进行AFLP分析，旨在揭示其主要种间亲缘关系，为其育种和系统发育研究提供理论依据。38个供试样品包括14个种和3个变种(表2)，引种栽培于云南农业大学园林园艺学院温室兰花圃中。DNA的提取采用CTAB法。AFLP分析采用Vos等⋯建立的方法。利用MseI和EcoRI酶切组合进行基因组限制性酶切。所用的接头和引物见表1(上海生工)。针对MseI和EcoRI酶的接头，共用16对引物进行选择性扩增。扩增后采用4％聚丙烯酰胺凝胶和Bio．Rad电泳设备，在80W下电泳1．5—2．0h，银染后于灯光下计数扩增的

8、条带，并构成0和1数据矩阵表。用UPGMA方法进行聚类分析，采用Percentdisagreement方法得到聚类分析图。收稿日期：2005—11—18；修回日期：2006—05—29基金项目