妊娠期全氟辛酸染毒致子代雄鼠生殖毒性及枸杞多糖缓解作用的研究

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1、硕士学位（毕业）论文妊娠期全氟辛酸染毒致子代雄鼠生殖毒性及枸杞多糖缓解作用的研究学位申请人：宋鹏琰指导教师：钟秀会教授王晓丹副教授学科专业：临床兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一八年五月二十五日分类号：S853.74单位代码：10086密级：公开学号：20152200408妊娠期全氟辛酸染毒致子代雄鼠生殖毒性及枸杞多糖缓解作用的研究AmeliorationofPFOAinUteroExposureInducedReproductiveToxicityinMaleOffsp

2、ringMicebyLyciumBarbarumPolysaccharide学位申请人：宋鹏琰指导教师：钟秀会教授王晓丹副教授学科专业：临床兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一八年五月二十五日摘要全氟辛酸（Perfluorooctanoicacid，PFOA）作为一种新型持久性有机污染物（Persistentorganicpollutants，POPs），可在生物体内蓄积，严重影响动物和人体健康，尤其对处于妊娠敏感时期的母体和幼龄动物危害严重。枸杞多糖（Lycuimbarb

3、arumpolysaccharides，LBP）为补肾中药-枸杞子的一种生物活性成分，不仅具有强抗氧化能力，还能够保护动物生殖。本研究通过构建妊娠期PFOA染毒母鼠，来探讨PFOA对其所产雄性仔鼠的生殖毒性，以及LBP的缓解作用。在PFOA染毒孕鼠所致子代雄鼠生殖毒性的研究中，将孕0d母鼠随机分为5组，每组10只。妊娠1-17d，空白组每天饲喂正常日粮；其余4组每天分别饲喂添加1、2.5、5和12.5mg/kg剂量的PFOA染毒饲料。试验期间，每天记录母鼠体重并统计产仔情况、仔鼠存活状况。分别在仔鼠

4、21和70日龄时，各组随机选取10只雄仔鼠，称重采血后处死。摘取睾丸，一侧用Bouin氏液固定，用于制备病理组织切片，进行HE染色观察；另一侧放入-80℃冻存备用，进行RT-PCR检测。结果显示，2.5、5和12.5mg/kgPFOA能够导致孕鼠体重增重下降并可降低仔鼠存活数。PFOA各组可致使子代雄鼠睾丸组织有不同程度的损伤并呈剂量依赖性，且70日龄较21日龄有所减弱；还能降低血清睾酮水平，并引发21日龄睾丸组织Dlk1-Dio3印记基因簇内Gtl2、Rian和Dio3基因mRNA的紊乱表达。在L

5、BP对PFOA染毒孕鼠所致子代雄鼠生殖毒性缓解作用的研究中，将孕0d母鼠随机分为6组，每组10只。妊娠1-17d，空白组每天饲喂正常日粮，模型组每天饲喂2.5mg/kgPFOA染毒饲料，均灌服生理盐水（0.2mL/只）；其余4组为LBP保护组，每天饲喂2.5mg/kgPFOA染毒饲料，并分别灌服20、40、80和100mg/kgLBP（0.2mL/只）。21日龄时，同上述方法采集样本进行检测。结果显示，怀孕母鼠经LBP保护后，与模型组相比，PFOA造成雄仔鼠睾丸组织病理损伤逐渐减轻，80mg/kgL

6、BP组能极显著性升高子代雄鼠血清睾酮水平，并能通过降低MDA含量、提高SOD和GSH-Px活力来减轻PFOA所诱导的子代雄鼠睾丸组织氧化损伤，80和100mg/kgLBP组能够显著或极显著上调Dlk1-Dio3印记基因簇内Gtl2、Rian和Dio3基因mRNA的表达量，起到抑制PFOA导致该印记基因簇中mRNA紊乱表达的作用。综上所述，妊娠期PFOA染毒能够分别从个体水平、组织病理水平、激素水平、氧化损伤水平及印记基因水平5个方面对子代雄性小鼠产生生殖毒性，表现为降低仔鼠存活数，造成睾丸组织病理损

7、伤和氧化损伤，降低血清睾酮水平，诱发Dlk1-Dio3印记基因簇mRNA的紊乱表达，且随仔鼠的生长发育PFOA引起的损伤有一定的减弱。LBP能够在一定程度上有效缓解妊娠期期母鼠染毒PFOA所致子代雄鼠的生殖毒性作用，且80mg/kgLBP效果最佳。关键词：全氟辛酸；枸杞多糖；睾丸；生殖毒性；Dlk1-Dio3印记基因簇AmeliorationofPFOAinUteroExposureInducedReproductiveToxicityinMaleOffspringMicebyLyciumBarba

8、rumPolysaccharideAuthor:SongPengyanAdvisors:Prof.ZhongXiuhuiProf.WangXiaodanMajor:ClinicalVeterinaryMedicineAbstractAsanewtypeofpersistentorganicpollutants(POPs),Perfluorooctanoicacid(PFOA)canaccumulateinthelivingorganismsseriouslyaffec