枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究

枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究

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1、《中国图书资料分类法》分类号:R243单位代码:10660学号:S100088贵阳医学院2013届硕士学位论文枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究研究生:张宇杰导师:杨国珍教授张小蕾教授年级:2010级专业:临床检验诊断学年月日目录摘要……………………………………1前言……………………………………3材料与方法………………………………5-8结果……………………………………9-17讨论……………………………………18-22参考文献…………………………………23-24英文摘要…………………………………25-26致谢……………………………………27略缩词表…………

2、………………………28论文原创性声明…………………………29附:综述………………………………30-33贵阳医学院2013届硕士研究生论文枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究专业:临床检验诊断学研究生:张宇杰导师:杨国珍、张小蕾教授中文摘要目的:观察枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠的生殖毒性作用的拮抗作用,初步探讨枸杞多糖对丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的拮抗机制。方法:健康雄性昆明种小鼠60只,随机分为5组,每组12只,分为正常组:生理盐水;模型组:丙烯酰胺100mg/(kg.d);高剂量拮抗组:丙烯酰胺100mg/(kg.d)+枸杞多糖(200mg/kg.d);

3、中剂量拮抗组:丙烯酰胺100mg/(kg.d)+枸杞多糖(100mg/kg.d);低剂量拮抗组:丙烯酰胺100mg/(kg.d)+枸杞多糖(50mg/kg.d)。丙烯酰胺染毒、枸杞多糖给药采用灌胃方式。正常组给予等体积生理盐水灌胃。给药连续28天。给药结束后,禁食24小时,摘除小鼠眼球取血,处死小鼠。1.称重小鼠附睾、睾丸,计算附睾、睾丸脏器系数2.显微镜计数小鼠精子畸形率。3,电化学发光法测定小鼠血清中血清睾酮(T)。4.吸光光度计测定并计算小鼠睾丸组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。5.检查小鼠睾丸组织病理学改变情况。6.免疫组织化学法检测凋亡相关蛋

4、白Bax和Bcl-2蛋白表达。7.原位杂交检测小鼠睾丸组织端粒酶蛋白表达。8.TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况。结果:1模型组染毒结束后与正常组比较:附睾、睾丸脏器系数降低,精子计数减少、活动率降低、精子畸形率增高,差异有统计学意义(P<0.01);睾酮水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);睾丸中SOD活性降低、MDA含量增高,差异有统计学意义(P<0.01);出现睾丸病理学改变;凋亡相关蛋白Bax表达增高、Bcl-2表达降低、睾丸细胞凋亡增高、端粒酶表达降低,差异有统计学差异(P<0.01);3拮抗组剂量拮抗组与模型组比较,附睾、睾丸脏器系数增高;精子计数、活动率无

5、差异,精子畸形率降低;睾酮水平增高,(但低剂量拮抗组无统计学意义);睾丸中SOD活性增高、MDA含量降低;睾丸细胞凋亡阳性数目降低,凋亡相关蛋白Bax表达降低(但低剂量拮抗组无统计学意义)、Bcl-2表达增高;睾丸病理检查损伤积分降低;端粒酶表达升高(但低剂量拮抗组无统计学意义)。结论:1进一步证实了丙烯酰胺对于雄性小鼠的生殖毒性。2丙烯1贵阳医学院2013届硕士研究生论文酰胺致雄性小鼠生殖毒性的作用机制可能为:引起睾丸组织氧化损伤;诱导睾丸组织细胞发生了显著的诱导性凋亡。3枸杞多糖具有拮抗丙烯酰胺致雄性小鼠生殖毒性的作用,其中高剂量组效果最为明显。4枸杞多糖拮抗丙烯酰胺致

6、雄性小鼠生殖毒性的可能机制为:抗氧化作用降低睾丸组织氧化损伤,调控BAX、BCL-2蛋白及端粒酶的表达,阻断凋亡途径,抑制生精细胞发生凋亡。关键词:丙烯酰胺生殖毒性枸杞多糖2贵阳医学院2013届硕士研究生论文前言近年来,大量研究资料表明,随着工业化的发展,环境中越来越多的物质干[1]扰人类的生殖系统。男性精子质量近二十年来迅速下降。丙烯酰胺(acrylamide,AA)是一种白色结晶固体化学物质,可溶于水、乙醚、丙酮、乙醇、氯仿,无气味。丙烯酰胺常被用于生产工业重要原料聚丙烯酰胺。丙烯酰胺在工业中广泛用于纺织业、塑胶业、作为絮凝剂加入水中去除杂质、木浆加工后用于造纸行业及管

7、道壁的内涂层、加入化妆品和肥皂中作为增稠剂等。大量男性嗜好烟草,而在烟草燃烧过程中也会生成丙烯酰胺,造成丙烯酰胺进入吸烟者和被动吸烟者体中[4]。丙烯酰胺摄入途径广泛,具有的毒性,现在得到了一定的关注。大量的研究资料报告,丙烯酰胺可以通过呼吸道、皮肤黏膜接触、消化道等多种途径进入体内。丙烯酰胺具有神经毒性,可以引起人神经损害,特别是周围[5]神经损害。有研究发现,丙烯酰胺可导致小鼠生殖细胞基因突变与染色体异常,[6]对丙烯酰胺遗传毒性和生殖毒性损伤有重要意义。有学者报道,丙烯酰胺的遗[7]传毒性主要来自于丙烯酰胺对

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