枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究

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1、贵阳医学院2012届硕士研究生论文枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究专业：临床检验诊断学研究生：孙晶导师：杨国珍教授摘要目的：观察甲醛对雄性小鼠的生殖毒性作用，初步探讨枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用。方法：健康雄性昆明种小鼠96只，随机分为8组，甲醛低、中、高（0.2、2.0、20mg/(kg.d)）剂量组，枸杞多糖低、中、高（50、100、200mg/(kg.d)）剂量拮抗组，阳性对照组（环磷酰胺(50mg/(kg.d))）和阴性对照组（生理盐水）。甲醛染毒组和阴性对照组采用腹腔注射方

2、式，每天1次，连续14d，阳性对照组采用腹腔注射方式，隔天1次，共14d。枸杞多糖拮抗组腹腔注射高剂量甲醛，同时灌胃不同剂量枸杞多糖溶液，每天1次，连续14d。给药结束后，处死小鼠，计算小鼠附睾、睾丸脏器系数，显微镜下计数小鼠精子数量、活动率和畸形率，测定小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量、葡萄糖6磷酸脱氢酶（G-6-PD）和山梨醇脱氢酶（SDH）活力，观察睾丸组织病理学改变，化学发光法检测小鼠血清中睾酮（T）水平，免疫组化技术检测凋亡相关蛋白bax和bcl-2表达，流式细胞术检测睾丸生精细

3、胞凋亡率。结果：甲醛低、中、高剂量染毒组睾丸脏器系数与阴性对照相比，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。精子计数和活动率随甲醛染毒剂量的增加呈下降趋势，精子畸形率呈上升趋势，与阴性对照组相比，甲醛低、中、高剂量染毒组精子计数、活动率和畸形率差异均有统计学意义(P<0.01)；枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。甲醛低、中、高剂量染毒组血清中T含量逐渐降低，与阴性对

4、照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)；枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。睾丸组织SOD随甲醛染毒剂量增加，逐渐下降，甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)；枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义（P<0.05或1贵阳医学院2012届硕士研究生论文P<0.01）。甲醛各染毒组MDA含量逐渐增高，中、高剂量染毒组与阴性对照组相比，差异有统计学意义(P<0.01)；枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲

5、醛高剂量组比较，差异有统计学意义(P<0.01)。睾丸组织G-6-PD、SDH活性随甲醛染毒剂量增大而降低，甲醛低、中、高剂量染毒组G-6-PD、SDH活性与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。甲醛各染毒组bax阳性表达率增高，bcl-2表达下降，枸杞多糖拮抗组bax表达下降，bcl-2表达增高，甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；枸杞多糖低、

6、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。各实验组之间，生精细胞凋亡率均无统计学意义（P>0.05）。甲醛中、高剂量组与阴性对照组比较，睾丸组织病理学有明显改变。枸杞多糖中、高剂量组与阴性对照相比，睾丸组织结构基本一致。结论：1甲醛染毒雄性小鼠具有生殖毒性，表现为：精子数量和质量的变化；睾丸组织病理学变化；睾丸标志酶活性下降；凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达异常；2甲醛致雄性小鼠生殖毒性的机制可能为：引起睾丸组织氧化损伤；影响生殖内分泌功能；3LBP具有拮抗甲醛致雄性小鼠

7、生殖毒性的作用，其机制可能为：抗氧化作用减轻睾丸组织氧化损伤；改善生殖内分泌功能。关键词：甲醛枸杞多糖雄性小鼠生殖毒性拮抗作用氧化损伤2贵阳医学院2012届硕士研究生论文前言随着科学技术的进步和工业化的发展，环境污染严重影响生殖系统功能，男性生殖健康日益受到人们的重视。据统计，60年代因不育就诊的男性只占8%，如今高达40%以上。70年代男女不育症患者的比例为3比7，90年代这一比例已上升到近1比1。有关男性生殖健康的研究表明，男性精液质量在全球范围呈普遍下降趋势。丹麦科学家对15000名男子的精液调查检测表明，精

8、液中的精子密度已经由1940年的1.13亿个/ml下降到1990年的0.66亿个/ml，每次射精的平均精液体[1]积由3.4ml下降到2.7ml。同时精子的质量也在不断的下降，畸形、劣质的精子比例增多，致使男性不育的比例逐年增加。我国科学家的研究结果也表明，男性不育症在近一二十年迅速增加。国家人口和计划生育委员会科学技术研究所曾对1981～1996年间的11