调脂积冲剂对肝纤维化大鼠ha+pcⅲ及pdgf的影响

《调脂积冲剂对肝纤维化大鼠ha+pcⅲ及pdgf的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

万方数据第26誊第9期208年9月中华CHINESEARCHIVES中医药OFTRADITIONAL学刊CHINESEMEDlCINEV01．26No．9Sep．208调脂积冲剂对肝纤维化大鼠HAPCⅢ及PDGF的影响潘智敏1，唐黎群2，王群江2(1．浙江省中医院，浙江杭州310006；2．浙江省人民医院，浙江杭州310006)摘要：目的：采用复合因素建立大鼠肝纤维化模型，通过观察调脂积冲荆对实验大鼠的透明质酸(HA)、III型前胶原(PCⅢ)、血小板衍化生长因子(PDGF)、肝组织病理及部分肝功能生化指标的检测，探讨调脂积冲剂防治肝纤维化的有效性、可靠性，为进一步的研发提供理论依据。方法：将48只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后，随机分成4组，即空白对照组、调脂积组、易善复组、模型对照组。采用ccL合并高脂乳剂及酒精等复合因素建立大鼠肝纤维化模型，以易善复作对照，观察肝功能生化指标谷丙转氨酶(AIT)、谷草转氨酶(AST)，血清HA、PcⅢ的含量及肝组织中PDGF含量及病理的改变。结果：模型组各项指标均高于正常组。调脂积冲剂组可减轻肝损伤和纤维化变性程度，显著降低血清中AIT、AST的含量，降低血清中HA、PCⅢ，减少机体对PDGF的释放。结论：调脂积冲剂防治肝纤维化的作用机制为：降酶、护肝，促进肝功能恢复，降低血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的含量。抑制细胞外间质中的胶原和蛋白多糖的生成，降低血清中HA、PCⅢ的含量。减少炎性介质的释放，降低肝组织中PDGF的产生。减轻肝细胞变性坏死，抑制汇管区和汇管区周围纤维化的形成。关键词：肝纤维化；透明质酸；III型前胶原；血小板衍化生长因子中图分类号：R一33文献标识码：A文章编号：1673—7717(2008)09—192l一03EffectofTiaoZhiJiSolubal013HAPCⅢandPDGFofHepaticFibrosisRatsPANZhi．minl，TANGLi．qun2，WANGQundian92(1．ZhejiangProvincialHospitalofTCM，Hangzhou310006，Zhejiang，China；2．Pcople§HospitalofZhejiangProvince，Hangzhon310006，Zhejiang，China)Abstract：0bjective：Toestablishhepaticfibrosispattembycompositefactor，byobservingthedetectionofTiaoZhiJiSolubal’s(圆)influenceOilHyMuwmcAcid(HA)，ProcollagenTypeⅢ(PCⅢ)，PlateletDerivedGrowthFactor(PDGF)，hepatictissuepathologyand80mcLiverfunctionbiochemicalindicators，investigateutilityandvalidityof17Jinthepreventionofhepaticfibrosisandprovidetheoryforfurtherstudy．Methoda：FortyeightmaleWistarratswe砖dividedintofourgroupsrandomly：thenormalgroup，modelgroup，theEssentialN／EssentialeForteN(ESF)groupandthe团group．Emulsionandcarbontetraehloride(CCl4)wasusedtOinducehepaticfibrosispatteminthemt§liver．ComparedwithESFgroup，detectionthecloseofhepaticfunctionbiochemicalindicator，sucha8alanineaminotrans·ferase(ALT)，aspartatearninotransferase(AST)，andHA，PCIIIandTNF—aandthehistopathologyofliver．Results：Allindexesofthemodelgroup踟higberthanthatfromnormalgroup．TJZdoesdefendtheliverfromtissuedamageandthefatdestruction．ItdoesreducetheindicesofALT。AST，HA，PCIIIobviouslyinse彻n．ItCarlcontrolthereleasethePDGF．Conclusion：Thefunctionmechanismofthe-IZJistOpreventthehepaticfibrosis：①ReducetheindicesofASTandALTin∞Funlandprotecttheliver．②RestrainthegenerationofcollogenandproteoglyeaninectO—interstitium：de-酬etheindicesofPclllandHAinseFIlnl．③Reducethemle鹪eofpMegmonesismediumanddecreasethecombineofPDGF．④Lessenhepaticcelldegenerationandnecrosis，inhibittheformoffibrosisinportalareaandportalaFcaperiph-ery·Keywords：hepaticfibrosis；hexadecenoicacid；precollagenm；plateletderivedgrowthfactor肝纤维化(LF)是各种病因所致的慢性肝病的共同病理过程，是向肝硬化发展的主要中心环节‘11。近年来随着收稿日期：2008一04—18基盒项目：浙江省中医药管理局资助课题(2007CA019)作者简介：潘智敏(1952一)，女，主任医师、教授、硕士研究生导师，主要从事中医内科老年病学研究。细胞生物学、生物化学的深入研究，认为肝纤维化是慢性肝损伤过程中多种细胞密切联系，并通过多种细胞因子，细胞外基质蛋白等相互作用．相互影响组成的网络来调控。其中肝星状细胞(HSC)的激活是核心事件拉-3】。相关研究发现逐渐改变了传统肝纤维化不可逆转的观点，明确提出了肝纤维化完全有可能逆转的观点H】。所以阻断肝纤维化的形成和发展对于防治肝硬化具有重要意义。由缝中医药1921学刊 万方数据第26卷第9期208年9月中华中医药学刊CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEV01．26No．9S叩．2081实验材料实验动物Wistar雄性大鼠，48只，清洁级，体重(150±20)g左右，由浙江中医药大学动物实验中心提供。实验药物调脂积冲剂由浙江省中医院中药制剂室制备。易善复胶囊由Aventis公司提供。主要试剂乳剂构成：胆固醇、三号胆盐、猪油、蔗糖、吐温一80、丙二醇、30。酒精均有浙江华东医药公司提供。谷一丙转氨酶测定试剂、谷一草转氨酶测定试剂均为南京建成生物工程研究所产品。透明质酸测定试剂盒、Ⅲ型前胶原氨端肽测定试剂盒均为北京北方生物技术研究所产品。血小板衍生生长因子测定试剂盒为San．taCruzBiotechnology，Inc．California，America产品o2实验方法2．1动物分组Wistar雄性大鼠镐只，于实验室适应性喂养1周后，随机分成4组，即：正常对照组(12只)，调脂积组(12只)，易善复组(12只)，模型对照组(12只)，以苦味酸标记。2．2计算给药量按照实验动物与人体体表面积比等效剂量换算比例，确定大鼠调脂积冲剂和易善复胶囊的剂量均为临床成人用量的10倍。2．3建立模型与给药每天上午给模型对照组、调脂积组、易善复组每只按lml_／lOOg体重灌服乳剂。正常对照组灌服等量蒸馏水。并每间隔2天给模型对照组、调脂积组、易善复组按每只0．2mL／1009体重腹腔注射25％CCl．油液1次。正常对照组注射等量生理盐水。每天下午按1．5mL／1009体重分别给调脂积组和易善复组分别灌服药物，模型对照组和正常对照组灌服等量蒸馏水，连续8周。并于第8周末末次给药后禁食。2．4观察指标及检测方法除去饲养过程中死亡的大鼠，其余各组大鼠于末次给药后禁食12h，次日上午称大鼠体重后，将大鼠麻醉，于腹主动脉取血，置于离心机以3000r／min离心15min，用移液管吸出分离的血清，置于4。C冰箱中保存。测定时置于室温30min解冻，按试剂盒说明书步骤，～次性检测血清ALT、AST。大鼠取血后，处死，取出肝脏，肝脏称重后，按以下公式计算肝脏系数：肝脏系数=(肝重÷体重)×100％。肝纤指标检测HA、PCⅢ的染色(放射免疫分析法)，按试剂盒操作说明进行。细胞因子的指标测定留取肝组织，检测PDGF的染色，按试剂盒操作说明进行。将10％甲醛溶液固定后的大鼠肝组织，常规石蜡包埋，在病理切片机上连续切片，厚度为31xm。每个标本分别切4张片，于60℃恒温箱里连续烘烤2h，二甲苯脱腊，梯度酒精水化。同一标本随机取2张片予常规HE染色，宠置显微镜下观察大鼠肝细胞变性坏死情况。以6版内科学鬲慢性肝炎分级、分期标准为依据。璧2．5统计学方法采用PEMS3．1软件包进行统计。计量=资料以均数±标准差(即；±s)表示，组间比较用方差分1922析，等级资料采用秩和检验。以P<0．05为差异有显著堂性，P<0．01为差异有极显著性。刊3实验结果肝纤维化大鼠血清肝功能指标变化见表l；肝纤维化大鼠肝脏系数的改变见表2；各组大鼠肝纤维化的指标及细胞因子改变见表3—5及图1。肝脏肉眼观察和组织病理变化的肉眼观察结果示：正常对照组大鼠肝脏色泽均匀，黯红，质软，表面光滑；模型对照组大鼠肝脏体积普遍增大，色泽不均匀，暗黄，质韧，表面欠光滑，略呈颗粒状；调脂积组和易善复组大鼠均可见肝脏色泽均匀，黯红，体积略增大，表面尚光滑。光镜示：正常对照组肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列，肝细胞形态规则，核大而圆，无纤维组织增生。模型对照组肝细胞弥漫变性，以空泡变性和嗜酸性变为主，坏死以小灶性坏死、桥接坏死为主，可见汇管区及周围纤维间隔形成，小叶结构紊乱。调脂积组和易善复组病变较模型组普遍为轻，肝细胞变性以少量空泡变性为主，坏死以点状坏死为主，汇管区及周围有少量纤维组织增生，小叶结构存在。纤维化程度明显轻于模型组。见图2。表1肝纤维化大鼠血清肝功能检查结果(i±s)注：检验水准a=O．05，与正常组比较，AP