SNT2497.5-2010进出口危险化学品安全试验方法睾丸细胞UDS试验.pdf

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２４９７．５—２０１０进出口危险化学品安全试验方法第５部分：睾丸细胞犝犇犛试验犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犱犪狀犵犲狉狅狌狊犮犺犲犿犻犮犪犾狊—犘犪狉狋５：犝狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊（犝犇犛）狋犲狊狋狑犻狋犺狋犲狊狋犻犮犾犲犮犲犾犾狊２０１００３０２发布２０１００９１６实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口危险化学品安全试验方法第５部分：睾丸细胞犝犇犛试验ＳＮ／Ｔ２４９７．５—２０１０中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北

2、街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６印张０．５字数１０千字２０１０年５月第一版２０１０年５月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２０９２５定价１４．００元标准分享网www.bzfxw.com免费下载犛犖／犜２４９７．５—２０１０前言ＳＮ／Ｔ２４９７《进出口危险化学品安全试验方法》系列标准共分为２９部分：———第１部分：体内哺乳动物肝细胞程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验；———第２部分：空斑形成细胞（ＰＦＣ）试验；———第３部分：大型溞

3、繁殖试验；———第４部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验；———第５部分：睾丸细胞ＵＤＳ试验；———第６部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；———第７部分：小鼠耳肿胀试验；———第８部分：腘窝淋巴结试验；———第９部分：血清溶血素测定试验；———第１０部分：Ｔ淋巴细胞增殖功能测定试验；———第１１部分：种系突变试验；———第１２部分：单细胞凝胶电泳分析试验；———第１３部分：荧光原位杂交试验；———第１４部分：ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳试验；———第１５部分：ＰＣＲＳＳＣＰ实验；———第１６部分：ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验；———第１７部分：哺乳动物行为毒理学试

4、验；———第１８部分：ＤＮＡ加合物的检测方法；———第１９部分：ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ实验；———第２０部分：Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定蛋白质含量；———第２１部分：琼脂糖凝胶电泳试验；———第２２部分：ＤＮＡ的Ｔｍ值测定方法；———第２３部分：细胞器的分离实验方法；———第２４部分：细胞免疫功能体外检测方法；———第２５部分：体液免疫功能试验；———第２６部分：巨噬细胞功能试验；———第２７部分：流式细胞术检测凋亡；———第２８部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；———第２９部分：生化需氧量（ＢＯＤ）测定。本部分为ＳＮ／Ｔ２４９７的第５部分。本部分修改采用经济合作与发展组

5、织（ＯＥＣＤ）化学品测试指南ＮＯ．４８６（１９９７）《体内哺乳动物肝细胞程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验》，其有关技术内容与上述方法完全一致，在标准文本格式上按ＧＢ／Ｔ１．１—２０００做了编辑性修改。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局。本部分主要起草人：李学洋、王利兵、陈庆俊、于艳军、赵琢、周磊。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２４９７．５—２０１０进出口危险化学品安全试验方法第５部分：睾丸细胞犝犇犛试验１范围ＳＮ／Ｔ２４９７的本部分规定了进出口危险化

6、学品的睾丸细胞ＵＤＳ试验的术语和定义、试验原理、试验程序和试验结果。本部分适用于进出口危险化学品诱发动物睾丸细胞ＤＮＡ损伤和修复的检测。２术语和定义下列术语和定义适用于本部分。２．１正修复的细胞犮犲犾犾狊犻狀狉犲狆犪犻狉净核银粒（ＮＮＧ）高于本试验室历史性阴性对照值的细胞。２．２净核银粒狀犲狋狀狌犮犾犲犪狉犵狉犪犻狀狊，犖犖犌在放射自显影ＵＤＳ试验中细胞内ＵＤＳ活性的定量测定，计算为核银粒数（ＮＣ）减去等于核面积的细胞质内银粒平均数（ＣＧ），即ＮＮＧ：ＮＣ－ＣＧ。由各细胞计算ＮＮＧ数，再将一个培养物或平行培养物中的细胞ＮＮＧ汇总www.bzfxw.com。２．３程序外犇

7、犖犃合成狌狀狊犮犺犲犱狌犾犲犱犇犖犃狊狔狀狋犺犲狊犻狊，犝犇犛在切除含有由化学物质或物理因素引起损害的一段ＤＮＡ后，进行的ＤＮＡ修复合成。３原理睾丸细胞ＵＤＳ试验是利用哺乳动物作指示生物的体内体细胞遗传毒理学试验，遗传学终点为原发性ＤＮＡ损伤。由于本试验检测整个基因组，敏感度较高，对本试验提供致突变活性的信息缺乏特异性可能有所补偿。哺乳动物睾丸细胞ＵＤＳ试验表明，由化学物质或物理因素诱发ＤＮＡ损伤区经链切除后的ＤＮＡ修复合成。本试验通常用放射自显影检测３ＨＴｄＲ（胸腺嘧啶脱氧核苷）掺入睾丸细胞ＤＮＡ。与液闪计数法比较，放射自显影法对Ｓ期