SNT2094-2008进出口食品中α-硫丹和β-硫丹残留量的检测方法　酶联免疫法.pdf

《SNT2094-2008进出口食品中α-硫丹和β-硫丹残留量的检测方法　酶联免疫法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２０９４—２００８进出口食品中α硫丹和β硫丹残留量的检测方法酶联免疫法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳α犲狀犱狅狊狌犾犳犪狀犪狀犱β犲狀犱狅狊狌犾犳犪狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳犳狅狉犲狓狆狅狉狋犪狀犱犻犿狆狅狉狋—犈狀狕狔犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅狉犫犲狀狋犪狊狊犪狔犿犲狋犺狅犱２００８０７１７发布２００９０２０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜２０９４—２００８前言本标准附录Ａ和附录Ｂ为规范性附录，附录Ｃ和附录Ｄ为资料性附录。本标准由国

2、家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、天津科技大学。本标准主要起草人：郑文杰、王硕、张宏伟、张燕、贺艳、刘火亘、林安清、赵卫东、魏亚东、吴延晖。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２０９４—２００８进出口食品中α硫丹和β硫丹残留量的检测方法酶联免疫法１范围本标准规定了进出口食品中α硫丹和β硫丹总残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于粮谷、蔬菜、茶叶、烟草、水果、肉及肉制品、虾中硫丹残留量的筛选检测。鱼类不适用酶联免疫法的测定，用胶体金试纸条法测定，方法见附录Ｂ。２

3、测定方法２．１方法提要用甲醇或丙酮提取样品中α硫丹和β硫丹，用竞争性酶联免疫法进行检测。２．２试剂和材料除另有要求外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。２．２．１甲醇。２．２．２丙酮。２．２．３亚铁氰化钾０．３６ｍｏｌ／Ｌ。２．２．４硫酸锌溶液１．０４ｍｏｌ／Ｌ。２．２．５磷酸氢二钠（Ｎａ２ＨＰＯ４·１２Ｈ２Ｏ）。２．２．６磷酸二氢钠（ＮａＨ２ＰＯ４·Ｈ２Ｏ）。２．２．７氯化钠。２．２．８无水醋酸钠。２．２．９β环糊精。２．２．１０过氧化氢脲。２．２．１１３，３′，５，５′四甲基对二氨基联苯。２．２．１２二甲基亚砜。２．２．１

4、３磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．４）：见附录Ａ。２．２．１４吐温２０。２．２．１５无水硫酸钠：６５０℃灼烧４ｈ，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。２．２．１６０．５％鱼皮胶水溶液（保存４℃保存）。２．２．１７掩蔽剂稀释液：０．５％鱼皮胶∶磷酸盐缓冲液（１∶２０，体积比）稀释，于使用时配制。２．２．１８溶液Ｉ：甲醇：掩蔽剂稀释液（１∶１０，体积比）。２．２．１９酶标记物：辣根过氧化物酶和半抗原的结合物，４℃保存，于使用时用磷酸缓冲液４０倍稀释，酶标物稀释８ｈ后不能继续使用。２．２．２０洗涤液，见附录Ａ。２．２．２１底物液Ａ，见附录Ａ。２．

5、２．２２底物液Ｂ，见附录Ａ。２．２．２３终止液：硫酸１．２５ｍｏｌ／Ｌ。２．２．２４α、β硫丹混合标准品（英文名称：α、βＥｎｄｏｓｕｌｆａｎ、ＣＡＳ代码：１１５２９７）：纯度大于等于９９．５％。２．２．２５标准品贮备液：配制成１μｇ／ｍＬ甲醇贮备液，－２０℃保存。１犛犖／犜２０９４—２００８低温保存试剂，放置于室温不要超过４ｈ，使用时，各溶液应达到室温。２．３仪器和设备２．３．１粉碎机。２．３．２旋涡混合器。２．３．３气浴摇床。２．３．４酶标仪。２．３．５市售硫丹检测试剂盒。２．３．６氮吹仪。２．３．７单道微量加样器：２０μＬ

6、，１００μＬ，２００μＬ。２．３．８多通道微量加样器：２００μＬ。２．４制样２．４．１蔬菜（大白菜、蒜、葱、茼蒿、小松菜、甘蓝（绿、紫）、卢笋、姜、菠菜、胡萝卜、芹菜）：称取５ｇ（精确到０．０１ｇ）粗粉碎样品到玻璃瓶中，加入２５ｍＬ甲醇，机械振荡（２５０ｒ／ｍｉｎ）１ｈ。室温静置分层，吸取２００μＬ上清液用掩蔽剂稀释液稀释１０倍后进行测定，胡萝卜稀释１５倍；芹菜稀释２０倍。２．４．２粮谷（红豆、绿豆、毛豆、花生）：称取１０ｇ（精确到０．０１ｇ）粗粉碎样品到玻璃瓶中，加入５０ｍＬ甲醇，机械振荡（２５０ｒ／ｍｉｎ）１ｈ。室温静置分层，吸取２

7、００μＬ上清液用掩蔽剂稀释液稀释２０倍后进行测定。２．４．３茶叶：称取５ｇ（精确到０．０１ｇ）粗粉碎样品到玻璃瓶中，加入２５ｍＬ甲醇，机械振荡（２５０ｒ／ｍｉｎ）提取１ｈ。室温静置分层，吸取１００μＬ上清液用掩蔽剂稀释液稀释９００倍后进行测定。２．４．４烟草：称取１０ｇ（精确到０．０１ｇ）粗粉碎样品到玻璃瓶中，加入５０ｍＬ甲醇，机械振荡（２５０ｒ／ｍｉｎ）１ｈ。静置１０ｍｉｎ，吸取１００μＬ上清液用掩蔽剂稀释液稀释２００倍后进行测定。２．４．５肉类（牛肉、羊肉、鸡肉）：称取１０ｇ（精确到０．０１ｇ）粗粉碎样品到玻璃瓶中，加入２０ｍＬ甲醇

8、，涡旋剧烈混合２ｍｉｎ，过滤，吸取２００μＬ上清液用掩蔽剂稀释液稀释１０倍后进行测定。２．４．６虾：称取１０ｇ（精确到０．０１ｇ）待测样，搅碎后加入２０ｇ无水硫酸钠搅匀，再加入２０ｍＬ丙酮、２００μＬ１．０