孔石莼抗病毒蛋白多糖的提取分离及抗柯萨奇病毒b3活性

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1、万方数据时珍国医国药2010年第2l卷第5期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL．21NO．5量，精密称定．按“2．2．1”项下制备供试液，照分光光度法在250nni处测定紫外吸光度，测定结果按外标法计算。结果见表4。衰3加样回收率试验结果序样品称重样品中葛根加入葛搬铡得葛根同收率平均回收R$D号m／mg索量m／mg索鼙m／mg索量m／mg(％)率(％)(％)l5．083．6622．9736．693101．9725．253．7842．9736．774100．583

2、5．293．8132．9736．78499．9445．133．6983．7167．38799．2855．213．7553．7167．504100．89l∞．691．2965．323，8353．7167．49598．5075．093．6694．4598．230102．2885．083．6624．4598．214102．0895．173．7274．4598．217100．703讨论前期实验中发现，不同厂家的葛根样品，葛根素含量相差较大，2005年版《中国药典》规定葛根应为野葛的干燥根，粉葛另为甘葛藤的干燥根，两者的葛根素含量差

3、别较大，为了保证本品临床疗效，故选择野葛投料。取对照品溶液1．0ml置25IIll的量瓶中，加30％乙醇至刻度，摇匀，在200-400ilm波长范围内测定葛根素的紫外吸收光谱，结果显示在250um处有最大吸收。另取供试品溶液在200—400am波长范围内测定紫外吸收光谱，结果也显示250am处有最大吸收。同时空白溶剂在此处几乎无吸收，说明溶剂对测定无干扰。因此，选择250am作为检测波长。采用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定葛根提取物中葛根素和总黄酮的含量，方法简便、准确、可靠，重复性良好，可为葛根提取物的质量评价提供检

4、测标准。参考文献：[1]国家药典委员会．中国药典，I部[S]．北京：化学工业出版社，2005：233．[2]李海丽．葛根的现代研究[J]．世界今日医学杂志，2007，8(1)：57．[3]张彤，郑彩美，陶建生，等．水提一壳聚糖澄清一大孔树脂纯化法制备葛根总黄酮工艺研究[J]．时珍国医国药，2008。19(6)：1324．孑L石莼抗病毒蛋白多糖的提取分离及抗柯萨奇病毒B3活性罗振宇1，陈薪研2，王小燕1，瞿畅1，张美英1，安卫征1，熊盛h(1．广州暨南大学生物医药研究开发基地，广东广州510632；2．广东药学院，广东广州5

5、10006)摘要：目的从绿藻孔石莼中分离具有抗病毒活性蛋白多糖提取物。方法新鲜孔石莼经pH7．0的磷酸盐缓冲液提取和硫酸铵沉淀得到粗提取物。大孔树脂层析分离得到蛋白多糖。经紫外扫描、高温高压处理(121℃，15min)和糖苷酶水解测定提取物的性质。MTr法检测蛋白多糖对Hela细胞的毒性，细胞病变法(CPE)检测蛋白对柯萨奇病毒B3(CVB3)引起的细胞病变抑制作用。通过样品对细胞的保护作用、对CVB3增殖的影响、对CVB3感染细胞的综合作用，初步研究了样品抗病毒作用的机理。结果从孔石莼中提取了蛋白多糖，得率为0．5％。毒

6、性试验结果表明，孔石莼蛋白多糖对He-IJa细胞的半数中毒浓度Tc50大于8rag·ml-‘。孔石莼蛋白多糖具有显著的抗cVB3活性，通过试验测得孔石莼蛋白多糖对CVB3主要是预防作用和直接杀灭作用，其IC∞为3．71xg·ml～。结论从孔石莼中分离到具有抗病毒活性的蛋白多糖，吴有很好的抗CVB3活性。关键词：孔石莼；提取；纯化；孔石莼蛋白多糖；抗病毒活性；CVB3中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1008-0805(2010)05—1090-04ExtractionandPurificationofAnti——

7、viralProteoglycanfromUlvaPertusaanditsActivityaganinstCoxsackieVirusB3ZHENYu—lu01，XINYan．chen2，NIAOYah—wan91，CHANGQul，MEIYing·zhan91，WEIzhen—anl，SHENGXion91+(1．BiomedicalResearch&DevelopmentCenter，YinanUniversity，Guangzhou，GuangdongChina510632；2．GuangdongPharmeceu

8、ticalUnive瑙ity，Guangzhou，Guangdong，China)Abstract：ObjectiveToisolateantivimsproteoglyeanfromthegreenalgae，Ulvapertusa．MethodsFreshUlvapertusawasexotmete