基质金属蛋白酶抑制剂ly52抗肿瘤侵袭与转移作用及其机理研究

《基质金属蛋白酶抑制剂ly52抗肿瘤侵袭与转移作用及其机理研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、山东大学硕士学位论文基质金属蛋白酶抑制剂LY52抗肿瘤侵袭与转移作用及其机理研究姓名：胡凌云申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：焦波20040510原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文／fi包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作山重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：翅逛亟口期：趔生：!：!星关于学位论文使用授权的声明本人完全了解I

2、l东大学有关保留

3、、使用学位论文的规定，同意学校保留或向圜家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东火学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在鳃密后应遵守此规定1论文作者签名：姻蕉亟导师签名：瞳遮目期：埋旦生主：!芷山东大学顾十学位论殳基质金属蛋白酶抑制剂LY52抗肿瘤侵袭与转移作用及其机理研究研究生：胡凌云导师：焦波副教授中文摘要基质金属蛋白酶(MatrixMetalloproteinases，MMPs)是一种活

4、性依赖锌离子和钙离子的蛋白水解酶，主要的生理功能是降解细胞外基质(ExtracellularMatrix．ECM)成分，如胶原、明胶、弹性蛋白、纤维粘连蛋白(Fibronectin，FN)、层粘连蛋白(Laminin，LN)和蛋白多糖等。在肿瘤的发生发展过程中，MMPs常过度表达。MMPs能通过打破基质的合成，降解的平衡而促进肿瘤细胞突破基底膜(Basementmembrane，BM)和ECM构成的组织学屏障，导致肿瘤的侵袭、转移及新血管形成，因此对MMPs的适当抑制和调控在一定程度上可以控制肿瘤的侵袭和转移，从而阻

5、断肿瘤的生长和发展。本研究通过一系列的体内外实验观察了一种人工合成的MMPs抑制剂LY52的抗肿瘤侵袭与转移作用，并探讨了其可能的作用机制。一、LY52对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移的抑制作用C57BL／6小鼠皮下接种Lewis肺癌复制自发性肺转移模型，次日随机分组并丌始灌胃给予LY52，并设N，S阴性对照组及替加氟(FT-207)阳性对照组，结果显示10mg．kg‘。、20mg·kg～、40mg·kg。1的LY52均可以显著降低肺转移灶数(p

6、小鼠的平均瘤重(p<0．05)。二、LY52对小鼠黑色素瘤B16一F10实验性肺转移的抑制作用C57BLl6小鼠尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞B16．F10，造成实验性肺转移模型，结果表明10mg．kg～、20mg·kg～、40mg·kgJ的LY52都可以显著降低实验性肺转移灶数(p<0．05)，并呈剂量依赖性。三、LY52对小鼠子宫颈癌U14肾侵袭的抑制作用山东大学硕J：学位论文将子宫颈癌U14瘤块移植于小鼠肾脏的包膜下，肿瘤生长并向肾实质侵袭，造成肾侵袭模型，而10mg·kg一、20rag-kg～、40mg-kg’1

7、的LY52可以明显抑制U14细胞向肾实质的侵袭(p<0．05)。四、LY52对小鼠肉瘤S180的抑制作用每鼠右前肢腋窝皮下接种S180细胞4×106个，次日分组给药，结果表明20rag·kg～、40mg·kg‘1的LY52能够抑制S180实体瘤的生长(p<0．05)，并且对小鼠体重和自细胞数没有明显影响。五、LY52对肿瘤细胞与基质成分黏附的影响将FN、LN、人工基底膜胶Matrigel铺于96孔培养板中，加入不同浓度的药物作用24h的肿瘤细胞(PC一3细胞和HepG2细胞)，经一定时闯的孵育后，细胞能黏附于基质成分

8、上，冲洗掉未黏附的细胞，利用MTT法检测黏附于板上的细胞数量。实验结果显示10～g．L～、10一g．L～、10～g·L’1的LY52都可以降低肿瘤细胞与基质成分的黏附(p<0．05)。六、LY52对肿瘤细胞分泌明胶酶能力的影响用含终浓度为0．1％明胶的SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法(明胶酶谱法)检测LY52对肿瘤细胞分泌明胶酶的影响，结果表明10。5g·L～、10～g·L～、10。g．L‘1的LY52可以明显减少肿瘤细胞明胶酶MMP一2和MMP一9的分泌。七、LY52对肿瘤细胞MMP一2表达的影响用免疫组织化学方法

9、检测体外培养肿瘤细胞MMP一2的表达，结果显示经10。59．L。1的LY52处理后，肿瘤细胞MMP一2的表达量明显减少，而104叠．L‘1的LY52处理后MMP一2很少表达。八、LY52对鸡胚尿囊膜血管生成的影响用鸡胚尿囊膜法观察LY52对新生血管生成的影响，结果显示0．1lag的LY52即能够抑制鸡胚尿囊膜血管的生成。九、LY52对肿瘤细胞生