低强度脉冲式超声波（lipu）对体外兔bmscs的生物学效应及作用机制研究

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1、第二军医大学博士学位论文低强度脉冲式超声波（LIPU）对体外兔BMSCs的生物学效应及作用机制研究姓名：汤旭日申请学位级别：博士专业：外科学（骨科学）指导教师：张少成;王秋根20080501英文缩写bFGFBMSCscDNACoilDABddH20DEPCDMBE硼EDTAFBSGAGHG一嘲雕LG-DMEMIG卜ILIPUmRN矗ODPAGEPBSPCRrpmR墨一PCRSATASDSTGF—B1低强度脉冲超声波对体外兔BMSCs的生物学效应及作用机制研究英文缩略词表英文全称basicFibroblastGrowthF

2、actorBonemarrowMesenchymalStemCellscomplement8rydeoxyribonucleicacidcollagen3，3，--diaminobenzidenedidistilledH20diethylpyrocarbonateDimethylmethyleneblueExtracellularmatrixEthylenediamineteaaceticacidFetalBoyineSerumGlycosaminoglycans中文全称碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞互补脱氧核糖

3、核酸胶原3，3，一二氮基联苯胺双蒸水二乙基焦碳酸盐二甲基渡甲蓝细胞外基质2一二乙酰四乙酸胎牛颤涛糖胺多糖HighGlucosumDulbeccoModifiedEagle’SMedium高糖嘲脒培养基LowGlucosumDulbeccoModifiedEagle’SMedium低糖溯EM培养基Insulin—likedgrowthfactorLow-intensityPulsedUltrasoundmessengerribonucleicacidOpticalDensitypolyacrylamidegeleleetr

4、ophoresisPhosphateBufferedSalinePolymeraseChainReactionrotationsperminuteReverseTranscriptionPERSpatialandtemporalaverageSodiumDodecylSulfateTransformingGrowthFactor””beta1胰岛素样生长因予低强度脉冲式超声波信使核糖核酸光密度聚丙爝酰胺凝胶嗽泳磷酸盐缓冲液聚合酶链反应每分钟转速逆转录聚合酶链反应空间瞬时平均值十二烷基硫酸钠转化生长因子一pl_7．独创性声

5、明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：渤旭a签字日期：。卜有年J碉J口日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，

6、可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：。肪7巴日签字日期：cp7年期岁。日Il导师签名：沙匆氏签-7日期：≯嗍年多月；oEt低强度脉冲超声波对体外兔BMSCs的生物学效应及作用机制研究摘要关节软骨损伤是临床常见疾患，由于其无神经支配、缺乏血液供应、软骨细胞增殖迁移能力低等组织学特点，关节软骨自身修复能力非常有限，损害后易出现不可逆的关节功能障碍，因此关节软骨损伤的治疗是运动医学研究的热点和难点之一。目前实验和临床研究证实应用软骨下骨板钻孔或微骨折等技

7、术，可使骨髓腔内未分化的间充质细胞(BMSCs)迁移到缺损区，并增殖、分化形成类透明软骨组织，尽管远期效果不理想，但也显示了关节软骨组织在特定的条件下具有一定的修复能力。因此提高骨髓间充质干细胞向软骨细胞定向分化能力并进一步改善新生软骨的质量，可能是促进关节软骨损伤修复的有效途径之一。而近年来的研究表明低强度脉冲超声(LowIntensityPulsedUltrasound)能促进骨折、骨不连的愈合，其机制是加速了软骨的形成及软骨内骨化。也有动物实验研究报道，低强度脉冲超声波具有促进关节骨一软骨缺损修复的作用。然而目前关

8、于LIPU对BMSCs等生物学效应及作用机制仍缺乏了解，临床应用缺乏足够的理论和实验依据。本课题拟通过构建BMSCs-软骨细胞的藻酸盐三维共培养体系，予以不同强度LIPU刺激，观察BMSCs的增殖能力、细胞表型及合成分泌细胞外特异性基质、细胞调控因子水平的变化，从细胞、分子生物等层面探讨LIPU对BMSCs的生物学效