壳聚糖减肥及保护胃黏膜作用的实验研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com志2004年l2月第l4卷第6期ChineseJournalofHealth685相化的细胞吸附,将吸附后的细胞接种活细胞培养,至第七天可见活的草履虫、鞭毛虫样的原虫)。时细胞仍生长良好,未能检出脊灰病毒。而加入已知的1011C一将水样浓集后直接用PCR法检测水中病毒的报导【4有Ⅲ,0脊灰病毒后,再用固相化的细胞吸附,经培养,第四天时开很多,据认为能够检出1TCII),。量的病毒。但一些权威著始出现CPE。作对RT—PCR法也有较详细的论述,认为RT—PCR法效2.3PCR检测结果病毒种接种细胞培养后收获

2、的原液,经率低,需要模板的量为102~1个拷贝。据我们的实验,当病滴定,病毒浓度为107.93TCIDso/0.1ml。将其稀释为1、1、毒量下降至501℃时,不能扩增出脊灰病毒的特异性条带,103、102、10TCIDso/0.1ml,连同原液,分别取(所取液中含而这个剂量已经超出了细胞吸附能力的上限。因此,我们脊灰病毒的量分别为5×10s、5×103、5×102、5×10、5×10~认为RT—PCR法虽可用于脊灰病毒的鉴定等,但不宜直接用11CⅡ),多次用RT—PCR法检测,原液及病毒浓度为1、l、于浓集水样中脊灰病毒的检测。103TCIDso/O

3、参考文献.1ml时,可以扩增出脊灰病毒的特异性条带[1]丁昌慧,邵荣标,钱绩虎,等.外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验(109bp);而病毒浓度在102、10。TEID,o/0.1ml时以及吸附了脊研究[J].中国卫生检验杂志,20O0,10(2):163—165.灰病毒的固相化细胞,虽经多次试验,但均未检出脊灰病毒的[2]邵荣标,丁昌慧,吴巨飞,等.水中病毒细胞吸附浓集法所用细胞的特异性条带。固相化研究[J].中国卫生检验杂志,2004,14(3):2PS一296.3讨论[3]汤权,邵荣标,丁昌慧,等.一步法逆转录聚合酶链反应检测脊髓实验结果表明,用固

4、相化的L20B细胞吸附法浓集水中的灰质炎病毒[J].交通医学,2001,15(5):471—472.病毒,其有效检测限度为1011CⅡ,当其浓度低至2TCIDso及以[4]Grabow7/0,BotmaKL,deVilliersJC,eta1.A孽e髓lentofceUeuhnre下时,多数情况下已检不出病毒,说明其检测敏感度低于活的andpolymerasechainre氍虹∞proceduresforthedetectionofp0liovimsinI20B细胞吸附浓集法⋯,我们认为这是由于细胞膜经固相化wastewater[J].BullWorl

5、dHealthOrgan,1999,77(12):973—980.处理,其表面的受体在一定程度上受到了损伤,因而降低了吸15JGilgenM,GermannD,IalthyJ,eta1.Three—stepisolationmethodforsensitivedetectionofenterovin~,rotavinls,hepatitisAvinls,andsmall附能力所致。roundstructuredvirusesinWStelrumpl,~[j].InternationalJournalofFood医院污水中会有各种耐药的细菌菌株,且各医院

6、排出的Microbiology,1997,37:189—199.污水中的耐药菌株也有可能不相同,因此,要控制医院污水中[6]GantzerC,SenonciS,MallA,eta1.Enterm,imsgonomesinwastewater:的细菌,难度较大。虽然城市污水中的细菌、真菌、病毒、原虫concentrationonasswoolandda8sp0wd目anddetectionby盯一PCR也非常多,但预处理后用固相化的L20B细胞吸附,再经特殊[J].JournalofvimcalMethods,1997,65.265—271.处理,可以用

7、细胞培养法检测其中的脊灰病毒。在处理吸附[7]斐晓方,许欣.PCR技术及其在卫生检验中的应用[J].中国卫生检的细胞时,经4次洗涤,基本可去除化学污染,使其不影响活细验杂志,2003,13(2):254—255.胞的生长;也可除去绝大多数的生物污染,残存的生物污染还[81j.萨姆布鲁克,D.W.拉赛尔著,黄堵堂,等译.分子克隆实验指需进一步处理,如加用足够量的有效抗菌素(包括抗真菌药氟南[M].第3版.北京:科学出版社,2003.643.康唑等)、选用特异性较强的细胞株进行病毒培养、冰冻法杀(收稿日期:2004-07-04)死原虫等(未经冰冻处理的污水

8、浓集物,用倒置显微镜观察,【研究报告】[文章编号]1004—8685(2004)06—685—

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