d氨基葡萄糖盐酸盐诱导淋巴细胞增殖及其机制

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1、万方数据中国生化药物杂志Chine∞JournalofBiochemicalPharmaceufie82009年第30卷第4期235D一氨基葡萄糖盐酸盐诱导淋巴细胞增殖及其机制曹秀明，马娇，万晓峰(哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物所抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心，黑龙江哈尔滨150076)摘要：目的研究D．氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)对小鼠淋巴细胞增殖及其作用机制。方法利用荧光染料C骼E为细胞标记，研究GAH对小鼠淋巴细胞增殖的影响。激光共聚焦显微镜、流式细胞仪分别检测GAH对细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白(CaM)表达的影响。结果GAH可使

2、淋巴细胞增殖。加入GAH2，4，6h后，细胞内Ca2+浓度与对照组相比显著升高。GAH作用72h后，细胞内CaM阳性表达细胞的百分率与对照组相比显著增加，由(61．80-4-0．97)％增至(79．21±0．95)％，说明GAH能够诱导淋巴细胞内CaM表达增加。结论GAH能够提高淋巴细胞内Ca2+浓度，促进CaM表达，触发Ca2+信号通路，活化淋巴细胞增殖。关键词：D．氨基葡萄糖盐酸盐；淋巴细胞增殖；ca2+；钙调蛋白中图分类号：R965文献标识码：A文章编号：1005．1678(2009)04．0235．04EffectofD-glucosamine

3、hydrochlorideonlymphocytesproliferationanditsmi}chanismCAOXiu—ruing，MAJiao，WANXiao-feng(InstituteofMeteriaMedwa，ResearchCenteron啦SciencesandEnvironmetalSciencestHarbinUniversityofCommerce，EngineeringResearchCenterofNaturalAnticancerDrugs，^九乃曲砂ofEducation，Har6in150076，China)Abstr

4、act：PurposeToinvestigatetheeffectofD·gluco乩minehydrochloride(GAH)onlymphocytespro-liferationanditsmechanism．MethodsFluorochromelabel，scanningmicroscopeandflowcytometrywereusedtoinvestigatetheeffectsofGAHonlymphocytesproliferation，intraeellularCa2+concentrationandexpressionofcalm

5、odulin(CaM)．ResultsGAHcaninducelymphocytesproliferation2，4and6hafterbeingtreatedwithGAH．andintracellularCa2+concentrationwassteppedup72hafterbeingtreatedwithGAH．ThepercentageofintracellularcalmodulinexpressionWaSincreasedbyGAH．ConclusionGAHCanincreasetheintracellularCa2+，ineoura

6、gecalmodulinexpressionandtriggerCa2+signalpathwayandaetiv砒elymphocytesproliferation．Keywords：D·0．c嗽minehydrochloride；lymphocyteproliferation；Ca2+；ealmodulinD．氨基葡萄糖盐酸盐(D．glucosaminehydrochlo．ride，GAH)是甲壳素在盐酸中经充分降解得到的壳寡糖衍生物uJ，是一种在人体内具有重要生理意义的海洋生物制剂幢J。GAH可减轻关节疼痛，延缓和改变骨关节炎的病理进程【31；诱

7、导白血病细胞向巨噬细胞样分化【4o；诱导黑色素瘤向正常细胞转化【51；增加荷瘤小鼠淋巴细胞转化率№J。本实验通过研究GAH对小鼠淋巴细胞增殖、细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白(CaM)表达的影响，阐明GAH诱导小鼠淋巴细收稿日期：2009-02．16基金项目：黑龙江省科技厅自然科学基金(D2007-4S)作者简介：曹秀明(1964-)，女，黑龙江哈尔滨人，副研究员。Tel：0451．84866922，E·mail：xiuming一2124294@163．㈣o胞增殖的作用机制。1材料1．1药品与试剂小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；RPMI1640

8、培养液(Gibeo公司)；Fum一3／AM钙离子荧光探针、ConA(美国Sigma公司)；CF